王穎超，朱桂英，張秋堂，蔣蘭君，李壯壯

·論著·

傳染性單核細胞增多癥和慢性活動性EB病毒感染患兒免疫功能分析

王穎超1*，朱桂英1，張秋堂2，蔣蘭君1，李壯壯1

傳染性單核細胞增多癥；皰疹病毒4型,人；T淋巴細胞亞群；免疫球蛋白同型

王穎超，朱桂英，張秋堂，等.傳染性單核細胞增多癥和慢性活動性EB病毒感染患兒免疫功能分析[J].中國全科醫(yī)學，2017，20(17)：2089-2094.[www.chinagp.net]

WANG Y C,ZHU G Y,ZHANG Q T.Immunologic function in children with infectious mononucleosis and infected with Epstein-Barr virus[J].Chinese General Practice，2017，20(17)：2089-2094.

Immunologic Function in Children with Infectious Mononucleosis and Infected with Epstein-Barr VirusWANGYing-chao1*,ZHUGui-ying1,ZHANGQiu-tang2,JIANGLan-jun1,LIZhuang-zhuang1

1.DepartmentofPediatrics,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China

2.InstituteofHematology,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China

*Correspondingauthor:WANGYing-chao,Associatechiefphysician,Mainresearchdirection:bloodandtumordiseasesinchildren;E-mail:yingchaowang152@163.com

Infectious mononucleosis；Herpesvirus 4,human；T-lymphocyte subsets；Immunoglobulin isotypes

同行評議：

EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)，又稱人類皰疹病毒4型(human herpes virus 4,HHV-4)，屬于皰疹病毒科嗜淋巴細胞病毒屬成員。人群對EBV普遍易感，多數(shù)人初次感染發(fā)生在兒童或者青少年時期，并可終生攜帶。據(jù)統(tǒng)計，中國>8歲人群90%以上血清學陽性[1]。典型的EBV初次感染表現(xiàn)為傳染性單核細胞增多癥(IM)，多呈自限性，預后良好[2]；值得注意的是，在免疫抑制、遺傳缺陷或潛伏感染反復激活的情況下，EBV感染可導致不良預后，如進展為慢性活動性EBV感染(CAEBV)、EBV相關噬血細胞綜合征、淋巴瘤等。有研究認為，EBV能有效刺激細胞介導的免疫反應，影響機體免疫功能，且免疫功能低下者感染EBV后病情易惡化，病死率較高[3-4]。EBV可感染T、B淋巴細胞及自然殺傷細胞，引起免疫系統(tǒng)紊亂，因此宿主對EBV的免疫應答功能狀態(tài)與感染后不同臨床表現(xiàn)、疾病轉歸密切相關。本研究通過檢測EBV感染引起的兒童IM和CAEBV外周血淋巴細胞亞群及免疫球蛋白的水平，并與健康兒童的相應指標作對比分析，旨在深化對該病發(fā)病機制的認識，為臨床診治提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2010年5月—2016年5月在鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒科診治，且進行過外周血淋巴細胞亞群及免疫球蛋白檢測的EBV感染患兒共34例，其中IM組20例、CAEBV組14例。IM、CAEBV診斷均符合《兒童主要非腫瘤性EB病毒感染相關疾病的診斷和治療原則建議》[5]。IM組納入標準：包括IM的臨床診斷和實驗室診斷標準。臨床診斷：滿足下列臨床指標中任意3項及實驗室指標中第4項；實驗室診斷：滿足下列臨床指標中任意3項及實驗室指標中第1～3項中任意1項。臨床指標：(1)發(fā)熱；(2)咽扁桃體炎；(3)頸淋巴結腫大；(4)脾大；(5)肝大；(6)眼瞼水腫。實驗室指標：(1)抗EBV-病毒衣殼抗原(VCA)-IgM和抗EBV-VCA-IgG抗體陽性，且抗EBV-核抗原(NA)-IgG陰性；(2)抗EBV-VCA-IgM陰性，但EBV-VCA-IgG抗體陽性，且為低親和力抗體；(3)雙份血清抗EBV-VCA-IgG抗體滴度4倍以上升高；(4)外周血異型淋巴細胞分數(shù)≥0.10和/或淋巴細胞計數(shù)增多≥5.0×109/L。CAEBV組納入標準：同時滿足下列(1)、(2)和(3)者，(1)IM樣癥狀持續(xù)或反復發(fā)作3個月以上；(2)EBV感染及引起組織病理損害的證據(jù)，即①血清EBV抗體滴度異常增高，包括抗VCA-IgG≥1∶640或抗EA-IgG≥1∶160，VCA-IgA和/或EA-IgA陽性；②外周血單核細胞(PBMC)中EBV-DNA水平高于1.0×102.5拷貝/μg，或血清、血漿EBV-DNA陽性；③受累組織中EBV-EBERs原位雜交或EBV-潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫組織化學染色陽性；(4)Southern雜交在組織或外周血細胞中檢測出EBV-DNA；(3)排除目前已知自身免疫性疾病、腫瘤性疾病以及免疫缺陷性疾病所致的上述臨床表現(xiàn)。選取體檢健康的兒童20例為對照組，對照組兒童均無急慢性疾病史及家族遺傳性疾病史。

