鄔 琳 郭金珠

?

EGFR和自噬標記蛋白Beclin1在宮頸癌組織中的表達及意義

鄔 琳 郭金珠

目的 分析表皮生長因子受體1(EGFR)和自噬標記蛋白Beclin1在宮頸癌組織中的意義。方法 子宮頸癌患者癌組織標本50例，行全子宮切除術(shù)的正常組織標本20例，宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)病變組織標本19例，比較3組標本中EGFR和Beclin1的表達陽性情況、宮頸癌臨床資料與EGFR和Beclin1表達的關(guān)系。結(jié)果 EGFR表達陽性率以宮頸癌組最高，其次為CIN組，正常對照組最低(P<0.05)，Beclin1的表達陽性率以宮頸癌組最低，其次為CIN組，正常對照組最高(PP<0.05)，Beclin1表達陽性率與是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 EGFR和Beclin1表達與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且Beclin1表達與是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

宮頸癌；EGFR；自噬標記蛋白Beclin1

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1079～1081)

子宮頸癌是威脅我國乃至全球女性健康的重要問題，是最常見的女性惡性腫瘤之一，其在我國的發(fā)病率約占女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的1/2，發(fā)病人群呈年輕化趨勢[1]。宮頸癌臨床治療方案的選擇主要依據(jù)其臨床分期，早期患者(Ⅰa～Ⅱa)以手術(shù)治療為主，Ⅱb級以上以放化療為主[2]。宮頸癌患者的5年生存率與早期診斷和治療密切相關(guān)，早期宮頸癌患者經(jīng)手術(shù)治療后，5年生存率可達90%[3]。因此探究宮頸癌發(fā)生和發(fā)展過程中的分子生物學特征，發(fā)現(xiàn)新型腫瘤標志物，以期為宮頸癌的早期診斷、預防和指導治療提供參考成為目前全球相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點[4]。EGFR即表皮生長因子受體1，在多種腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[5]。自噬即細胞降解被損害的蛋白質(zhì)和細胞的過程，自噬標記蛋白Beclin1在機體自噬泡的形成過程中發(fā)揮中要作用[6]。因此本研究擬分析EGFR和自噬標記蛋白Beclin1在宮頸癌組織中的表達以及與宮頸癌患者臨床資料的關(guān)系，以期為進一步闡明兩者與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展的關(guān)系提供參考。

1 材料與方法

1.1 一般資料

2010年1月至2016年10月陜西省西電集團醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的子宮頸癌患者50例，納入標準：經(jīng)病理確診為子宮頸鱗癌，行宮頸癌根治術(shù)并收集了癌組織標本，病歷資料完整，術(shù)前均未接受過放、化療。50例患者年齡28～75歲，平均(45.8±65.71)歲。另收集因子宮肌瘤或腺肌瘤行全子宮切除術(shù)的20例患者的正常組織標本，年齡26～73歲，平均(46.5±15.52)歲，收集宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)患者19例的病變組織標本(CIN組)，年齡25～58歲，平均(43.5±14.66)歲，其中CIN Ⅰ期4例，Ⅱ期10例，Ⅲ期6例。3組患者的一般資料比較，P>0.05。

1.2 方法

免疫組化方法檢測標本中EGFR和蛋白Beclin1的表達：每個病例的標本兩張切片，所有標本經(jīng)常規(guī)固定、石包埋和切片、烤箱過夜、脫蠟、脫水、水化、室溫孵化、高壓熱修復，非免疫性山羊血清封閉后加入一抗(抗人EGFR抗體或自噬標記蛋白Beclin1抗體)，一抗的陰性對照采用磷酸鹽緩沖溶液。每張切片結(jié)果判讀由兩名病理醫(yī)師盲讀，根據(jù)染色范圍和強度評分綜合判定，EGFR和自噬標記蛋白Beclin1均在胞質(zhì)中表達，陽性表達呈棕黃色染色，染色強度：無染色、淡黃色、黃色、棕黃色分別計0～3分；染色陽性細胞數(shù)：無陽性細胞數(shù)0分，<30%為1分，≥30%為2分。2項評分相乘，陰性：0～1分，陽性：2～6分。

1.3 觀察指標

①EGFR和Beclin1在3組中表達陽性情況；②分析宮頸癌患者臨床資料與EGFR和自噬標記蛋白Beclin1表達陽性率的關(guān)系。

1.4統(tǒng)計學方法

應用SPSS 17.0軟件，計數(shù)資料以百分率表示，采用卡方檢驗，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 EGFR和Beclin1表達

