賈梅林

（黑龍江省食品藥品審核查驗(yàn)中心）

摘 要：本實(shí)驗(yàn)研究頭孢氨芐緩釋片的制備方法并建立反相高效液相色譜法測(cè)定頭孢氨芐緩釋片中頭孢氨芐的含量。方法：采用安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸鈉溶液（240∶742：3∶15），檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。頭孢氨芐在50～300μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論：本制劑穩(wěn)定、可靠，測(cè)定方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確。

關(guān)鍵詞：頭孢氨芐；制備；研制

頭孢氨芐化學(xué)名為（6R，7R）-3-甲基-7-[（R）-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4，2，0]辛-2-烯-2-甲酸一水化合物。頭孢氨芐能抑制細(xì)胞壁的合成，使細(xì)胞內(nèi)容物膨脹至破裂溶解，殺死細(xì)菌。頭孢氨芐為廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有抗菌作用。頭孢氨芐主用于革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌感染。頭孢氨芐主要用于治療產(chǎn)青霉素酶敏感細(xì)菌所引起的呼吸道、尿路、皮膚軟組織等部位的輕癥感染。本實(shí)驗(yàn)研究頭孢氨芐緩釋片的制備方法并建立反相高效液相色譜法測(cè)定頭孢氨芐緩釋片中頭孢氨芐的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：CH-0108A手動(dòng)壓片機(jī)（東莞市創(chuàng)宏儀器設(shè)備有限公司）、高效液相色譜儀（北京美華儀科技有限公司）、奧豪斯Explorer專業(yè)型分析天平（奧豪斯儀器上海有限公司）、EX623 EXPLORER精密天平（美國(guó)奧豪斯儀器（上海）有限公司）、臺(tái)式雙頻數(shù)控超聲波清洗器（北京恒奧德儀器儀表有限公司）、pHS-2C型精密酸度計(jì)（上海精科雷磁廠）、Kertone實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)（科爾頓（中國(guó)）有限公司）、德國(guó)優(yōu)萊博TW20通用水浴槽（上海沃瓏儀器有限公司）、電熱蒸餾水器（西安太康生物科技有限公司）、RC-3藥物溶出儀（天津大學(xué)無(wú)線電廠）。硬脂酸（曲阜市天利藥用輔料有限公司）、HPMC （曲阜市天利藥用輔料有限公司）、微晶纖維素（曲阜市天利藥用輔料有限公司）、可壓性淀粉（鄭州明瑞化工產(chǎn)品有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫 十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：頭孢氨芐購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：甲醇（濟(jì)寧佰一化工有限公司）、乙腈（濟(jì)寧佰一化工有限公司）、磷酸二氫銨（濟(jì)南匯豐達(dá)化工有限公司）、三乙胺（濟(jì)南匯豐達(dá)化工有限公司）、醋酸（濟(jì)寧佰一化工有限公司）、醋酸鈉（濟(jì)南匯豐達(dá)化工有限公司）。

2 制備方法

2.1 制備方法

將頭孢氨芐過(guò)80目，輔料過(guò)60目，混合均勻，壓片。

2.2 輔料的選用

HPMC為骨架材料，以微晶纖維素、可壓性淀粉調(diào)節(jié)釋放度，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選處方。

2.3 壓片壓力的選擇

分別制備硬度為3.0±0.1kg，6.0±0.1kg，9.0±0.1kg的頭孢氨芐緩釋片，測(cè)定其釋放度，考察壓片壓力對(duì)頭孢氨芐緩釋片的影響。

3 釋放度的測(cè)定

3.1 含量測(cè)定

3.1.1 流動(dòng)相的選擇

分別考察0.04moloL-1磷酸二氫銨溶液-乙腈-三乙胺（60∶40：0.01），甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸鈉溶液（240∶742：3∶15），甲醇-水-冰醋酸（13∶86∶1），水-甲醇-冰醋酸（90∶30∶0.12）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸鈉溶液（240∶742：3∶15）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸鈉溶液（240∶742：3∶15）為流動(dòng)相。依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-5]。流動(dòng)相：甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸鈉溶液（240∶742：3∶15）檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按頭孢氨芐峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

3.1.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取頭孢氨芐對(duì)照品適量，置容量瓶中，加流動(dòng)相制成每1mL含100μg的溶液，即得。

3.1.3 供試品溶液的制備

取供試品，研細(xì)，精密稱取適量，置具塞錐形瓶中，精密加入流動(dòng)相100mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理5分鐘，放冷，精密稱定，用流動(dòng)相補(bǔ)足重量，搖勻，濾過(guò)。取續(xù)濾液，即得。

3.1.4 專屬性試驗(yàn)

依照處方取除頭孢氨芐，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，照3.1.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測(cè)定，結(jié)果在頭孢氨芐出峰處陰性液無(wú)色譜峰，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒(méi)有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.1.5 對(duì)照品的線性考察

精密稱取頭孢氨芐對(duì)照品5mg，置10ml容量瓶中，加入流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、5、6mL，置于10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照3.1.2項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，頭孢氨芐在50～300μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2 釋放度測(cè)定方法

取頭孢氨芐緩釋片，照釋放度測(cè)定法 （附錄XD），采用溶出度測(cè)定法（附錄XC）第二法裝置，以水900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速50r/min，依法操作，在2h、6h與12h分別取溶液3ml濾過(guò)，并即時(shí)在操作容器中補(bǔ)充水3ml。采用3.1項(xiàng)下方法測(cè)定濾液含量，分別計(jì)算出每片在不同時(shí)間的溶出量。本品在2h、6h與12h的溶出量應(yīng)分別相應(yīng)為20%～40%、40%～65%和70%以上，均應(yīng)符合規(guī)定。

4 結(jié)果

頭孢氨芐緩釋片的最佳組成為：HPMC K4M、可壓性淀粉、微晶纖維素、硬脂酸鎂。壓片壓力對(duì)頭孢氨芐緩釋片無(wú)明顯影響，三種硬度的緩釋片均符合要求。

5 討論

本制劑穩(wěn)定、可靠，符合中國(guó)藥典相關(guān)規(guī)定。此測(cè)定方法可用于頭孢氨芐緩釋片中頭孢氨芐的含量測(cè)定。依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定頭孢氨芐緩釋片三批樣品中頭孢氨芐的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為標(biāo)示量的99.1%、98.2%、98.6%。頭孢氨芐緩釋片中頭孢氨芐的含量為標(biāo)示量的95-105%。壓片壓力對(duì)頭孢氨芐緩釋片無(wú)明顯影響。

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