曾橋 韋承伯 呂生華

摘要 杜仲葉屬可再生資源，產量巨大，由于其活性成分含量豐富，藥理作用突出，因而受到了研究者的廣泛關注。綜述了杜仲葉的主要活性成分最新研究進展，為杜仲葉的進一步開發(fā)和在食品、醫(yī)藥中的應用提供了參考。

關鍵詞 杜仲葉；活性成分；研究進展

中圖分類號 S789.4 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2017）34-0133-03

Abstract Eucommia ulmoides leaves were renewable resources and huge yield，Eucommia ulmoides leaves were widely concerned by researchers because its rich of active components and pharmacological effects.The paper introduced about the recent research progress of active components of Eucommia ulmoides leaves，which provides the references for the further development and its application in food and medicine of Eucommia ulmoides leaves.

Key words Eucommia ulmoides leaves；Components；Research progress

杜仲為杜仲科杜仲屬植物，《中國藥典》記載其有補肝腎、強筋骨、安胎等功效，用于肝腎不足、腰膝酸痛、筋骨無力、頭暈目眩、妊娠漏血、胎動不安[1] 。我國杜仲資源豐富，研究利用歷史悠久，傳統(tǒng)上杜仲主要以皮入藥，樹齡需達到一定年限方可剝皮，然而杜仲樹干剝皮后需間隔3～4年后方可再次剝皮，而且剝皮后杜仲樹若養(yǎng)護措施不足，極易造成皮剝樹死，從而對杜仲資源造成極大浪費，嚴重影響杜仲資源的可持續(xù)發(fā)展。

杜仲葉為每年夏秋兩季杜仲樹枝繁葉茂時采摘，經干燥后所得。研究表明，杜仲葉與杜仲樹皮活性成分基本一致，藥理作用基本相同。相較于杜仲皮，杜仲葉具有來源豐富、再生循環(huán)能力強、合理采摘對杜仲資源不會造成破壞等特點。近年來，有關學者對杜仲葉有效成分和藥用價值進行了大量的研究，以期在實際應用中替代杜仲樹皮，這對于促進杜仲資源可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。研究表明，杜仲葉所含的有效活性成分主要包括黃酮類、綠原酸、環(huán)烯醚萜類、多糖類、多酚類、苯丙素類、木脂素類等化合物。藥理研究結果表明，杜仲葉具有降血壓、調節(jié)血脂、防治骨質疏松、降血糖、鎮(zhèn)靜安神、抗疲勞等作用，在食品、醫(yī)藥行業(yè)具有廣泛的應用價值。筆者對杜仲葉的主要活性成分研究進展進行了綜述，為杜仲葉的進一步利用開發(fā)提供了理論依據(jù)。

1 黃酮類化合物

黃酮廣泛存在于各種植物、果蔬中[2]。大豆異黃酮是國內較早研究的一類黃酮化合物，隨著人們對黃酮類化合物的深入研究，許多新的植物黃酮類化合物逐步被發(fā)掘出來，其中中草藥黃酮類化合物是研究的重點，研究較多的包括甘草黃酮、葛根黃酮、銀杏黃酮類化合物等。杜仲葉中也含有豐富的黃酮類化合物，國內許多學者對杜仲葉總黃酮的提取、化學成分等進行了研究。

