孫建寧，董世芬

（北京中醫(yī)藥大學中藥學院北京100102）

中藥研發(fā)和評價思路與方法探討＊

孫建寧，董世芬

（北京中醫(yī)藥大學中藥學院北京100102）

中藥復方研發(fā)既有中醫(yī)理論指導，又有長期臨床應(yīng)用經(jīng)驗為依據(jù)，顯示出獨特的價值。同時，中藥復方中與臨床療效相關(guān)的物質(zhì)基礎(chǔ)復雜多樣、作用環(huán)節(jié)繁多等是中藥的特點?，F(xiàn)代中藥新藥發(fā)現(xiàn)需要基于中醫(yī)理論和臨床特色，注重整體作用特點和現(xiàn)代生物醫(yī)學技術(shù)密切結(jié)合。中藥新藥研發(fā)和評價的關(guān)鍵問題是，用符合中醫(yī)藥臨床特點的實驗方法學體系來揭示方劑功能主治和證的現(xiàn)代科學內(nèi)涵。在研發(fā)過程中，從立項依據(jù)到藥效毒理研究均應(yīng)考慮中藥的特點。而且，藥效研究應(yīng)注意加強證候特點的體現(xiàn)，其中證候模型和病癥結(jié)合模型的研究和應(yīng)用、方證相應(yīng)的研究方法、與中藥功效相對應(yīng)地生物學指標的確認等均至關(guān)重要。我們要抓住中醫(yī)藥振興發(fā)展的歷史機遇，加快中藥優(yōu)勢領(lǐng)域藥物研發(fā)，以大力促進中醫(yī)藥現(xiàn)代化創(chuàng)新進程。

中藥復方研發(fā)藥效研究證候模型方證相應(yīng)

2016年，國務(wù)院在《中國的中醫(yī)藥》白皮書中提出：“中醫(yī)藥在歷史發(fā)展進程中，兼容并蓄、創(chuàng)新開放，形成了獨特的生命觀、健康觀、疾病觀、防治觀，實現(xiàn)了自然科學與人文科學的融合和統(tǒng)一，蘊含了中華民族深邃的哲學思想。隨著人們健康觀念變化和醫(yī)學模式轉(zhuǎn)變，中醫(yī)藥越來越顯示出獨特價值”[1]。同年，張伯禮院士在中國中醫(yī)科學院2016科技創(chuàng)新大會上的工作報告中提出：“堅持深化改革，完善體制機制；堅持協(xié)同創(chuàng)新，促進內(nèi)涵發(fā)展；堅持繼承創(chuàng)新，發(fā)揮特色優(yōu)勢；堅持需求導向，解決關(guān)鍵問題”。近年來，中醫(yī)藥在國家政策的支持下，在廣大中醫(yī)藥科研人員的努力下欣欣向榮。隨著藥品研究、研發(fā)和審評不斷推進和深化，中藥評審遇到諸多困難，解決這些難題的關(guān)鍵在于能否從中藥自身的研究方法和思路進行突破，以解決關(guān)鍵問題。

1 中藥研發(fā)和評價技術(shù)平臺

國家“十二五”規(guī)劃綱要明確提出：中藥研發(fā)需要基于中醫(yī)藥理論，以中醫(yī)臨床為導向，探索符合中醫(yī)藥特點的研究方法，構(gòu)建現(xiàn)代新藥發(fā)現(xiàn)和評價的技術(shù)體系?；谥嗅t(yī)理論和臨床特點的現(xiàn)代中藥新藥發(fā)現(xiàn)模式需要基于中藥整體作用特點和現(xiàn)代生物醫(yī)學理論和技術(shù)的中藥篩選方法進行研究。由此可知，開展適合中藥多成分和復雜作用特點的中藥評價技術(shù)研究是目前的重要課題[2]。

2 中藥開發(fā)研究的特點和現(xiàn)狀

中藥開發(fā)研究具有中醫(yī)學理論指導及長期臨床應(yīng)用經(jīng)驗，辨證論治是中醫(yī)藥臨床應(yīng)用優(yōu)勢與突出特色。但在中藥開發(fā)研究面臨的實際問題較多，比如：①以臨床導向為核心的立項依據(jù)不夠充分；②中藥功效、療效特點體現(xiàn)不足，難以判斷是否能支持臨床研究；③基礎(chǔ)研究薄弱，多成分作用靶點和機理研究尚不充分。

