崔艷麗

（黑龍江省獸藥飼料監(jiān)察所黑龍江哈爾濱150069）

雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感（H9亞型）四聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株）安全性評價

崔艷麗

（黑龍江省獸藥飼料監(jiān)察所黑龍江哈爾濱150069）

雞新城疫（ND）、雞傳染性支氣管炎（IB）、雞減蛋綜合征（EDS）和禽流感（AI）是危害養(yǎng)禽業(yè)最主要的傳染病，給我國的養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，四種疾病的四聯(lián)苗安全性問題顯得尤為重要。該疫苗在使用過程中，會存在復(fù)雜多變的情況。因此，該實驗主要從單劑量接種、單劑量重復(fù)接種和一次性超劑量接種進(jìn)行全方位的安全性評價，重點觀察注射部位的變化，包括注射部位組織病變等，連續(xù)觀察30 d，注射后疫苗完全吸收，證明該疫苗是安全的，從而為用戶的正確使用提供指導(dǎo)。

四聯(lián)；滅活疫苗；安全性

雞新城疫（ND）、雞傳染性支氣管炎（IB）、雞減蛋綜合征（EDS）和禽流感（AI）是危害養(yǎng)禽業(yè)最主要的傳染病，給我國的養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。新城疫和禽流感是禽類的高度接觸性傳染病，傳染性支氣管炎、減蛋綜合征也對世界各國的養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，因此對這四種疾病的防治具有重要的公共衛(wèi)生意義。為了有效的控制這四種疾病的流行，結(jié)合滅活疫苗的特點，研制了雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征和禽流感（H9亞型）四聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株），因為滅活疫苗是經(jīng)理化方法處理而致死的病原體，免疫應(yīng)激反應(yīng)小，安全性好，一次免疫持續(xù)時間長，有利于制造多價苗或聯(lián)合苗，并且存儲比較方便，能達(dá)到減少雞只免疫應(yīng)激、降低生產(chǎn)成本，為養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展提供了有力的物質(zhì)保障。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用四聯(lián)滅活疫苗雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征和禽流感（H9亞型）四聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+HS25株+HZ株）由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)，批號：201601。

1.1.2 試驗動物SPF雞：從山東農(nóng)科院購買SPF雞胚，自行孵化，在相對隔離的環(huán)境中飼養(yǎng)；商品蛋雞：從哈爾濱市郊某雞場購買，隔離飼養(yǎng)；羅曼蛋雞：購自哈爾濱市某雞場，隔離飼養(yǎng)。

1.2 主要儀器

1.3 試驗方法

1.3.1 單劑量接種安全性試驗用28日齡的SPF雞和134日齡產(chǎn)蛋雞各15只，每只雞頸部皮下注射四聯(lián)滅活疫苗0.5 mL，注射10只，在隔離器內(nèi)飼養(yǎng)；同時設(shè)5只作對照，每只雞頸部注射0.5 mL的生理鹽水。SPF雞連續(xù)觀察15 d，然后剖殺部分雞，重點檢查注射部位的變化，包括注射部位組織病變；產(chǎn)蛋雞連續(xù)觀察30 d，然后統(tǒng)計1周內(nèi)平均產(chǎn)蛋率。

1.3.2 單劑量重復(fù)接種安全性試驗①28日齡SPF雞單劑量重復(fù)接種安全性試驗：用15只28日齡的SPF雞，每只雞頸部皮下注射0.5 mL疫苗，注射10只，在隔離器內(nèi)飼養(yǎng)；同時設(shè)5只作對照，每只雞頸部注射0.5 mL的生理鹽水。接種2周后，按照相同劑量再重復(fù)接種一次，每天觀察各組雞是否出現(xiàn)全身癥狀。連續(xù)觀察15 d，然后剖殺部分雞，重點檢查注射部位的變化，包括注射部位組織病變。②134日齡的商品蛋雞單劑量重復(fù)接種安全性試驗：用15只134日齡的商品蛋雞，每只雞頸部皮下注射0.5 mL疫苗，注射10只；同時設(shè)5只作對照，每只雞頸部注射0.5 mL的生理鹽水。接種2周后，按照相同劑量再重復(fù)接種一次，每天觀察各組雞是否出現(xiàn)全身癥狀。連續(xù)觀察30 d，重點檢查注射部位的變化，然后統(tǒng)計1周內(nèi)的產(chǎn)蛋情況。

1.3.3 一次超劑量接種安全性試驗①28日齡SPF雞一次超劑量接種安全性試驗：用15只28日齡的SPF雞，每只雞頸部皮下注射1.5 mL（3倍單劑量）疫苗，注射10只，在隔離器內(nèi)飼養(yǎng)；同時設(shè)5只作對照，每只雞頸部注射0.5mL的生理鹽水。連續(xù)觀察15 d，然后剖殺部分雞，重點檢查注射部位的變化，包括注射部位組織病變。②134日齡的商品蛋雞單劑量重復(fù)接種安全性試驗：用15只134日齡的商品蛋雞，每只雞頸部皮下注射1.5mL（3倍單劑量）疫苗，注射10只；同時設(shè)5只作對照，每只雞頸部注射0.5mL的生理鹽水。每天觀察各組雞是否出現(xiàn)全身癥狀。連續(xù)觀察30 d，重點檢查注射部位的變化，然后統(tǒng)計1周內(nèi)的產(chǎn)蛋情況。