1.3 免疫球蛋白檢測 采集清晨空腹靜脈血2 ml于干燥試管中，待凝固后3 400 r/min離心8 min(離心半徑15 cm)，立即分離血清，嚴格按照廠家說明書進行操作，采用免疫散射比濁法檢測血清IgA、IgG、IgM水平，所用試劑由美國Beckman Coulter公司提供。

2 結果

2.1 3組性別、年齡比較 3組性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05，見表1)。

2.3 3組免疫球蛋白水平比較 3組IgM比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；3組IgA、IgG比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。其中IM組和CAEBV組IgA、IgG較對照組升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表3)。

表1 3組性別、年齡比較

注：IM=傳染性單核細胞增多癥，CAEBV=慢性活動性EB病毒感染；a為H值

表3 3組免疫球蛋白水平比較

注：與對照組比較，aP<0.05

表2 3組外周血血常規(guī)及淋巴細胞亞群結果比較〔M(P25，P75),×109/L〕

注：與對照組比較，aP<0.05；與IM組比較，bP<0.05

注：IM=傳染性單核細胞增多癥，CAEBV=慢性活動性EB病毒感染，F(xiàn)ITC=異硫氰酸熒光素，APC=藻青蛋白，PE=藻紅蛋白

圖1 3組外周血淋巴細胞亞群流式細胞術結果

Figure 1 Flow cytometry results of lymphocyte subsets in peripheral blood among three groups

3 討論

本研究結果表明，IM和CAEBV組患兒外周血IgA、IgG水平均明顯高于對照組，提示患兒體內存在強烈的免疫反應。EBV長期潛伏于人體是其致病的一個重要條件，作為抗原，EBV能通過刺激機體產生特異性抗體，形成免疫復合物；另外，促使補體激活免疫細胞，引發(fā)強大的免疫效應，進而導致自身免疫系統(tǒng)受損[15]。然而，這些免疫紊亂是否是由EBV感染引起的，還是患兒本身存在免疫缺陷并在EBV的誘導下而表現(xiàn)出來，或者還有其他目前不清楚的原因，尚待進一步研究。

作者貢獻：王穎超進行文章的構思與設計，負責文章的質量控制及審校，對文章整體負責，監(jiān)督管理；朱桂英、張秋堂進行研究的實施與可行性分析；李壯壯進行數(shù)據(jù)收集；蔣蘭君進行數(shù)據(jù)整理；朱桂英、蔣蘭君進行統(tǒng)計學處理；王穎超、朱桂英進行結果的分析與解釋,論文的修訂；朱桂英撰寫論文。

本文無利益沖突。

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(本文編輯：陳素芳)

R 512.7

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.17.010

2016-09-26；

2017-03-30)

1.450052河南省鄭州市，鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒科

2.450052河南省鄭州市，鄭州大學血液病研究所

*通信作者：王穎超，副主任醫(yī)師，主要研究方向：兒科血液與腫瘤；E-mail：yingchaowang152@163.com