3 藥物研發(fā)過程中藥效毒理研究的意義

中藥效毒理研究是中藥新藥研制與開發(fā)重要環(huán)節(jié)。首先，現(xiàn)代科學最基本的方法是動物實驗方法，可獲得大量在人體無法獲得的信息，確保中藥的有效性、安全性。并且，中藥效毒理論研究可以為立項論證提供依據(jù)，主要措施包括：①經(jīng)驗方立項依據(jù)首先要重視的是該方的臨床應(yīng)用經(jīng)驗總結(jié)、療效特點及安全信息、現(xiàn)擬定處方和工藝的合理性；②開展全方和組方中飲片的文獻研究綜述，以提示臨床定位的合理性和有效性；③研發(fā)團隊早期的實驗研究資料也作為立項依據(jù)的部分；④各方面材料的綜合分析評價形成完整的立項依據(jù)，來支持研發(fā)的必要性、創(chuàng)新性、合理性。

4 臨床前藥效學研究的關(guān)鍵問題

目前，中藥研究難度較大的是功效研究，因此需要豐富和發(fā)展符合中醫(yī)藥臨床特點的實驗方法學體系來揭示方劑功能主治和證的現(xiàn)代科學內(nèi)涵——方證相應(yīng)。其中，包括了整體實驗中的動物模型、生物學指標和細胞實驗。

4.1 加強證候模型的研究和應(yīng)用

目前，在一些動物證候模型中很難找到與臨床診斷類似的指標。因此，尋找證候產(chǎn)生的主要生物標志物成為評價證候模型的關(guān)鍵。在證候理論研究的基礎(chǔ)上，引入先進的研究理念和技術(shù)，探究疾病發(fā)生發(fā)展的生物學本質(zhì)，尋找證候產(chǎn)生的主要生物標志物，解決作用于復雜生命體的具有復雜化學體系的方、藥的干預實質(zhì)，發(fā)揮方、藥的臨床作用。據(jù)統(tǒng)計，現(xiàn)有的證侯模型有60多類（600多種），涉及130多種疾病。然而，證候模型的研究還存在以下3方面問題：①施加的中醫(yī)造模因素與臨床實踐相去甚遠；疾病組與施加中醫(yī)因素組沒有差別或差別甚微；②病證模型沒有進行客觀評價，只憑主觀判斷；或有評價，但評價標準混亂，得不到公認；③把疾病因素與證侯表現(xiàn)分離，沒有有機結(jié)合。自發(fā)性高血壓模型以前只用于高血壓病的研究，現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)自發(fā)性高血壓模型幼鼠的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育狀態(tài)和行為表現(xiàn)與兒童注意力缺陷、多動癥類似，其21周齡以后與更年期綜合征的癥候?qū)W特點非常相似。

4.1.1Ⅱ型膠原注射結(jié)合寒濕/濕熱刺激致類風濕性關(guān)節(jié)炎大鼠病證結(jié)合模型

寒濕刺激法復制寒濕型RA大鼠模型是將注射CⅡ大鼠置于動物實驗箱中，設(shè)定溫度5℃，濕度95%，模擬寒濕病因每天刺激8 h，連續(xù)6周。濕熱刺激法復制濕熱型RA大鼠模型：將注射CⅡ大鼠置于動物實驗箱中，設(shè)定溫度35℃，濕度95%，模擬濕熱病因。每天刺激8 h，連續(xù)6周。目前，寒濕病的觀察指標包括：腫脹度踝關(guān)節(jié)組織病理學、IgG、C反應(yīng)蛋白、炎性細胞因子等；證候觀察指標包括：一般狀態(tài)（活動度、皮毛、舌色、口唇顏色、心率等）、體溫、飲水量、攝食量、體重、cAMP/cGMP、血流變、神經(jīng)遞質(zhì)等。研究發(fā)現(xiàn)，造模前后，大鼠體內(nèi)的DA、IFN-γ、PDGF-AA、CINC-2α、IL-1、RAGE等指標具有明顯差異。