唐芳瑞等[3]對杜仲葉中黃酮類化學成分進行了分離純化，得到了10種黃酮類化合物，并對其中的8種化合物進行了結構鑒定，包括槲皮素、蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、異槲皮苷、quercetin-3-0-sambubioside、kaempherol-3-0-samb-ubioside、quercetin-3-0-α-L-arabinopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranos-ide。胡庭坤等[4]對杜仲葉中總黃酮的提取工藝進行了研究，結果表明，超聲法是提取杜仲葉中黃酮類化合物的較好方法，采用濃度為80%的乙醇溶液，在料液比為1∶15時提取30 min，總黃酮提取率可達到2.42%。該方法較傳統(tǒng)的浸泡提取法提取效率明顯提高。魏艷秀等[5]對湖南、廣西、河北、浙江、貴州、河南等不同地區(qū)杜仲葉黃酮含量差異性進行了研究，結果表明，來源不同杜仲種質資源中總黃酮含量差異較顯著，河北地區(qū)杜仲葉總黃酮含量最高，廣西地區(qū)最低。劉榮華等[6]對不同產地杜仲葉中桃葉珊瑚苷、京尼平苷酸、兒茶素、綠原酸、蘆丁進行了研究，結果表明，陜西黃陵蘆丁含量最高，四川渠縣最低，說明杜仲葉中有效成分含量存在地域性差異。此外，同省份杜仲葉中上述成分含量也存在顯著性差異，表明杜仲葉干燥處理方式對有效成分有較大影響。周程艷等[7]研究表明，采收時間對于杜仲葉總黃酮含量也有影響，杜仲葉中總黃酮含量在每年4月達到最高，其后逐步降低。

2 綠原酸

綠原酸屬于苯丙素類化合物，廣泛存在于金銀花、牛蒡葉、向日葵、雪蓮果、蒲公英等植物中，杜仲葉中也含有豐富的綠原酸，含量一般可達1%～5%，為杜仲葉主要有效成分之一。綠原酸具有較好的抗菌、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤等生理功能[8]，因而在保健食品和醫(yī)藥行業(yè)具有很廣泛的應用。我國杜仲葉分布廣泛，產量巨大，且多為野生，是非常好的綠原酸原料來源，以杜仲葉為原料制備綠原酸具有得天獨厚的優(yōu)勢。

李旭等[9]對微波輔助提取杜仲葉中綠原酸的工藝進行了研究，響應面優(yōu)化提取工藝結果表明，杜仲葉粉碎至80目，以30%乙醇為提取溶劑，料液比為1∶26（g∶mL），微波功率為722 W時，提取2.5 min，綠原酸提取量可達 29.74 mg/g。與醇提相比，水提則相對方法簡單，經濟節(jié)約，葉宏等[8]以水為溶劑提取杜仲葉中的綠原酸，提取率可達95%。

杜仲葉在我國分布廣泛，杜仲葉中綠原酸地域差異明顯。劉榮華等[6]對江西、四川、湖南、湖北、貴州、陜西等17個不同地區(qū)的杜仲葉所含綠原酸進行了研究，結果表明，湖南省溆浦縣杜仲葉中綠原酸含量最高，四川省渠縣含量最低，前者含量為后者近5倍。除地域差異外，采收期、杜仲樹齡、干燥方法以及儲存時間均對杜仲葉中綠原酸含量有較大影響。楊凌等[10]比較了四川浦江縣杜仲葉基地不同樹齡杜仲葉中綠原酸的含量，結果表明，樹齡越大，綠原酸含量越低。張萬鋒[11]以安康藥物研究所的試驗杜仲林采摘的杜仲葉為原料，研究不同采摘月份綠原酸含量的變化，結果表明，杜仲葉中綠原酸的含量從4月起逐步增加，至6月份達到最高，后又逐漸降低，說明以綠原酸為目標的采摘最佳時間為6月。何希瑞等[12]分別研究了低溫減壓干燥、自然陰干和曬干3種干燥方法對杜仲葉成品綠原酸含量的影響，結果表明，低溫減壓干燥效果最好，自然陰干所得杜仲葉中綠原酸含量最低。

