龔卻卓瑪 （青海省共和縣畜牧獸醫(yī)站 813000）

共和縣布魯氏菌病的血清學(xué)調(diào)查

龔卻卓瑪 （青海省共和縣畜牧獸醫(yī)站 813000）

應(yīng)用虎紅平板凝集試驗(RBT)和試管凝集試驗(SAT)，2008～2016年間對共和縣4個半農(nóng)半牧鄉(xiāng)鎮(zhèn)的9000份奶牛血清，進行布魯氏菌病檢測，檢出陽性血清15份，陽性率0.116%，結(jié)果表明共和縣奶牛布魯氏病在近幾年得到了有效控制。

布魯氏菌病(以下簡稱布病)，是由布氏桿菌感染引起的慢性接觸性人畜共患的傳染病，其特征是妊娠母畜發(fā)生流產(chǎn)，公畜呈現(xiàn)睪丸炎。奶牛感染發(fā)病后臨床特征為生殖器官的胎膜發(fā)炎，發(fā)生流產(chǎn)，引發(fā)子宮內(nèi)膜炎、胎衣不下、卵巢囊腫等病而久配不孕。傳播途徑以消化道為主，其次為自然交配，皮膚、眼結(jié)膜、呼吸道感染都可引起本病。該病的發(fā)生不但對畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟損失，還嚴重威脅著畜產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生安全和人類健康。因此筆者認為奶牛布魯氏菌病檢測工作是當前動物防疫工作中的一項關(guān)鍵性任務(wù)，也是動物疫病監(jiān)測中最為重要的一項工作。為全面掌握共和縣奶牛布魯氏菌病近幾年的疫情動態(tài)和流行規(guī)律，及時發(fā)現(xiàn)和處理疫情，預(yù)測和分析發(fā)病特點及風(fēng)險因素，制定科學(xué)防控措施。本人對共和縣2008～2016年奶牛布魯氏菌病血清學(xué)檢測情況進行了調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 診斷液 每年所用虎紅平板抗原；標準陰性、陽性血清；試管凝集抗原均由青海省動物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.1.2 稀釋液 0.5%石碳酸生理鹽水。

1.1.3 被檢血清 來源于全縣養(yǎng)殖奶牛的4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，共9000份血清。

1.2 方法

每年首先用虎紅平板凝集試驗(RBT)對被檢奶牛血清進行初篩，檢出的陽性和可疑血清再用試管凝集試驗(SAT)進行復(fù)檢，以試管凝集試驗做為檢測的最終判定結(jié)果。操作及判定標準按照(GB/18646-2002)進行。

1.2.1 虎紅平板凝集試驗步驟 在潔凈的玻璃板上劃分成數(shù)個4cm2的方格，編號，用加樣器滴加相應(yīng)的血清0.03ml，在被檢血清旁滴加抗原0.03ml，用牙簽攪動血清和使之混合。每次設(shè)立陰、陽性血清對照。

1.2.2 試管凝集試驗步驟 準備4支玻璃試管，將每份被檢血清分別按1∶50、1∶100、1∶200、1∶400四個稀釋度稀釋，即第1管加1.2ml稀釋液，第2～4管各加入0.5ml稀釋液，然后用吸管吸取0.05ML被檢血清加入第1管，反復(fù)吹打3次，吸取混合液0.25ml棄之，再吸取0.5ml混合液沿管壁加入到第2管中，用該吸管如前述方法混勻，再吸取第2管混合液0.5ml至第3管，如此倍比稀釋至第4管，從第4管棄去混合液0.5ml。稀釋完畢，將0.5ml20倍稀釋的抗原加入已稀釋好的各血清管中并振搖均勻。作陰性、陽性和抗原對照，并配置比濁管，將全部試管、對照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱中培養(yǎng)20～22h，取出后置室溫2h，然后以比濁管為標準判定結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

1.3.1 虎紅平板凝集試驗 在陰、陽性血清對照成立的條件下，被檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性。

1.3.2 試管凝集反應(yīng) 在陰陽性對照成立的前提下，被檢血清在1∶100稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時，判為陽性；1∶50稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時，可判為可疑，可疑反應(yīng)的牛經(jīng)過3～4周后重新采血檢驗，如果仍可疑，可判定為陽性。

2 檢測結(jié)果

2008～2014年間共檢測奶牛血清8004份，檢出陽性奶牛15頭，陽性率為0.19%，每年的檢測情況祥見附表。

附表 2008～2014年奶牛布魯氏菌病檢測結(jié)果 (頭、%)

附圖 2008～2016年布魯氏菌病血清學(xué)檢測結(jié)果

3 討論

（1）通過對共和縣4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)9000份奶牛血清連續(xù)9年進行布魯氏菌病檢測，共檢出陽性血清15份，平均陽性率為0.16%，說明共和縣奶牛布病感染率并不高，在有效控制范圍內(nèi)，而且從2010年以后每年呈下降趨勢。2009年陽性率高達1.4%。這與2008年由于實施本縣扶貧開發(fā)項目，從外縣引進的奶牛數(shù)量大，檢疫工作把關(guān)不嚴，使本縣奶牛的布魯氏菌病陽性率達到了歷年的高峰期，見檢測結(jié)果對比圖。（2）本縣采取以監(jiān)測、檢疫、隔離、陽性畜的及時撲殺、消毒和無害化處理等綜合措施，特別是加大了陽性畜及時撲殺和調(diào)運奶牛的檢疫監(jiān)督力度，切斷傳染源和傳播途徑，使奶牛陽性率從2009年的1.4% 下降到2010年和2011年的0.4%和0.08%，且2012～2016年連續(xù)五年未檢出陽性血清，這進一步說明布病防治措施的科學(xué)性和有效性。（3）為了鞏固布病防治效果，防治疫情回升，還要繼續(xù)加強監(jiān)測工作，隨時掌握疫情動態(tài)，制定合理的綜合防治規(guī)劃。加強檢疫監(jiān)督，嚴把檢疫關(guān)，引進種畜和調(diào)運畜群時，嚴格按規(guī)范要求檢疫。同時要加強布病防治知識的宣傳力度，提高養(yǎng)殖戶對布病危害的認識，增強防治意識。（4）布魯氏菌病的防制是一項長期而艱巨的工作，在工作中要堅持“預(yù)防為主”的方針，采取以監(jiān)測、檢疫、隔離、陽性畜及時撲殺等綜合防治措施，控制傳染源，切斷傳播途徑。做到加強聯(lián)防、群防群治，同時加強畜間檢疫，按省上下達的監(jiān)測任務(wù)，合理采樣，規(guī)范檢測，注意疫情動態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)并撲殺病畜，直至成為無病畜群。（5）加強牲畜飼養(yǎng)和衛(wèi)生管理，嚴格撲殺陽性畜及污染物的無害化處理。堅持自繁自養(yǎng)，逐步選育更新種牛，這樣才能加快共和縣奶牛布魯氏菌病凈化的進程，使布魯氏菌病得到長期穩(wěn)定的控制。

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1007-1733(2017)06-0063-02

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