2 安全檢驗結(jié)果

2.1 單劑量接種安全性試驗

頸部注射后，SPF雞沒有表現(xiàn)出任何臨床癥狀和全身不良反應(yīng)；觀察15 d后剖殺5只雞，在注射部位存有一定量的疫苗，沒有完全吸收，但并沒有對組織造成明顯的損傷；134日齡產(chǎn)蛋雞，注射部位無紅腫現(xiàn)象，無全身不良反應(yīng)，注射30 d后，1周產(chǎn)蛋率與對照組比較，沒有明顯差異。因此，單劑量注射對免疫雞是安全的。具體結(jié)果見表1。

2.2 單劑量重復(fù)接種安全性試驗

第一次注射2周后，再次以相同劑量重復(fù)注射疫苗，注射以后，無論是SPF雞還是蛋雞都沒有表現(xiàn)出任何臨床癥狀和全身不良反應(yīng)；觀察15 d后剖殺部分雞，在注射部位存有一定量的疫苗，沒有完全吸收，但并沒有對組織造成明顯的損傷；134日齡產(chǎn)蛋雞，單劑量重復(fù)注射后，注射部位無紅腫現(xiàn)象，無全身不良反應(yīng)，注射30 d后，1周產(chǎn)蛋率與對照組比較，沒有明顯差異。因此，單劑量重復(fù)注射是安全的。結(jié)果見表2。

2.3 一次超劑量接種安全性試驗結(jié)果

一次超劑量注射后（3倍正常使用劑量），在初期（接種后的1～5 d）SPF和蛋雛雞都表現(xiàn)出輕微的臨床癥狀，與對照雞相比，飲食量下降、喜臥，精神稍不好，但沒有出現(xiàn)死亡；隨著時間的推移，雞的臨床癥狀逐漸消失，精神變好，飲食恢復(fù)正常；在觀察15 d期間沒有出現(xiàn)死亡，15 d后剖殺部分雞，在注射部位還存有一定量的疫苗，沿著頸部皮膚，有大量的疫苗遷移，但注射部位沒有出現(xiàn)出血和水腫癥狀；134日齡產(chǎn)蛋雞注射后，無全身不良反應(yīng)，注射部位無紅腫現(xiàn)象，注射30 d后統(tǒng)計產(chǎn)蛋率與對照組比較，沒有顯著差異。因此，疫苗一次性超劑量接種試驗是安全的。結(jié)果見表3。

考慮到雞日齡和品種對滅活疫苗安全性的敏感程度不同，選用了28日齡SPF雞和羅曼蛋雞以及134日齡的產(chǎn)蛋雞。在安全性試驗中，設(shè)了單劑量注射、重復(fù)注射和一次大劑量注射，接種途徑為頸部皮下注射。試驗中發(fā)現(xiàn)單劑量和單劑量重復(fù)注射組，在15 d觀察期間，沒有表現(xiàn)出任何臨床不良反應(yīng)，雞群正常；對于即將開產(chǎn)的120日齡蛋雞，觀察30 d，然后統(tǒng)計1周產(chǎn)蛋率，與對照組比較，沒有明顯差異；一次大劑量注射（3倍單劑量），雛雞（SPF雞和蛋雛雞）在15 d觀察期間，沒有出現(xiàn)死亡，但是在接種后的1～5 d，表現(xiàn)出一定的臨床癥狀，這可能是與接種劑量大有關(guān)，在觀察后期，癥狀消失；15 d后剖殺，在注射部位還存有一定量的疫苗，沿著頸部皮膚有大量的疫苗遷移，但注射部位沒有出現(xiàn)出血和水腫癥狀。這可能是由于注射劑量過大，在注射部位形成暫時腫脹，引起局部反應(yīng)所致，并非疫苗的毒性所致；而134日齡的產(chǎn)蛋雞，注射后無全身不良反應(yīng)，注射部位無明顯變化，觀察30 d后，統(tǒng)計1周內(nèi)的產(chǎn)蛋率，與對照組比較，無明顯差異?！?/p>

New Castle Disease,Infectious Bronchitis,Egg Drop Syndrome,Avian Influenza(H9 Subtype)Quadruple Inactivated Vaccines(Lasota Seedlings+M41 Sapling+HS25 Sapling+HZ Sapling)Safety Evaluation

Cui Yanli
(Veterinary medicine feed supervision in heilongjiang province,Harbin Heilongjiang,150069)

The newcastle disease(ND),infectious bronchitis(IB),egg drop syndrome(EDS)and avian influenza are the main infectious diseases to poultry industry,which bring a huge economic losses for our country's farming.The security of quadruple vaccine of these four diseases is particularly important that varieties may be existing in the process of use.Therefore,this experiment was conducted to make a safety evaluation on this vaccine which emphasized on the variation of injection site and pathological changes of tissues with 30 days.It will be safety that the vaccine will be totally absorbed after injection and provide a correct guidance in using it for the farmer.

Quadruple;Inactivated vaccine;Security

表1 單劑量接種安全性試驗

表2 單劑量重復(fù)接種安全性試驗

表3 一次超劑量（3倍單劑量）接種安全性試驗

10.3969/j.issn.1008-4754.2017.03.046