3 環(huán)烯醚萜類化合物

環(huán)烯醚萜類化合物在自然界存在廣泛，國內研究較多的包括玄參、梔子、地黃、女貞子、忍冬屬以及龍膽屬類植物等。杜仲葉含有豐富的環(huán)烯醚萜類化合物，張倩茹等[13]對杜仲葉中環(huán)烯醚萜類化合物進行了提取，含量可達5.07 mg/g。杜仲葉中環(huán)烯醚萜類化合物主要包括京尼平苷、京尼平苷酸、京尼平、桃葉珊瑚苷等，除此外，左月明等[14]還首次從杜仲葉中分離出交讓木苷、雞屎藤苷甲酯、馬錢素、8-表馬錢素、7-表馬錢素、去乙酰車葉草苷酸甲酯等環(huán)烯醚萜類化合物。目前，杜仲葉中研究較多的環(huán)烯醚萜類化合物主要是京尼平苷、京尼平苷酸和桃葉珊瑚苷等。

杜仲葉中環(huán)烯醚萜類化合物提取方法較多，常見包括乙醇回流提取、超聲提取、水熱浸提、微波法以及雙水相氣浮溶劑浮選技術等。張倩茹等[13]以桃葉珊瑚苷為指標，采用85%乙醇溶液為溶劑，料液比為1∶12，于80 ℃回流提取3次，每次45 min，提取率可達0.507%。趙帥等[15]采用乙醇/NaH2PO4雙水相氣浮溶劑浮選技術對杜仲葉中京尼平苷酸進行分離和富集，復選效率可達97.88%，富集倍數(shù)可達27.34倍。劉靜等[16]對乙醇回流提取、超聲提取、水熱浸提、微波法等不同方法提取杜仲葉中桃葉珊瑚苷和京尼平苷酸的提取效率進行了研究，結果表明，回流提取法效果最好，其對桃葉珊瑚苷的提取含量可達58.79 μg/g，京尼平苷酸的提取含量可達107.96 μg/g，通過工藝優(yōu)化，于最佳條件下，桃葉珊瑚苷和京尼平苷酸的提取含量分別可達87.96和187.43 μg/g。

劉榮華等[6]研究了江西、四川、湖南、湖北、貴州、陜西、河南等17個不同地區(qū)采摘于5—6月份杜仲干葉中桃葉珊瑚苷和京尼平苷酸的含量差異，結果表明，河南省內鄉(xiāng)縣以及陜西省黃陵縣杜仲葉桃葉珊瑚苷含量最高，分別達6.69%和4.98%，且地區(qū)差異顯著，最低為四川省劍閣縣，含量僅為0.12%；河南省新鄭市以及陜西省黃陵縣京尼平苷酸含量較其他地區(qū)高，含量分別可達2.74%和2.54%。該研究結果提示，若以桃葉珊瑚苷和京尼平苷酸為提取目標，則應選取河南省內鄉(xiāng)縣杜仲葉為原料，提取率較高。宣志紅等[17]以浙江省諸暨市同山鎮(zhèn)所產杜仲曬干葉為原料，研究了2011年4—11月不同時期采收的杜仲葉中京尼平苷酸和京尼平苷的含量，結果表明，京尼平苷酸和京尼平苷的含量均先增大后降低，京尼平苷酸的含量在7月達到最高，為2.615%，京尼平苷的含量在6月達到最高，為0.081%，因此，為了獲得較高提取率的京尼平苷和京尼平苷酸，采收時間以每年6月和7月為宜。

4 多糖類化合物

研究表明，杜仲多糖具有較好的抗疲勞[18]、提高機體免疫[19]、降血糖、降血脂[20]等作用。杜仲葉中含有豐富的多糖，成分復雜，國內目前對于多糖組成成分研究較少，張學俊等[21]對杜仲葉中具有抗補體作用的活性多糖進行了分離，氣相色譜分析結果表明，該多糖由L-鼠李糖、D-巖藻糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、糖醛酸等組成。杜仲葉中含有的一類酸性多糖具有較好的抗感染、抑制先天性免疫缺陷等作用。董娟娥等[22]對已提取過有效成分的杜仲葉藥渣中的酸性多糖提取工藝進行了研究，結果表明，杜仲葉藥渣中粗酸性多糖含量為6.43%。黃偉等[23]對杜仲葉粗多糖一個分離純化組分進行了結構解析，結果表明，該酸性雜多糖主要由半乳糖醛酸、半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿拉伯糖和葡萄糖組成，分子量為6.0×105D。