3組EGFR和Beclin1表達陽性率比較，差異顯著(P<0.05)，其中EGFR表達陽性率以宮頸癌組最高，Beclin1表達陽性率以宮頸癌組最低，見表1。

表1 3組中EGFR和Beclin1的表達情況(例，%)

注：與正常對照組比較，①為P<0.05；與CIN組比較，②為P<0.05。

2.2 EGFR表達與宮頸癌臨床病理資料的關(guān)系

EGFR表達陽性率與宮頸癌臨床病理參數(shù)均無顯著相關(guān)性(P>0.05)，見表2。

表2 EGFR表達與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例，%)

2.3 Beclin1與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

Beclin1表達陽性率僅與是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，見表3。

表3 Beclin1表達與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(例，%)

3 討論

子宮頸癌從宮頸的癌前病變到最終發(fā)展為宮頸癌需要幾年甚至幾十年，因此早期診斷對宮頸癌的預防和控制至關(guān)重要[7]。高危型人乳頭瘤病毒(HIV)被認為是宮頸癌的主要危險因素，另外還包括沙眼衣原體、單純皰疹病毒等，但是僅HIV等病毒感染并不是促進宮頸癌發(fā)生發(fā)展的唯一因素[8]。目前臨床對于宮頸癌的發(fā)生機制仍不十分清楚，但近年來，人們從c-Met、PGRB、SALL4等原癌基因，PTEN、LKB1、LRIG1等抑癌抗癌，核糖體蛋白L6、K-ras、Prdx4、C-myc/TNFAIP8等凋亡相關(guān)基因，絲裂原激活細胞外信號調(diào)節(jié)激酶細胞、Hedgehog(Hh)等信號傳導系統(tǒng)等方面，對腫瘤的發(fā)生和發(fā)展進行了分子生物水平的重新認識，認為腫瘤的形成是一個長期的、多階段、多基因、多步驟累積作用的結(jié)果[9-10]，可能與miRNA 在宮頸癌不同階段的的調(diào)節(jié)基因表達作用異常，染色體變異，低氧、低pH和高組織間隙液壓的腫瘤微環(huán)境等關(guān)系密切。

自噬是1種高度保守的依賴于溶酶體的降解途徑，通過對損壞的、錯誤折疊的蛋白質(zhì)、衰老或損傷的細胞器進行講解，以完成細胞本身的代謝和更新過程，是真核細胞的特有生命現(xiàn)象，自噬活性異常與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)[11]。Beclin1蛋白是細胞自噬和凋亡途徑的重要蛋白質(zhì)，通過與抗凋亡蛋白或促凋亡蛋白結(jié)合形成復合物，調(diào)控細胞的自噬活性，眾多臨床研究表明，Beclin1蛋白的低表達與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，如肝癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌等[12-13]。EGFR是原癌基因的表達產(chǎn)物，EGFR與表皮生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子等配體結(jié)合后，引起細胞內(nèi)絡氨酸殘基的磷酸化，通過信號傳導影響細胞的周期和凋亡，參與并控制細胞的存活、遷移、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管的生成。EGFR高表達現(xiàn)象在眾多實體腫瘤中已較常見[14]。本研究同樣顯示，EGFR的表達陽性率以宮頸癌組最高，其次為CIN組，正常對照組最低，Beclin1的表達陽性率以宮頸癌組最低，其次為CIN組，正常對照組最高，與相關(guān)研究[15-16]基本一致，提示EGFR和Beclin1與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。

EGFR、Beclin1與宮頸癌患者臨床資料的相關(guān)性研究目前臨床中較少見，且結(jié)果不盡相同[15-17]。因此本研究的主要目的為：為臨床評價EGFR和Beclin1在宮頸癌中的價值提供更加豐富的臨床資料，結(jié)果顯示，僅Beclin1與宮頸癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，提示Beclin1的表達降低可能促進了宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

綜上所述，EGFR、Beclin1與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且Beclin1與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

[1] Obel J,Souares Y,Hoy D,et al.A systematic review of cervical cancer incidence and mortality in the Pacific Region〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(21):9433-9437.

[2] Crafton SM,Salani R.Beyond Chemotherapy:An Overview and Review of Targeted Therapy in Cervical Cancer〔J〕.Clin Ther,2016,38(3):449-458.

