鄭文博 毛中鵬

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放射免疫分析法對原發(fā)性肝癌的早期診斷及價值

鄭文博 毛中鵬

目的 探討放射免疫法(RIA)在原發(fā)性肝癌早期診斷中的應(yīng)用價值及可行性。方法 應(yīng)用放射免疫法，檢測239例肝病患者血清中甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)比值，以AFP-L3/AFP≥10%為陽性指標(biāo)，并跟蹤研究其病程發(fā)展，比較后期癌癥確診率。結(jié)果 放射免疫診斷法敏感度為99.12%，特異度為72.72%，陽性預(yù)測值為98.69%，陰性預(yù)測值為80.00%。與金標(biāo)準(zhǔn)相比在敏感度、特異度、陽性預(yù)測值等方面無顯著性差異(P>0.05)，但兩者的陰性預(yù)測值具有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。結(jié)論 本研究建立的原發(fā)性肝癌早期診斷方法特異性強、可信度高且操作方便，在原發(fā)性肝癌早期篩查應(yīng)用中具有較高的可行性及應(yīng)用價值。

原發(fā)性肝癌 放射免疫分析法 早期診斷 甲胎蛋白異質(zhì)體

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1129～1131)

原發(fā)性肝癌病情進(jìn)展快、死亡率高，是最常見的惡性腫瘤之一[1]。但肝癌早期癥狀和體征不明顯，經(jīng)病理學(xué)和影像學(xué)難以確診，臨床確診大多已晚期，治療效果差。研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌的早期診斷、及時治療能顯著提高患者生存率[2-3]，是目前改善治療效果的最佳途徑，因此有效的早期腫瘤篩查和預(yù)警具有十分重要的意義。本研究以特異性強、靈敏度高的放射免疫法[4-5]為基本方法，以診斷價值更高的甲胎蛋白異質(zhì)體[6-9]為檢測指標(biāo)，跟蹤研究患者病程發(fā)展，探討此法在原發(fā)性肝癌早期診斷或篩查中的可行性及應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 資料

收集2013年9月到2015年7月到我院就診的慢性肝病患者239例(失訪患者并未統(tǒng)計在內(nèi))，包括肝硬化，病毒性肝炎、尚無法確診的疑似肝癌病例及其它慢性肝病患者，肝病病史均五年以上，其中男性174例，女性65例，年齡25～65歲。所有肝病患者均經(jīng)3位以上臨床醫(yī)師檢查確診,診斷符合第四屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議修訂的原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[2，10]。排除合并其它腫瘤患者、妊娠期婦女及已確診的肝癌患者。

1.2 儀器及試劑

GC-1200γ放射免疫計數(shù)器(上海五久自動化設(shè)備有限公司)，AFP放射免疫試劑盒(北京北方生物技術(shù)研究所)，人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體ELISA試劑盒(上海瓦蘭生物科技公司)。

1.3 方法

1.3.1 陽性指標(biāo) 甲胎蛋白是目前常用的原發(fā)性肝癌血清標(biāo)志物，包括AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3三種類型，但AFP-L1和AFP-L2在良性肝病和妊娠期婦女體內(nèi)也會升高而出現(xiàn)假陽性，而AFP-L3為肝癌細(xì)胞所特有[12]，AFP-L3作為腫瘤標(biāo)志物具有更高的特異性,[6，12-14]。美國FDA已批準(zhǔn)將AFP-L3/AFP≥10%作為肝癌診斷指標(biāo)[6]，故本研究以AFP-L3/AFP≥10%為陽性指標(biāo)進(jìn)行早期診斷可行性研究。