杜仲葉多糖的提取大多采用水提取法，劉軍海等[24]對杜仲葉多糖提取工藝進行了研究，首先采用80%乙醇溶液回流1 h以脫色除雜，然后采用蒸餾水回流提取，影響多糖提取率的主要因素包括料液比、提取溫度和提取時間；響應面優(yōu)化結果表明，最佳提取溫度為84 ℃，浸提時間為1.3 h，料液比為1.0∶14.3，多糖提取率可達1.775 6%。此外，超聲輔助提取和微波輔助提取也是常見的多糖提取方法，但用于杜仲葉多糖提取的研究較少，應加緊這方面的研究，從而為杜仲葉的開發(fā)利用打下基礎。

5 多酚類化合物

多酚類化合物具有較好的抗氧化活性，在自然界廣泛存在，研究和應用較多的有茶多酚、葡萄籽多酚、蘋果多酚、石榴皮多酚等。杜仲葉中也含有多酚類化合物，國內相關學者進行了杜仲葉多酚的研究。劉迪等[25]研究表明，杜仲葉提取物具有較好的抗氧化活性是由于其中含有豐富的多酚成分，通過以陜西略陽縣杜仲葉為原料，首先獲得杜仲葉提取物后，經樹脂分離純化，進一步采用有機溶劑萃取，經冷凍干燥獲得杜仲葉多酚；體內抗氧化活性結果表明，杜仲葉多酚可顯著減少小鼠體內丙二醛含量，正丁醇多酚萃取物還能增強超氧化物歧化酶和谷胱甘肽活過氧化物酶活；體外抗氧化性結果表明，正丁醇多酚萃取物對羥自由基（·OH）清除能力均較Vc顯著提高，其對超氧陰離子（O2-·）的清除能力均與Vc相當；乙酸乙酯和正丁醇多酚萃取物對1，1-二苯代苦味?；杂苫―PPH·）的清除效果則與Vc相當。

張琳杰等[26]以采摘于吉首大學張家界校區(qū)杜仲試驗基地的杜仲葉為原料，采用響應面法對超聲波輔助提取杜仲葉中總多酚提取工藝進行了優(yōu)化研究，在所確定的最優(yōu)條件下，總多酚得率為4.678%。有研究表明，杜仲葉中多酚含量地域差異明顯，魏艷秀等[5]對來源于湖南、廣西、河北等10個不同地區(qū)的杜仲葉中多酚含量變化進行了研究，結果表明，湖南與貴州地區(qū)杜仲葉中多酚含量最高，分別可達49.16和48.76 mg/g，河南地區(qū)最低，為37.31 mg/g。杜仲葉中多酚含量與傳統(tǒng)中藥材相當，甚至顯著高于金銀花、連翹等常用藥材，說明杜仲葉開發(fā)潛力巨大。

6 展望

杜仲葉活性成分豐富，除上述活性成分外，杜仲葉中還有木質素、苯丙素、杜仲醇等其他活性成分。傳統(tǒng)的以杜仲皮入藥造成了杜仲資源的破壞和浪費，通過對杜仲葉的研究，以期在實際應用中能代替杜仲樹皮，不僅可以為食品、醫(yī)藥行業(yè)提供豐富的原料來源，而且保護了杜仲資源。近年來，研究者主要對杜仲葉活性成分的提取分離以及藥理作用進行了深入的研究，為杜仲葉在食品、醫(yī)藥行業(yè)的應用提供了依據(jù)，還應進一步加強杜仲葉中藥現(xiàn)代化研究，從而促進其在醫(yī)藥行業(yè)的更深入和廣泛的應用。杜仲作為我國特有的樹種，分布廣泛，相較于杜仲樹皮，杜仲葉屬于可再生資源，產量巨大，加緊對杜仲葉的研究和開發(fā)應用必將產生巨大的經濟效益和社會效益。

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