溫熱性藥物在寒濕型類風濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型上則能有更好的體現(xiàn)。生附子粉對風寒刺激小鼠的LD50高于正常小鼠，而鎮(zhèn)痛作用的ED50則低于正常小鼠，說明寒濕模型對附子的有效劑量更敏感。黑順片對類風濕性關(guān)節(jié)炎結(jié)合風寒刺激大鼠心臟毒性的TD50高于正常大鼠，而關(guān)節(jié)腫脹的改善作用則優(yōu)于單純類風濕性關(guān)節(jié)炎大鼠，提示證候-毒性-藥效之間存在一定相關(guān)性[3]。

4.1.2 氣虛血瘀證動物模型的構(gòu)建與評價[4，5]

在小型豬冠脈環(huán)術(shù)心肌缺血模型的動態(tài)評價中，在造模8-12天，出現(xiàn)的血瘀證宏觀表征為舌質(zhì)青紫、舌質(zhì)RGB值改變、趾蹼間肌膚甲錯，精神緊張，皮毛疏松雜亂；微觀指標中TNF-α、IL-6和ET表達增加，NO表達減少，服用丹七片后血瘀證癥狀和指標改善。其中，出現(xiàn)氣虛血瘀證模型的宏觀表征為搖尾次數(shù)減少、活動度降低、抓取反應(yīng)差，舌質(zhì)RGB值降低，趾蹼間肌膚甲錯、皮毛無光澤，微觀中TNF-α、Hcy和MMP-9的表達增加，NO和HO-1表達減少。這與臨床氣虛血瘀證患者臨床表現(xiàn)和生化指標改變相似。

在大鼠左冠脈結(jié)扎心肌缺血模型的動態(tài)評價中，在造模后7-28天，大鼠氣虛血瘀證宏觀表征為舌、耳廓、尾、爪甲青紫，舌底靜脈迂曲，舌質(zhì)RGB值下降，呼吸頻率減慢、游泳力竭且時間縮短。微觀指標中TNF-α、Hcy、MMP-9表達增加，NO和HO-1表達減少。也可以結(jié)合代謝組學觀察特殊分子群的變化。氣虛證大鼠的宏觀表征為色舌淡白，呼吸頻率下降，活動度下降，游泳力竭時間縮短，抓力下降；微觀指標中TNF-α和MMP-9表達增加，NO和APN表達減少。通過與臨床證候?qū)Ρ?，可加強動物證候模型與臨床證候的一致性，從而確保動物模型實驗結(jié)果的準確性，為證候研究提供理論基礎(chǔ)。

冠心病氣血血瘀證證候生物學基礎(chǔ)以冠心病氣虛血瘀證為切入點。通過文本挖掘，結(jié)合蛋白組學和代謝組學技術(shù)觀察臨床患者、動物模型的理化指標、蛋白質(zhì)和代謝物，了解證候的生物學基礎(chǔ)。不同種屬間氣虛血瘀證呈現(xiàn)共性特征分子群，且形成一個相互作用的蛋白網(wǎng)絡(luò)（37個蛋白質(zhì)、110對相互作用）ACTB、ACTG1、ACTN4、TUBB等基因為其關(guān)鍵節(jié)點。

4.2 揭示方劑功能主治和證的現(xiàn)代科學內(nèi)涵——方證相應(yīng)[6，7]

方劑的功效是特定方藥與特定病證之間相互作用的結(jié)果。體外研究的新思路是采用證候患者的血清刺激RAW264.7細胞，檢測Toll樣受體（Toll Like Receptors，TLRs）和細胞因子水平，同時采用方藥或含藥血清進行干預，觀察上述指標的逆轉(zhuǎn)作用。TLRs是一類重要的信號轉(zhuǎn)導型結(jié)構(gòu)識別受體，跨膜受體蛋白。TLRs與感染性疾病、心血管疾病、胃腸疾病、自身免疫性疾病、腎臟疾病等的發(fā)病有關(guān)。TLRs的研究成為生命科學領(lǐng)域的熱點，不僅對天然免疫有新認識，還與獲得性免疫聯(lián)系起來，為感染性、炎癥性、自身免疫性、腫瘤等疾病的發(fā)生，宿主的易感性及治療提供新思路?！胺阶C對應(yīng)”試驗結(jié)果顯示桂枝湯證患者血清中TLR-3、TLR-4、TLR-9 mRNA表達增加，血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β表達增加。這是桂枝湯證患者在免疫調(diào)節(jié)環(huán)節(jié)中的重要病理基礎(chǔ)。