1.3.2 跟蹤研究方案 清晨采集患者空腹靜脈血液(EDTA抗凝)，-20 ℃保存，經(jīng)冷凍離心分離血清，檢測血清中的AFP以及AFP-L3含量，計算AFP-L3在AFP中的比例。 跟蹤研究兩組患者病程發(fā)展，10個月后結(jié)合病理學(xué)(組織活檢)和影像學(xué)(B超、CT)檢查[2，10]統(tǒng)計原發(fā)性肝癌確診例數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，比較兩組原發(fā)性腫瘤確診率，并將放射免疫法診斷結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)(病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)：肝占位病灶或者肝外轉(zhuǎn)移灶活體組織檢查或手術(shù)切除組織標(biāo)本，經(jīng)病理組織學(xué)和(或)細(xì)胞學(xué)檢查診斷為HCC，此為金標(biāo)準(zhǔn))診斷結(jié)果進(jìn)行對比分析，判斷此法在原發(fā)性肝癌早期篩查中的可信度及價值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

所有患者分別采用放射免疫診斷與金標(biāo)準(zhǔn)診斷，對兩種檢測結(jié)果對比發(fā)現(xiàn)，放射免疫診斷法敏感度為99.12%，特異度為72.72%，陽性預(yù)測值為98.69%，陰性預(yù)測值為80.00%。金標(biāo)準(zhǔn)診斷的敏感度為100.00%，特異度為66.67%，陽性預(yù)測值為99.57%，陰性預(yù)測值為100.00%。兩種方法在敏感度、特異度、陽性預(yù)測值等方面比較無顯著性差異(P>0.05)，但兩者的陰性預(yù)測值具有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

表1 兩種方法診斷原發(fā)性肝癌結(jié)果比較/例

3 討論

肝癌是指發(fā)生于肝臟的癌癥，如果是肝臟內(nèi)細(xì)胞所引發(fā)的癌癥則稱之為“原發(fā)性肝癌”；由機體其他器官的癌癥轉(zhuǎn)移到肝臟而形成的肝臟惡性腫瘤，稱之為“繼發(fā)性肝癌”。各種中胚葉腫瘤浸潤到肝臟通常稱為肉瘤肝臟浸潤，不包括在繼發(fā)性肝癌之中。原發(fā)性肝癌根據(jù)組織學(xué)分類可分為“肝細(xì)胞型”、“膽管細(xì)胞型”和“混合型”。原發(fā)性肝癌中有85.5%屬于肝細(xì)胞癌。早起癥狀和體征不明顯或缺乏特異性，有的起因時表現(xiàn)肝區(qū)脹痛，也有的表現(xiàn)急腹痛?；蛞赞D(zhuǎn)移灶癥狀為最早表現(xiàn)。診斷除根據(jù)臨床表現(xiàn)外，尚需依靠肝功能試驗、特殊的酶學(xué)檢查等，除活組織檢查外，以甲胎蛋白診斷準(zhǔn)確率最高。采用手術(shù)治療和中西醫(yī)結(jié)合治療，肝癌的存活率近年來有所提高。世界各地肝癌發(fā)病率以非洲撒哈拉沙漠以南和亞洲沿海地區(qū)發(fā)病率最高，歐、美則較低。該病惡性度高、病情進(jìn)展快，患者早起一般無不適，一旦出現(xiàn)癥狀就診往往已屬于中晚期，因而治療難度較大切療效較差，一般發(fā)病后的生存時間僅為6個月，人稱“癌中之王”。

在世界任何地區(qū)都同樣發(fā)現(xiàn)，任何原因?qū)е碌穆愿尾《伎赡茉诟伟┌l(fā)生和發(fā)展過程中起著重要的作用。流行病學(xué)和實驗研究均表明病毒性肝炎與原發(fā)性肝癌的發(fā)生有著特定的關(guān)系，目前比較明確的與肝癌有關(guān)系的病毒性肝炎有乙型、丙型和丁型3種。其中以乙型肝炎與肝癌關(guān)系最為密切，近年HBsAg陰性肝癌數(shù)增加與丙型肝炎有關(guān)，而前蘇聯(lián)則以丁型為多[15]。我國肝癌患者中約90%有乙型肝炎病毒(HBV)感染背景。其他危險因素包括酒精性肝硬化、肝腺瘤、長期攝入黃曲霉素、其他類型的慢性活動性肝炎、Wilson病、酪氨酸血癥和糖原累積病。肝癌發(fā)病率高，早期診斷發(fā)現(xiàn)肝癌可以提高患者的5a存活率[16]。

