徐偉莉

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Bcl-2及Ki-67蛋白在不同類型子宮平滑肌腫瘤中的表達情況

徐偉莉

目的 探討B(tài)cl-2及Ki-67蛋白在不同類型子宮平滑肌腫瘤中的表達情況。方法 將子宮平滑肌腫瘤患者92例，按照良惡性的不同分為良性平滑肌瘤組(49例)、富于細胞型平滑肌瘤(32例)以及典型子宮平滑肌肉瘤(11例)。將標本制成石蠟切片，采用免疫組織化學(xué)SP法檢測標本中Bcl-2蛋白及Ki-67蛋白的表達情況。結(jié)果 患者平均年齡良性平滑肌瘤組最小，子宮平滑肌肉瘤組最高，組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。良性平滑肌瘤組Bcl-2陽性率最高，Ki-67陽性率最低；子宮平滑肌肉瘤組Bcl-2陽性率最低，Ki-67陽性率最高，組間比較均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。Bcl-2在不同復(fù)發(fā)情況、腫瘤數(shù)量及腫瘤大小的患者中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但Ki-67在復(fù)發(fā)、多發(fā)及腫瘤體積較大患者中陽性率較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Bcl-2蛋白與Ki-67蛋白表達存在顯著負相關(guān)(γ=-0.564，P=0.000)。結(jié)論 Bcl-2及Ki-67蛋白在不同類型子宮平滑肌腫瘤中表達情況各異，二者呈負相關(guān)性，可聯(lián)合用于子宮平滑肌腫瘤的輔助鑒別診斷。

良性子宮平滑肌瘤；富于細胞型平滑肌瘤；子宮平滑肌肉瘤；Bcl-2；Ki-67

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1085～1087)

子宮平滑肌腫瘤是1種較為常見的婦科疾病，病理類型多樣，良惡性各不相同[1]。良性腫瘤以子宮平滑肌瘤最為常見，交界性腫瘤以富于細胞型平滑肌瘤最為常見，惡性則以子宮平滑肌肉瘤最為常見[2]。針對不同病理類型的子宮平滑肌腫瘤治療方法也有所不同，因此準確的鑒別診斷對于患者治療方案的制定及預(yù)后具有十分重要的意義[3]。免疫組化方法是病理科最為常用的技術(shù)手段，參考他人研究，本文選取了Bcl-2及Ki-67蛋白進行免疫組化檢測[4]，并進行了對比分析，以期對臨床輔助診斷提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2006年3月至2016年12月于我科檢查的不同種類子宮平滑肌瘤患者92例?；颊呤占瘶藴嗜缦拢孩偎谢颊呔?jīng)明確的病理學(xué)及影像學(xué)診斷確診為子宮平滑肌瘤；②收集組織標本前未經(jīng)過化療、放療等其他治療方法；③患者臨床資料完整。92例患者按照良惡性的不同分為良性平滑肌瘤組(49例)、富于細胞型平滑肌瘤組(32例)以及典型子宮平滑肌肉瘤組(11例)。

1.2 檢測方法

所有標本均使用石蠟包埋制作石蠟切片，分別進行HE染色及免疫組織化學(xué)染色。免疫組化檢測方法選擇SP法，選擇鼠抗人Bcl-2及鼠抗人Ki-67單克隆抗體，免疫組化SP通用型試劑盒，DAB酶底物顯色液。所有試劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。具體操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.3 結(jié)果判定