桂枝湯含藥血清可完全逆轉(zhuǎn)桂枝湯證患者血清TLRs及其介導產(chǎn)生的細胞因子的水平，具有“適配作用”，符合中醫(yī)方證相關(guān)。桂枝湯證患者TLR-3、TLR-4、TLR 9 mRNA表達減少；IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β表達減少。麻黃湯證患者TLR-3、TLR-4 mRNA表達減少，IL-1β、IL-6水平降低；銀翹散證患者TLR-4 mRNA表達減少；IL-1β、IL-6含量降低；桑菊飲證患者TLR-4 mRNA表達減少，IL-1β、IL-6含量降低。與其他方劑對比，可見桂枝湯在最大程度上緩解了桂枝湯證患者血清炎性因子的變化。這樣的思路還可用于其他證候?qū)W研究中。

4.3 提出與中藥功效相對應(yīng)的生物學指標

2017年度醫(yī)學科學部重點立項領(lǐng)域中，有3個方向的研究亟待中醫(yī)藥解決，分別為：基于循證醫(yī)學證據(jù)的中醫(yī)藥優(yōu)勢病種防治機制研究；芳香類中藥“開竅”或“化濕”物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機制研究；代謝紊亂致心肌細胞功能障礙的分子機制及干預。

中藥的功效通常為綜合性的體現(xiàn)，其內(nèi)涵不是一、兩個指標就可體現(xiàn)，以傳統(tǒng)經(jīng)方名方安宮牛黃丸為例，提出“開竅醒神”功效評價指標界定的問題；另外，方中朱砂、雄黃為有毒中藥，出口藥必須去除其中的有毒重金屬成分，那么重金屬成分是否在藥效中起作用以及安全性如何，這些內(nèi)容都需要通過更為精準的證候模型和評價方法研究清楚。首先需指出的是“開竅醒神”功效相關(guān)的生物學指標不是單純的中樞興奮或鎮(zhèn)靜，是腦功能的全面改善的綜合體現(xiàn)，終點指標以腦電圖評價較好。安宮牛黃丸對感染中毒性腦損傷、缺血或出血性腦損傷模型中均表現(xiàn)出顯著的改善腦電圖（促清醒）作用，主要作用環(huán)節(jié)涉及神經(jīng)細胞保護、突觸結(jié)構(gòu)重塑、神經(jīng)發(fā)生和血管新生等。對原代培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元損傷的保護作用及機理的研究（血清、腦脊液藥理）表明：安宮牛黃丸對缺糖缺氧、谷氨酸誘導原代皮層神經(jīng)元損傷具有保護作用，改善原代皮層神經(jīng)元線粒體膜電位及[Ca2+]i的含量。安宮牛黃丸醒腦開竅作用的生物學指標如圖1所示。

圖1 與“開竅醒神”功效相關(guān)的生物學指標示例[2]

4.3.1 安宮牛黃丸對腦損傷大鼠腦電活動和突觸結(jié)構(gòu)的影響

該項研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，缺血性及內(nèi)毒素性腦損傷可引起腦電圖β波功率及相對功率降低，δ波相對功率提高，提示模型動物處于意識障礙或昏迷狀態(tài)。LPS可引起皮層錐體細胞胞體縮小，核固縮，多數(shù)細胞核仁消失；導致突觸數(shù)量的減少，突觸超微結(jié)構(gòu)破壞，突觸間隙縮窄，突觸前膜囊泡大量聚集，突觸后膜PSD減少。安宮牛黃丸全方可以使β波功率和相對功率增加，表現(xiàn)腦電激活作用；全方可減輕內(nèi)毒素引起的皮層錐體細胞胞體縮小及核固縮，減輕細胞損傷；抑制突觸前膜囊泡聚集，使突觸間隙和PSD增加；并出現(xiàn)意識覺醒和行為活動增加[8]。

