趙康，劉黎明，張建軍

(1.湖北中醫(yī)藥大學(xué)，湖北 武漢 430065；2.武漢大學(xué)附屬湖北省第三人民醫(yī)院 中西醫(yī)結(jié)合肝病科，湖北 武漢 430032)

·論 著·

血清WFA+-M2BP對肝纖維化和肝硬化診斷價值的meta分析

趙康1，劉黎明2，張建軍2

(1.湖北中醫(yī)藥大學(xué)，湖北 武漢 430065；2.武漢大學(xué)附屬湖北省第三人民醫(yī)院 中西醫(yī)結(jié)合肝病科，湖北 武漢 430032)

目的：評價血清多花紫藤凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白(WFA+-M2BP)對肝纖維化及肝硬化的診斷價值。方法：對PubMed、Ovid以及中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、維普數(shù)據(jù)網(wǎng)中有關(guān)WFA+-M2BP診斷肝纖維化及肝硬化的中、英文文獻(xiàn)進(jìn)行篩選和評價，采用Stata13.0軟件對入選文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果：共納入6篇英文文獻(xiàn)(包含927例患者)。Meta分析結(jié)果顯示：(1)WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化的合并敏感度為0.78[95%CI(0.67～0.86)]、合并特異性為0.86[95%CI(0.77～0.92)]、陽性似然比為5.50[95%CI(3.60～8.60)]、陰性似然比為0.26[95%CI(0.18～0.37)]、診斷比值比為22[95%CI(14～34)]、受試者曲線下面積為0.89[95%CI(0.86～0.91)]；(2)WFA+-M2BP診斷早期肝硬化的合并敏感度為0.85[95%CI(0.70～0.94)]、合并特異性為0.90[95%CI(0.62～0.98)]、陽性似然比為8.40[95%CI(2.10～33.6)]、陰性似然比為0.16[95%CI(0.08～0.32)]、診斷比值比為51[95%CI(17～151)]、受試者曲線下面積為0.92[95%CI(0.90～0.94)]。結(jié)論：血清WFA+-M2BP對肝纖維化及肝硬化有較高的診斷價值。

多花紫藤凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白；肝纖維化；meta分析

肝纖維化是以肝內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積為特征表現(xiàn)的病理性組織修復(fù)過程[1]，多項研究表明，肝纖維化是一個動態(tài)變化過程[2]，也是肝硬化的前期病變階段[3]。肝臟穿刺組織病理學(xué)檢查是診斷肝纖維化的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但由于肝穿刺檢測為有創(chuàng)檢測，臨床應(yīng)用受到限制。近年來，大量的研究關(guān)注于診斷肝纖維化及肝硬化的無創(chuàng)性檢查[4]。研究發(fā)現(xiàn)，在肝病不同階段患者血清中蛋白存在異常糖基化現(xiàn)象，即患者血清中糖蛋白及糖鏈變化與疾病發(fā)展密切相關(guān)[5]。因此，探索和發(fā)現(xiàn)肝纖維化或肝硬化相關(guān)的糖鏈診斷生物標(biāo)志物已成為研究熱點之一。

Mac-2結(jié)合蛋白(M2BP)是一個具有低聚大環(huán)結(jié)構(gòu)覆蓋的N端糖蛋白[6]，在人體細(xì)胞與細(xì)胞相互作用中發(fā)揮關(guān)鍵作用，而紫藤多花植物凝集素(WFA)能夠識辨在肝纖維化進(jìn)程中由肝星狀細(xì)胞分泌的M2BP，因此，血清多花紫藤凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白(WFA+-M2BP)水平可以準(zhǔn)確量化肝炎患者肝纖維化進(jìn)展階段。WFA+-M2BP作為檢測肝纖維化或肝硬化的新血清學(xué)標(biāo)志物[7]，具有準(zhǔn)確性高、誤差小、受其他因素影響少的特點[8]，可以成為診斷肝纖維化及肝硬化的一項可靠的指標(biāo)。本研究擬對近10年有關(guān)WFA+-M2BP用于肝纖維化及肝硬化診斷的文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)評價。