甲胎蛋白(AFP)定量測定為肝癌早期診斷的主要方法。良性的肝部病變發(fā)生時，壞死的肝細(xì)胞再產(chǎn)生AFP，其糖鏈結(jié)構(gòu)與惡性的肝臟病變所產(chǎn)生的AFP具有差異，而甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)則是肝癌細(xì)胞所特有的。本文利用放射免疫法檢測肝病患者血清中甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)比值，進(jìn)而以AFP-L3/AFP≥10%為陽性指標(biāo)，并跟蹤研究其病程發(fā)展，研究表明，放射免疫診斷法敏感度為99.12%，特異度為72.72%，陽性預(yù)測值為98.69%，與原發(fā)性肝癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)相比無顯著性差異，說明以放射免疫法為基礎(chǔ)方法，以AFP-L3/AFP≥10%為陽性指標(biāo)早期診斷原發(fā)性肝癌具有極高的診斷價值，能夠在早期腫瘤篩查和肝癌預(yù)警中將發(fā)揮巨大優(yōu)勢。競爭性放射分析基于在用同位素標(biāo)記的物質(zhì)和與該物質(zhì)有特異結(jié)合能力的結(jié)合體的結(jié)合反應(yīng)中加入同種非標(biāo)記物質(zhì),則發(fā)生競爭結(jié)合作用,進(jìn)而通過這種競爭結(jié)合來測定非標(biāo)記物質(zhì)的含量。當(dāng)特異結(jié)合體為抗體時,該測定方法則叫做放射免疫分析法(RIA) 。放射免疫法將經(jīng)放射性標(biāo)記的抗原和未經(jīng)放射性標(biāo)記的抗原同時結(jié)合特異性抗體，使其發(fā)生可逆的競爭性反應(yīng)，進(jìn)而對抗原與抗體的基本情況進(jìn)行檢測。

放射免疫法具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點，且多在醫(yī)院常規(guī)使用，普及性較強，以此為基礎(chǔ)建立的早期診斷方法易于推廣，具有更高的實用性。

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(編輯：吳小紅)

Early Diagnosis of Radioimmunoassay for Primary Liver Cancer and Its Value

ZHENGWenbo.XinxiangMedicalUniversity,Xinxiang,453003

Objective To investigate the value and feasibility of radioimmunoassay (RIA) in the diagnosis of primary hepatic carcinoma by radioimmunoassay.Methods 239 cases of hepatopathy patient serum alpha fetoprotein in heterogeneous protein (AFP-L3) ratio,to AFP-L3/AFP was more than or equal to 10% for positive indicators,and tracking the course of the development of,compared to later stages of cancer diagnosis rate.Analysis this method in the early identification of primary hepatocellular carcinoma in the price value.Results Diagnostics sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of RIA relatively were 99.12%,72.72%,98.69% and 80.00%.Comparing with the gold standard,it had no significant difference (P>0.05) in the sensitivity,specificity,positive predictive value,but had significant difference in the negative predictive value.Conclusion Early diagnosis of radioimmunoassay for primary hepatocellular carcinoma has strong specificity,high reliability and easy to operate,it has high feasibility and application value in primary liver cancer early screening applications.

Primary liver cancer;Radioimmunoassay;Early diagnosis;Alpha fetoprotein(AFP)

453003 河南新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院(鄭文博)；300162 武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院(毛中鵬)

毛中鵬

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.026

R735.7

A

1001-5930(2017)07-1129-03

2016-09-12

2017-05-24)