4.3.2 安宮牛黃丸對腦損傷大鼠腦血管生成和神經(jīng)發(fā)生的影響

腦缺血第7天，腦皮層、紋狀體、側(cè)腦室下區(qū)域、海馬齒狀回區(qū)域的神經(jīng)細胞數(shù)目有所增加；安宮牛黃各個劑量可以進一步增加神經(jīng)細胞數(shù)目。對血管生成的影響方面。腦缺血第7天，腦皮層、紋狀體血管數(shù)目明顯增加；安宮牛黃丸可以進一步增加皮層血管數(shù)目。

4.3.3 安宮牛黃丸對腦出血大鼠有保護作用

安宮牛黃丸可顯著改善神經(jīng)癥狀，降低腦指數(shù)，提高紅細胞變形性，降低LDH活性，提高SOD活性，降低MDA含量，改善組織病理形態(tài)?？梢詼p少TUNEL的陽性表達，通過促進Bcl-2表達、抑制BAX表達抗凋亡；通過抑制AQP4、MMP9表達改善血腦屏障通透性，發(fā)揮神經(jīng)保護作用；通過抑制c-fos、c-jun、PKC、P38 mRNA表達，促進ERK mRNA表達，來調(diào)節(jié)MAPK通路，發(fā)揮神經(jīng)保護作用[9，10]。

去朱砂雄黃后對血腦屏障通透性相關(guān)蛋白表達的影響與全方相近，對凋亡的抑制作用有所減弱。但與全方等效劑量進行組間比較無顯著性差異；去朱砂雄黃后減少c-fos、c-jun、P38 mRNA的表達作用明顯弱于安宮牛黃丸組。朱砂雄黃可能與安宮牛黃丸對MAPK通路的調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

這些研究結(jié)果表明，“開竅醒神”功效表現(xiàn)在腦功能恢復的多項指標上：促清醒、抗多種腦損傷、促進腦神經(jīng)血管的再生與發(fā)生等作用。去朱砂、雄黃后，多項實驗指標作用減弱，特別在促清醒、抗細胞凋亡指標上與全方有顯著性差異，提示朱砂、雄黃在全方中的存在是必要的。含與不含朱砂、雄黃的安宮牛黃丸對損傷神經(jīng)細胞的保護作用的差異與朱砂、雄黃可能相關(guān)[8]。

4.4 加快中藥優(yōu)勢領(lǐng)域藥物研發(fā)

2017年度醫(yī)學科學部重點立項中把代謝紊亂致心肌細胞功能障礙的分子機制及中藥干預作為重點。以實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型的建立與評價為例。高糖高脂飼料喂養(yǎng)可增加大鼠的血脂，高糖高脂飼料喂養(yǎng)疊加鏈脲佐茵素（Streptozotocin,STZ）后可增加大鼠的血脂、血糖，高糖高脂飼料喂養(yǎng)疊加STZ后可降低大鼠的心功能，高糖高脂飼料喂養(yǎng)疊加STZ后可損傷大鼠的心臟結(jié)構(gòu)（圖2）。高糖高脂飼料喂養(yǎng)負荷30 mg·kg-1STZ腹腔注射可建立實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型。模型大鼠進食、飲水量增加，體重急劇下降，血糖、血脂和心肌組織脂肪酸含量升高，心臟出現(xiàn)以舒張功能下降為主的心功能減弱，并發(fā)心肌肥厚等結(jié)構(gòu)紊亂，與臨床2型糖尿病患者發(fā)病規(guī)律和表現(xiàn)形態(tài)相近。高糖高脂飼料喂養(yǎng)12周，能夠顯著提高大鼠血脂各項指標，而不能提高血糖水平，但是大鼠出現(xiàn)了溫和但是顯著的心功能障礙和心肌病理損傷，提示高糖高脂飼料喂養(yǎng)出現(xiàn)的肥胖和高血脂是推動糖尿病心肌病大鼠模型發(fā)病的重要致病因素[11]。