1 資料與方法

1.1 資料來源

通過計算機檢索2003年1月至2016年1月的相關(guān)文獻(xiàn)，數(shù)據(jù)庫包括PubMed、Ovid以及中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(CBM)、維普數(shù)據(jù)網(wǎng)(VIP)。檢索詞為liver cirrhosis，liver fibrosis，hepatic fibrosis，Wisteria floribunda agglutinin positive human Mac-2-binding protein，Wisteria floribunda agglutinin positive human Mac-2BP，WFA+-M2BP，肝纖維化、肝硬化、血清多花紫藤凝集素陽性Mac-2結(jié)合蛋白、血清多花紫藤凝集素陽性巨噬細(xì)胞結(jié)合蛋白等。

1.2 文獻(xiàn)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)國內(nèi)外關(guān)于WFA+-M2BP診斷肝纖維化及肝硬化的文獻(xiàn)；(2)研究對象包括各種病因?qū)е碌母卫w維化或肝硬化患者，種族、國籍及病程不限；(3)以肝活檢的組織病理學(xué)分期作為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)；(4)通過METAVIR分級法將纖維化分為F0～F4期(F0:無纖維化；F1:匯管區(qū)纖維化但無纖維間隔；F2:匯管區(qū)纖維化伴少量間隔；F3:間隔纖維化；F4:早期肝硬化)或Knodell-HAI計分系統(tǒng)進(jìn)行分級。肝纖維化分期≥F2代表有明顯肝纖維化，≥F3代表進(jìn)展期肝纖維化，F(xiàn)4表示有早期肝硬化。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)數(shù)據(jù)不全或無法提取原始數(shù)據(jù)獲取四格表；(2)綜述、信件；(3)重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)。

1.3 資料提取

根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)選取文獻(xiàn)，提取相關(guān)臨床及統(tǒng)計資料，包括研究作者、發(fā)表時間、病因、研究對象樣本量、年齡以及統(tǒng)計分析需要的各項參數(shù)(真陽性數(shù)、假陽性數(shù)、真陰性數(shù)、假陰性數(shù)等)。

1.4 文獻(xiàn)質(zhì)量評價

采用診斷性試驗準(zhǔn)確性質(zhì)量評價工具QUADAS評估納入研究的方法學(xué)質(zhì)量。對入選文獻(xiàn)的各條目按“是”、“否”、“不清楚”進(jìn)行評價。如果文獻(xiàn)各項條目評價結(jié)果均為“是”，則該文獻(xiàn)被評為A級，即出現(xiàn)偏倚的可能性極低；若其中任何1條或多條評價結(jié)果為“不清楚”，則該文獻(xiàn)被評為B級；如果其中1條或多條評價結(jié)果為“否”，則文獻(xiàn)被評為C級，即出現(xiàn)偏倚的可能性較高。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

采用Stata統(tǒng)計軟件的“midas”命令擬合雙變量模型對相關(guān)參數(shù)進(jìn)行估計。主要合并納入文獻(xiàn)的敏感性(Sen)、特異性(Spe)、陽性似然比(+LR)、陰性似然比(-LR)、診斷比值比(DOR)，獲得各效應(yīng)量的點估計及相應(yīng)95%可信區(qū)間；以線性回歸判斷Deek漏斗圖是否存在不對稱，從而判斷有無發(fā)表偏倚；采用Q統(tǒng)計量和I2統(tǒng)計量判斷研究間是否存在異質(zhì)性，如果Q統(tǒng)計量相應(yīng)P≤0.1表明存在異質(zhì)性，則采用Meta回歸探索異質(zhì)性來源；繪制綜合受試者工作特性曲線(SROC)，并獲得曲線下面積(AUC)及95%可信區(qū)間。

2 結(jié) 果

2.1 文獻(xiàn)篩檢

初步檢索得到相關(guān)中英文文獻(xiàn)共18篇，經(jīng)過進(jìn)一步篩選有6篇文獻(xiàn)入選[10-15]，均為英文文獻(xiàn)，共納入病例數(shù)927例。文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果見圖1。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程及結(jié)果