[3] 李秀娟,蔡建興,黃革玲.宮頸癌早期診斷技術(shù)的研究進展〔J〕.武警醫(yī)學,2014,23(2):632-634.

[4] 宋妮娜,瞿全新.宮頸上皮內(nèi)瘤變分子生物學指標的研究進展〔J〕.國際婦產(chǎn)科學雜志,2016,43(5):524-527.

[5] 孫棟勛,蔡志毅.EGFR/PI3K/Akt細胞信號傳導通路與腫瘤〔J〕.檢驗醫(yī)學,2014,29(7):768-773.

[6] 張 晶,舒麗莎,張林西.自噬通路中mTOR和Beclin1與腫瘤關(guān)系的研究進展〔J〕.河北醫(yī)藥,2016,38(18):2837-2840.

[7] Teichman P.Cervical cancer screening〔J〕.J Midwifery Womens Health,2015,60(2):229-230.

[8] 程 靜,潘光鑫,周素,等.宮頸癌發(fā)病機制的探討〔J〕.中國婦幼保健,2014,29(28):4545-4547.

[9] 張懷念,張詠莉.宮頸癌分子遺傳機制及其相關(guān)基因功能研究〔J〕.安徽醫(yī)藥,2015,19(2):219-221.

[10] 李樂賽,李梅花,張 弦,等.HPV16 E6對宮頸癌 E-cadherin 表達水平和基因甲基化的影響〔J〕.湖南師范大學學報(醫(yī)學版),2016,13(4):1-4.

[11] Jin SM,Jang HW,Sohn SY,et al.Role of autophagy in the resistance to tumour necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand-induced apoptosis in papillary and anaplastic thyroid cancer cells〔J〕.Endocrine,2014,45(2):256-262.

[12] 楊 威,楊紅杰,莫瑞祥,等.Beclin1在人肝癌組織中的表達及TGF-β對肝癌細胞增殖的影響〔J〕.國際檢驗醫(yī)學雜志,2015,36(1):108-109.

[13] Cai M,Hu Z,Liu J,et al.Beclin 1 expression in ovarian tissues and its effects on ovarian cancer prognosis〔J〕.Int J Mol Sci,2014,15(4):5292-5303.

[14] Wang Q,Qi Y,Zhang D,et al.Electrolyte disorders assessment in solid tumor patients treated with anti-EGFR monoclonal antibodies:a pooled analysis of 25 randomized clinical trials〔J〕.Tumour Biol,2015,36(5):3471-3482.

[15] 黃必飛,王超群,趙永明,等.宮頸癌中EGFR蛋白表達及其臨床病理意義〔J〕.浙江醫(yī)學,2016,38(2):99-101.

[16] Cheng HY,Zhang YN,Wu QL,et al.Expression of beclin 1,an autophagy-related protein,in human cervical carcinoma and its clinical significance〔J〕.Eur J Gynaecol Oncol.,2012,33(1):15-20.

[17] Wang YJ,Jing Z,Huo JL,et al.Correlation between Beclin1 Protein Expression and Cervical Cancer Risk:A Meta-Analysis〔J〕.J Evid Based Med,2014,14(7):798-805.

(編輯：吳小紅)

Expression and Significance of EGFR and Autophagy Marker Protein Beclin1in Human Cervical Cancer

WULin，GUOJinzhu.Xi’anXdGroupHospital,Xi’an,710077

Objective To investigate the expression and significance of EGFR and autophagy marker protein Beclin1 in human cervical cancer.Methods 50 cases of patients with cervical cancer,collected carcinoma tissue samples,and collected specimens of normal tissues from 20 patients underwent total hysterectomy (control group),and the tissues of cervical intraepithelial neoplasia(CIN) from 19 patients were collected.Compared the expression of EGFR and autophagy marker protein Beclin1in among the 3 group.Results Positive rates of EGFR was the highest in cervical cancer,second highest in CIN group and and the lowest in the control group (P<0.05);the positive rate of Beclin1 was the highest in the control group,second highest in CIN group and and the lowest in cervical cancer (P<0.05),positive rate of Beclin1 showed significant correlation with lymph node metastasis(P<0.05).Conclusion Expression of EGFR and Beclin1 are associated with the development of cervical cancer,and Beclin1 positive expression is closely related to lymph node metastasis.

Cervical cancer;EGFR；Autophagy marker protein beclin1

710077 陜西省西電集團醫(yī)院

郭金珠

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.07.011

R737.33

A

1001-5930(2017)07-1079-03

2017-01-17

2017-03-17)