研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿可改善糖尿病大鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能損傷。高糖高脂飼料喂養(yǎng)負荷30 mg·kg-1STZ腹腔注射可建立實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型。模型大鼠進食、飲水量增加，體重急劇下降，血糖、血脂和心肌組織脂肪酸含量升高，心臟出現(xiàn)以舒張功能下降為主的心功能減弱，并發(fā)心肌肥厚等結(jié)構(gòu)紊亂，與臨床2型糖尿病患者證侯和表現(xiàn)相近，表現(xiàn)出氣陰兩虛、陰虛內(nèi)熱證。小檗堿可以顯著改善實驗性2型糖尿病心肌病。改善大鼠模型的一般狀態(tài)，降低血糖、血脂水平，改善心臟功能，抑制心肌肥厚和左心室重構(gòu)，對動物飲食量沒有明顯的作用。通過抑制模型大鼠PPARα基因以及提高PPARγ基因和蛋白表達，從而提高GLUT4轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)大鼠外周循環(huán)和心肌中脂肪代謝，增加心肌組織葡萄糖的利用，改善心臟結(jié)構(gòu)和功能損傷。由以上結(jié)果得出，小檗堿對于2型糖尿病心肌病的治療是多靶點綜合作用的結(jié)果[12,13]。

4.5 創(chuàng)建動物新模型、提出藥物研發(fā)新策略

圖2 高糖高脂飼料負荷STZ注射對大鼠心臟病理結(jié)構(gòu)的影響[16]

中藥新藥研究如何“堅持繼承創(chuàng)新，發(fā)揮特色優(yōu)勢”，需繼續(xù)創(chuàng)建新的疾病和病癥結(jié)合動物模型，藥物的干預是環(huán)節(jié)的。如抗抑郁藥研究，新模型的評價有3個主要原則：①現(xiàn)實有效性，即動物模型與抑郁癥的臨床特征具有相似性；②建造有效性，即構(gòu)建動物模型理論的合理性；③預測有效性，即對抗抑郁藥物的反應(yīng)性。抗抑郁藥研究的新策略有：NK-1受體拮抗劑、CRF拮抗劑、GR拮抗劑、NMDA受體拮抗劑、AMPA受體增強劑、cAMP信號激活、促進神經(jīng)生長因子生成等，作用于這些環(huán)節(jié)的藥物起到減少應(yīng)激物質(zhì)作用效應(yīng)、減輕神經(jīng)元損傷、促進神經(jīng)元發(fā)生的作用，均可具有抗抑郁作用[14，15]。

5 小結(jié)

中醫(yī)藥振興發(fā)展迎來了天時、地利、人和的歷史性機遇。中醫(yī)藥現(xiàn)代化創(chuàng)新的來源是中醫(yī)藥理論和臨床實踐及現(xiàn)代科學技術(shù)發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，將傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論和現(xiàn)代科學體系、技術(shù)的結(jié)合、整合、融合，可以上升到新的發(fā)展高度。

1中華人民共和國國務(wù)院新聞辦公室.中國的中醫(yī)藥(白皮書),2016.

2孫建寧,孫文燕,董世芬.基于臨床用藥特點的中藥復方新藥藥效評價思路與方法探討.中國中藥雜志,2017,42(5)：852-855.

3熊海霞,楊穎,靖衛(wèi)霞,等.病/證狀態(tài)對附子急性毒性與藥效影響探析.世界科學技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2013,15(8)：1721-1724.

4劉建勛,林成仁,任建勛,等.痰瘀同治方對痰瘀互結(jié)證冠心病小型豬心肌組織的保護作用.中國中藥雜志,2014,39(4)：726-731.

5劉建勛,林成仁,任建勛,等.小型豬痰瘀互結(jié)證冠心病“痰、毒、瘀”病機演變規(guī)律的實驗研究.中國中藥雜志,2013,38(23)：4138-4143.

6Elshabrawy H A,Essani A E,Szekanecz Z,et al.TLRs,future potential therapeutic targets for RA.Autoimmun Rev,2017,16(2)：103-113.