2.2 WFA+-M2BP診斷肝纖維化、肝硬化的meta分析

以肝活檢的組織病理學(xué)分期≥F3和 F4為靶疾病，擬合雙變量混合效應(yīng)模型的主要參數(shù)見表1。

表1顯示：(1)WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化及早期肝硬化的敏感度分別為78%、85%；特異性分別約為86%、90%。(2)進(jìn)展期肝纖維化患者出現(xiàn)陽性結(jié)果的可能性是非患者的5.5倍，早期肝硬化患者出現(xiàn)陽性結(jié)果的可能性是非患者的8.4倍；進(jìn)展期肝纖維化、早期肝硬化患者出現(xiàn)陰性結(jié)果的可能性是非患者的26%、16%。(3)WFA+-M2BP診斷明顯肝纖維化，出現(xiàn)陽性結(jié)果的可能性是陰性結(jié)果的1倍；而在診斷進(jìn)展期肝纖維化、早期肝硬化，出現(xiàn)陽性結(jié)果的可能性是陰性結(jié)果的22倍和51倍。(4)在進(jìn)展期肝纖維化、早期肝硬化患者受試者曲線下面積值分別為 0.89和0.92，提示具有極高的臨床診斷價值。

表1 雙變量模型主要參數(shù)結(jié)果

病理分級Sen(95%CI)Spe(95%CI)AUC(95%CI)DOR(95%CI)+LR(95%CI)-LR(95%CI)≥F30.78(0.67-0.86)0.86(0.77-0.92)0.89(0.86-0.91)22(14-34)5.50(3.60-8.60)0.26(0.18-0.37)F40.85(0.70-0.94)0.90(0.62-0.98)0.92(0.90-0.94)51(17-151)8.40(2.10-33.6)0.16(0.08-0.32)

注：AUC為受試者曲線下面積，曲線下面積越大、數(shù)值越高則臨床診斷性越高；DOR為診斷比值比，反映診斷結(jié)果與疾病的聯(lián)系程度；+LR為陽性似然比，表示患者中某種檢測出現(xiàn)陽性結(jié)果的機會是非患者的倍數(shù)；-LR為陰性似然比，表示患者中某種試驗出現(xiàn)陰性結(jié)果的機會是非患者的倍數(shù)

2.3 合并效應(yīng)量結(jié)果

見圖2。

圖2 WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化合并各效應(yīng)量的meta分析

WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化的Sen、Spe、+LR、-LR、DOR、AUC分別為0.78[95%CI(0.67～0.86)]、0.86[95%CI(0.77～0.92)]、5.50[95%CI(3.60～8.60)]、0.26[95%CI(0.18～0.37)]、22[95%CI(14～34)]、0.89[95%CI(0.86～0.91)]；WFA+-M2BP診斷早期肝硬化的合并Sen、Spe、+LR、-LR、DOR、AUC分別為0.85[95%CI(0.70～0.94)]、0.90[95%CI(0.62～0.98)]、8.40[95%CI(2.10～33.6)]、0.16[95%CI(0.08～0.32)]、51[95%CI(17～151)]、0.92[95%CI(0.90～0.94)]。

2.4 繪制SROC曲線

分別以進(jìn)展期肝纖維化和早期硬化為靶疾病，繪制SROC曲線，見圖3。圖3A中曲線下面積為0.89[95%CI(0.86-0.90)]，表明WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化有高度準(zhǔn)確性；而圖3B中曲線下面積為0.92[95%CI(0.90-0.94)]，表明WFA+-M2BP診斷顯著肝纖維化有高度準(zhǔn)確性。

圖3 WFA+-M2BP診斷進(jìn)展期肝纖維化的SROC曲線

3 討 論

WFA+-M2BP由Mac-2-結(jié)合蛋白(M2BP)和對M2BP具有特定親和力并能改變其蛋白結(jié)構(gòu)的紫藤多花植物凝集素(WFA)組成。最近，WFA+-M2BP在糖蛋白生物學(xué)相關(guān)性研究中作為一種新型的肝纖維化血清標(biāo)志物已成為研究重點[16]。M2BP是一個具有低聚大環(huán)結(jié)構(gòu)覆蓋的N端糖蛋白，在人體生物調(diào)控中發(fā)揮關(guān)鍵作用。而WFA能夠特異性識別由肝星狀細(xì)胞分泌的M2BP，是一個獨特的與肝纖維化相關(guān)動態(tài)性糖蛋白血清標(biāo)志物[11]。因此，血清WFA+-M2BP水平可以成為診斷一系列肝臟疾病的生物標(biāo)志物[13，17]。此外，在相關(guān)研究中測定血清WFA+-M2BP值甚至優(yōu)于其他的無創(chuàng)性檢測指標(biāo)，例如透明質(zhì)酸、APRI、FIB-4指數(shù)[10，17]。