由2位高年資主治醫(yī)師進行雙盲閱片，意見不統(tǒng)一時參考第3位高年資主治醫(yī)師閱片結(jié)果。使用高倍顯微鏡進行觀察，隨機選取5個視野，計數(shù)陽性染色細胞百分數(shù)，Bcl-2為分布在細胞質(zhì)的棕色顆粒，Ki-67為分布在細胞核的棕色顆粒。按照陽性細胞所占細胞數(shù)量的百分比，以0～4分計分：染色細胞<5%計0分；染色細胞≥5%～25%計1分；染色細胞>25%～50%計2分；染色細胞>50%計3分；染色細胞>75%計4分。按照染色強度的不同，以0～3分計分：不顯色計0分；染色為淺黃色計1分；染色為棕黃色計2分；染色為深棕色計3分。最終結(jié)果是將細胞數(shù)量與細胞染色程度得分相加，總分0～1分為陰性(-)；總分2～3分為弱陽性(+)；總分4～5分為中度陽性(++)；總分6～7分為重度陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS version 18.0對本研究數(shù)據(jù)進行運算處理，本文所得數(shù)據(jù)均為計數(shù)數(shù)據(jù)，以百分比形式表示，采用卡方檢驗進行比較，等級資料采用秩和檢驗進行比較。2種蛋白在組織中表達的相關(guān)性比較采用Spearman相關(guān)性分析。假設(shè)檢驗水準為α=0.05，即P<0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組患者一般資料比較

良性平滑肌瘤組患者年齡24～71歲，平均年齡(41.1±5.4)歲；富于細胞型平滑肌瘤組患者年齡分布25～76歲，平均年齡(45.2±5.1)歲；子宮平滑肌肉瘤組患者年齡24～77歲，平均年齡(49.8±5.7)歲。良性平滑肌瘤組患者平均年齡最小，子宮平滑肌肉瘤組最高，組間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。

2.2 3組患者Bcl-2及Ki-67表達情況分析

良性平滑肌瘤組Bcl-2陽性率為83.67%、富于細胞型平滑肌瘤組為62.50%、子宮平滑肌肉瘤組為54.54%，組間差異比較，有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=6.495，P=0.039)。良性平滑肌瘤組Ki-67陽性率為40.82%，富于細胞型平滑肌瘤組為90.63%，子宮平滑肌肉瘤組為100%，組間比較均具有統(tǒng)計學(xué)差異(Z=27.835，P=0.000)。良性平滑肌瘤組Bcl-2陽性率最高，Ki-67陽性率最低；子宮平滑肌肉瘤組Bcl-2陽性率最低，Ki-67陽性率最高。見表1。

表1 3組患者Bcl-2及Ki-67表達情況分析(例，%)

2.3 病理特征與Bcl-2及Ki-67蛋白表達情況分析

對不同復(fù)發(fā)情況、腫瘤數(shù)量以及腫瘤大小的患者Bcl-2及Ki-67蛋白表達情況進行分析，結(jié)果顯示，Bcl-2在不同復(fù)發(fā)情況、腫瘤數(shù)量及腫瘤大小的患者中差異不顯著(P>0.05)，但Ki-67在復(fù)發(fā)、多發(fā)及腫瘤體積較大患者中陽性率明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.4 Bcl-2與Ki-67蛋白表達相關(guān)性分析

對92例子宮平滑肌腫瘤患者Bcl-2與Ki-67蛋白表達進行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，Bcl-2蛋白與Ki-67蛋白表達存在顯著負相關(guān)(γ=-0.564，P=0.000)。

3 討論

子宮平滑肌瘤為良性腫瘤，數(shù)量較多，預(yù)后較好；富于細胞型平滑肌瘤為子宮交界性腫瘤，生長迅速，較易惡變，因此應(yīng)當在條件允許時及早切除并加強隨訪；子宮平滑肌肉瘤發(fā)病率較低，但其惡性程度較高，侵襲性明顯，預(yù)后較差[5]。不同類型子宮平滑肌腫瘤單從臨床特征或影像學(xué)檢查方面鑒別較為困難，因此有必要依賴于病理學(xué)檢查[6]。隨著腫瘤發(fā)生機制的研究，在不同類型子宮平滑肌腫瘤鑒別診斷中使用免疫組化方法愈加常見[7]。

表2 病理特征與Bcl-2及Ki-67蛋白表達情況分析(例，%)