7Dowling J K,Mansell A.Toll-like receptors：the swiss army knife of immunity and vaccine development.Clin Transl Immunology,2016,5 (5)：e85.

8朱坤杰,孫建寧.朱砂雄黃在安宮牛黃丸對內(nèi)毒素腦損傷大鼠促清醒中的作用及機制.中國中藥雜志,2014,39(20)：4007-4012.

9方芳,馮淑怡,孫建寧.安宮牛黃丸對實驗性腦出血大鼠血腫周圍組織中MMP-9和AQP-4蛋白表達的影響.北京中醫(yī)藥大學報, 2011,34(8)：535-538,578.

10Wang G H,Lan R,Zhen X D,et al.An-Gong-Niu-Huang Wan protects against cerebral ischemia induced apoptosis in rats：up-regulation of Bcl-2 and down-regulation of Bax and caspase-3.J Ethnopharmacol,2014,154(1)：156-162.

11董世芬,洪纓,孫建寧,等.實驗性糖尿病心肌病大鼠模型建立及心臟功能和結(jié)構(gòu)相關(guān)性分析,中國實驗動物學報,2010,18(6)：457-462,432.

12董世芬,洪纓,汪瑞祺,等.小檗堿對實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護作用研究.中國藥理學通報,2013,29(9)：1216-1221.

13Dong S F,Hong Y,Liu M,et al.Berberine attenuates cardiac dysfunction in hyperglycemic and hypercholesterolemic rats.Eur J Pharmacol, 2011,660(2-3)：368-374.

14張家瑋,孫建寧,張愛林.建立中醫(yī)證候動物模型與復方藥物及其整體調(diào)節(jié)效應(yīng).中國臨床康復,2006,10(15)：156-158.

15劉建勛,任鈞國.源于中醫(yī)臨床的中藥復方功效的現(xiàn)代研究思路與方法.世界科學技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2015,17(7)：1372-1379.

Discussion on Research ThoughtAnd Method for Innovation Medicine of Chinese Herbal Compound Formula

Sun Jianning,Dong Shifen
(School of Chinese Materia Medica,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100102,China)

The Chinese herbal compound formula preparation,which is guided by traditional Chinese medicine(TCM) theories,and based on long-term clinical application,has its unique value.The multi-compound and multi-target characteristics are also features of Chinese materia medica(CMM).The finding and exploration of innovation CMM in modern times should be based on TCM theory and clinical application,as well as the combination of efficacy in the concept of holism and biomedical technology.Key issue in the research,development and evaluation of innovation Chinese medicine is to use to the methodology to illustrate the scientific meaning in according to the clinical application characteristics of Chinese herbal compound formula preparation.During the research and development process, considerations on CMM characteristics should be taken from research evidence,to pharmacodynamics and toxicologystudies.Pharmacodynamics researches should reflect the properties of TCM syndrome.Aspects,such as research and application of TCM syndrome model,correspondence between disease and syndrome model,research method of correspondence between syndrome and prescription,identification of biological markers corresponding to CMM pharmacologic effect,are important.So we should catch up the historical chance for TCM development,speedily develop the advantage areas,and promote the modernization and innovation of TCM.

Research and development of Chinese herbal compound formula,research of pharmacological effect,model of traditional Chinese medicine syndrome,correspondence between syndrome and prescription

10.11842/wst.2017.03.010

R288

A

（責任編輯：馬雅靜，責任譯審：王晶）

2017-03-01

修回日期：2017-03-20

＊國家自然科學基金委青年基金項目（81503287）：基于苦味受體（Tas2Rs）的“苦逐瘀”生物學物質(zhì)基礎(chǔ)研究，負責人：董世芬；國家自然科學基金委重點項目（81430094）：中藥辛/苦味活血化瘀功效的化學和生物學基礎(chǔ)研究，負責人：喬延江；教育部博士點基金項目（20130013120002）：基于代謝組學和灰色關(guān)聯(lián)分析的糖尿病心肌病發(fā)病規(guī)律和藥物治療靶點研究，負責人：董世芬。

＊＊通訊作者：孫建寧，博士，教授，博士生導師，主要研究方向：中藥防治重大疾病創(chuàng)新藥物研究。