因納入的研究間異質(zhì)性較大，故本研究采用雙變量混合效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析，結(jié)果顯示，WFA+-M2BP用于診斷進(jìn)展期肝纖維化、早期肝硬化的AUC值分別是0.89[95%CI(0.86-0.90)]、0.92[95%CI(0.90-0.94)]，結(jié)合兩者的陽性似然比和陰性似然比，可以認(rèn)為WFA+-M2BP在診斷進(jìn)展期肝纖維化及早期肝硬化有較高價值。

本研究評價也存在一定局限性：(1)納入的研究對象均為回顧性研究，同時根據(jù)納入研究的方法學(xué)質(zhì)量評價結(jié)果可能存在一定的偏倚風(fēng)險，對結(jié)果的可靠性會造成影響；(2)納入研究間存在異質(zhì)性，雖然采用了雙變量混合模型處理，但是對研究結(jié)果的可靠性仍存在一定影響；(3)納入研究對象存在人種、地域局限，此外文獻(xiàn)中病因涉及乙型病毒性肝炎的較少，多為丙型病毒性肝炎、自生免疫性肝病，可能對我國肝炎患者診斷價值的可靠性造成影響。

終上所述，盡管存在不足，但是WFA+-M2BP檢測作為一種新型無創(chuàng)性方法，可避免部分慢性肝病患者行有創(chuàng)性肝穿檢查；其操作簡單、可重復(fù)性高，可以作為臨床連續(xù)性觀察的重要指標(biāo)和抗纖維化治療效果的重要評價手段。國外研究多涉及丙型病毒性肝炎、自身免疫性肝炎等肝纖維化或肝硬化患者，對于乙型病毒性肝炎人群涉及較少。中國作為乙肝病毒患者大國，對于乙肝病毒造成的肝纖維化或肝硬化，其WFA+-M2BP的診斷價值仍然需要進(jìn)一步開展高質(zhì)量、多中心、大樣本研究來評估。

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Diagnostic value of WFA+-M2BP in patients with hepatic fibrosis or liver cirrhosis：a meta-analysis

ZHAO Kang1，LIU Li-ming2，ZHANG Jian-jun2

(1.HubeiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Wuhan430065，China；2.DepartmentofIntegratedTraditionalandWesternMedicine，NO.3HospitalofHubei,WuhanUniversity，Wuhan430032，China)

Objectives: To evaluate the diagnostic value of WFA+-M2BP in patients with hepatic fibrosis or liver cirrhosis.Methods: A literature search was conducted from the PubMed，Ovid and China Biological Medicine Database (CBM)，VIP data network (VIP).The databases were used to identify the Chinese or English literature which were related with the use of WFA+-M2BP in the diagnosis of patients with hepatic fibrosis or liver cirrhosis.The software-Stata version 13.0 was used to analyze the data.Results: A total of six English articles involving 927 patients were identified.The results showed that:(1)The results of Sen，Spe，+LR，-LR，DOR，AUC for WFA+-M2BP to diagnose advanced hepatic fibrosis were 0.78[95%CI(0.67～0.86)]，0.86[95%CI(0.77～0.92)]，5.50[95%CI(3.60～8.60)]，0.26[95%CI(0.18～0.37)]，22[95%CI(14～34)] and 0.89[95%CI(0.86～0.91)]，respectively.(2)The results of Sen，Spe，+LR，-LR，DOR，AUC for WFA+-M2BP to diagnose early-stage liver cirrhosis were 0.85[95%CI(0.70～0.94)]，0.90[95%CI(0.62～0.98)]，8.40[95%CI(2.10～33.6)]，0.16[95%CI(0.08～0.32)]，51[95%CI(17～151)] and 0.92[95%CI(0.90～0.94)]，respectively.Conclusion: WFA+-M2BP has a high diagnostic value for hepatic fibrosis and liver cirrhosis.

WFA+-M2BP；hepatic fibrosis；meta analysis

2016-08-22

2016-09-11

湖北省衛(wèi)生廳科研基金項目(JX5B39)

趙康(1988-)，女，湖北襄陽人，住院醫(yī)師，在讀博士研究生。E-mail:451321811@qq.com

張建軍 18963989890@189.cn

趙康，劉黎明，張建軍.血清WFA+-M2BP對肝纖維化和肝硬化診斷價值的meta分析[J].東南大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2017，36(1)：34-39.

10.3969/j.issn.1671-6264.2017.01.009

R446.11

A

1671-6264(2017)01-0034-06