Bcl-2蛋白存在于線粒體內(nèi)，是Bcl-2原癌基因的編碼產(chǎn)物，與t(14；18)染色體易位有關(guān)，具有重要的抗凋亡作用[8]。研究報道顯示，Bcl-2基因在體內(nèi)或體外表達增加可降低細胞對生長因子的需求，抑制多種原因所致的細胞凋亡過程，最終延長細胞壽命[9]。本研究結(jié)果顯示，不同類型子宮平滑肌腫瘤中Bcl-2陽性表達率存在顯著差別，在良性子宮平滑肌瘤中Bcl-2陽性率最高，而在子宮平滑肌肉瘤中陽性率最低，這與文獻報道相符[10]。此結(jié)果提示，Bcl-2在良性組織中存在過度表達，而當細胞逐漸發(fā)生癌變，Bcl-2對細胞凋亡的抑制將逐漸降低，Bcl-2陽性率降低。

Ki-67蛋白在細胞周期不同階段均可表達，與細胞增殖關(guān)系密切的抗核抗原，也是目前最為常用的核增殖標志基因，其半衰期較短，一旦脫離細胞周期后即可迅速降解，因此成為檢測腫瘤細胞增殖活性最可靠的指標之一[11]。本研究結(jié)果顯示，不同類型子宮平滑肌腫瘤中Ki-67陽性表達率存在顯著差別，在良性子宮平滑肌瘤中Ki-67陽性率最低，而在子宮平滑肌肉瘤中陽性率最高。該結(jié)果證實，惡性程度越高，Ki-67表達越多。

此外，本研究還對不同復(fù)發(fā)情況、腫瘤數(shù)量以及腫瘤大小患者中2種蛋白的表達進行了考察。研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)、多發(fā)及腫瘤體積較大的患者，Ki-67陽性表達率明顯較高，與我們的預(yù)期相符，也可提示復(fù)發(fā)、多發(fā)或腫瘤體積較大的患者可能惡性程度更高；而Bcl-2表達與不同病理特征關(guān)系較弱，我們認為該結(jié)果可能提示Bcl-2鑒別診斷敏感性相對弱于Ki-67，但該結(jié)果尚需后續(xù)研究進行驗證。

綜上所述，Bcl-2及Ki-67蛋白在不同類型子宮平滑肌腫瘤中表達情況各異，二者呈負相關(guān)性，可聯(lián)合用于子宮平滑肌腫瘤的輔助鑒別診斷。

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(編輯：甘 艷)

Expression of Bcl-2 and Ki-67 Protein in Different Smooth Muscle Tumors

XUWeili.TheSecondPeople’sHospitalofXinxiang,Xinxiang,453002

Objective To investigate the expression of Bcl-2 and Ki-67 protein in different smooth muscle tumors.Methods 92 cases of smooth muscle tumors were divided to the benign leiomyoma(n=49),cell type leiomyoma (n=32) and typical leiomyosarcoma(n=11) according into the benign and malignancy.The specimen were made into paraffin sections,the expression of Bcl-2 and Ki-67 protein were detected by immunohistochemistry SP methods.Results The age of benign leiomyoma were lowest,while the uterine leiomyosarcoma was highest,P<0.05.The Bcl-2 positive rate in benign leiomyoma was highest,the Ki-67 positive rate was lowest.The Bcl-2 positive rate in uterine leiomyosarcoma was lowest,the Ki-67 positive rate was highest,P<0.05.The Bcl-2 in different quantity relapse,tumor and tumor size had no significant difference(P<0.05).While Ki-67 in recurrence,multiple and bigger tumor volume was higher,P<0.05.The Bcl-2 and Ki-67 protein expression had negative correlation(γ=-0.564，P=0.000).Conclusion Bcl-2 and Ki-67 protein in different smooth muscle tumors have different expression,and they have negative relation,could be used as auxiliary differential diagnosis for leiomyoma of uterus.

Benign leiomyoma;Cell type leiomyoma;Leiomyosarcoma of uterus;Bcl-2；Ki-67

453002 河南省新鄉(xiāng)市第二人民醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.013

R737.33

A

1001-5930(2017)07-1085-03

2017-01-17

2017-04-25)