陳少鋒 趙湘培 余勝民 鐘 鳴

(廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530001)

瑤藥白花丹炮制前后急性毒性的研究△

陳少鋒 趙湘培 余勝民 鐘 鳴

(廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530001)

目的：比較白花丹藥材及炮制品的急性毒性大小，為探討白花丹炮制機(jī)理提供依據(jù)。方法：采用測(cè)定半數(shù)致死量的方法對(duì)白花丹藥材及炮制品的急性毒性進(jìn)行研究。結(jié)果：白花丹生品及炮制品的LD50分別為88.7g/kg(95%置信區(qū)間為84.1～93.5g/kg)、99.5 g/kg(95%置信區(qū)間為93.7～105.7g/kg)。結(jié)論：白花丹炮制后急性毒性有明顯降低，表明用黃酒炮制能夠降低白花丹的毒性。

白花丹；炮制；急性毒性;瑤藥

瑤藥白花丹為白花丹科植物白花丹Plumbago zeylanica L.的干燥全草，在廣西分布較廣，是常用特色藥材。廣西壯醫(yī)稱“巔邦”(dien bang)或“裸端”(godon)，瑤族民間稱之為“猛老虎”(mongv ndormh maauh，蒙冬卯)或“三錢三”，主要用于治療風(fēng)濕骨痛、骨質(zhì)增生、跌打損傷、肝硬化和肝脾腫大。具有散瘀消腫，祛風(fēng)除濕，消炎止痛和殺蟲解毒作用[1]。文獻(xiàn)及臨床應(yīng)用表明白花丹藥材有毒，其中毒癥狀為：皮膚與其液接觸引起紅腫，脫皮，誤食后會(huì)出現(xiàn)麻痹，孕婦誤食會(huì)引起流產(chǎn)；家畜誤食會(huì)引起瀉下[2]。

白花丹還具有抗乙肝病毒[3]、抗生育[4]、抗動(dòng)脈粥樣硬化[5]、抗高血糖[6]、增加中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性[7]等作用。白花丹根和葉主要成分為白花丹素(白花丹醌、礬松素)(plumbagin)、氫化蘭雪苷(tydroplumbagin glucoside)、氨基酸及有機(jī)酸等。藥理作用試驗(yàn)表明：白花丹全草的水煎液或乙醇提取液對(duì)溶血性鏈球菌有較強(qiáng)的抑菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌、傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌有抑制作用。礬松素對(duì)革蘭氏菌、流感病毒、結(jié)核桿菌有廣譜抗菌作用，對(duì)利什曼原蟲亦有對(duì)抗作用。礬松素或白花丹酸給小鼠灌胃，有明顯祛痰作用[8]。由于白花丹主要用于風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，跌打損傷及皮廯，并且白花丹根莖不是很堅(jiān)硬，而酒制法 “通血脈”“祛風(fēng)”“殺腥” “酒制升提，引藥上行” ，多用于活血化瘀藥、祛風(fēng)通絡(luò)和苦寒類藥物，故采用先伴酒再炒藥的酒制法進(jìn)行炮制。

本實(shí)驗(yàn)觀察白花丹提取物及白花丹炮制后提取物是否具有毒副作用。通過(guò)毒理學(xué)研究，為確定白花丹及白花丹炮制品的最大安全劑量，指導(dǎo)臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥材： 白花丹藥材，采自廣西金秀瑤族自治縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為白花丹科植物白花丹的全草，烘干切片。白花丹的炮制品，取白花丹藥材，加黃酒適量，拌勻后放置一下，置于鍋內(nèi)炒制至無(wú)酒味，放涼。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物： 昆明種小鼠，SPF級(jí)，體重18～22g，雌雄各半。購(gòu)自廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SXK桂2003-0003。動(dòng)物購(gòu)回后，雌雄分飼，由專人飼養(yǎng)管理，動(dòng)物室溫度控制在18～25℃，相對(duì)濕度控制在50～60%，動(dòng)物室按常規(guī)定期消毒。

2 方法

2.1 提取物的制備： 分別取白花丹藥材及炮制品，將其粉碎為粗粉末，加水浸泡2 h，以武火煮沸后改文火煎煮90 min，冷卻30 min后濾渣取汁。將濾渣再煎煮2次取汁。將藥汁混合，濃縮制得每毫升含生藥2.5 g的白花丹生品及炮制品水煎液，置冰箱4℃?zhèn)溆谩?/p>

2.2 白花丹的急性毒性試驗(yàn)[9]： 以改進(jìn)寇氏法設(shè)計(jì)，經(jīng)預(yù)試，分別找出引起動(dòng)物0%(Dn)和100%(Dm)死亡的白花丹水提物的劑量。根據(jù)預(yù)試結(jié)果在測(cè)得Dn 和Dm 劑量范圍內(nèi)設(shè)4個(gè)劑量組，分別為114.4g/ Kg，97.2 g/ Kg，87. g/ Kg，78.7 g/ Kg,70.8 g/ Kg，每組10只小鼠，組間劑量比值1:0.9，禁食12h后不禁水，分別灌服不同劑量的受試藥物(每只小鼠用藥體積均為0 .4ml/10g 體重)，連續(xù)觀察7天各小鼠的毒性反應(yīng)情況。

3 結(jié)果

小鼠給藥后自發(fā)活動(dòng)減少、倦臥不動(dòng)、嗜睡，動(dòng)物皮毛光澤，無(wú)震顫、驚厥、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難等現(xiàn)象發(fā)生。給藥半天后開始有小鼠死亡。給藥7d后觀察，5個(gè)劑量組的小鼠都出現(xiàn)不同的死亡情況，結(jié)果如表1，表2。

表1 白花丹水提物毒性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡結(jié)果

經(jīng)改進(jìn)寇氏法計(jì)算，白花丹水提物小鼠口服給藥可測(cè)得LD50值為88.7g/kg，其95%置信區(qū)間為84.1～93.5g/kg。

表2 白花丹炮制品水提物毒性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡結(jié)果

經(jīng)改進(jìn)寇氏法計(jì)算，白花丹炮制品水提物小鼠口服給藥可測(cè)得LD50值為99.5g/kg，其95%置信區(qū)間為93.7～105.7g/kg。

4 討論

白花丹為白花丹科植物白花丹的干燥全草。白花丹的主要成分是白花丹琨，白花丹提取物具有抗瘧原蟲，抗菌，抗過(guò)敏，抗高血糖癥，抗腫瘤及抗肝纖維化等作用[10]。白花丹藥材有小毒，經(jīng)先伴酒再炒藥的酒制法進(jìn)行炮制，白花丹的毒性從88.7g/kg降低到99.5g/kg。說(shuō)明酒制白花丹有效。

[1]廣西藥檢所.廣西民族藥簡(jiǎn)編[M].南寧：廣西民族出版社,1980:52.

[2]中國(guó)藥品生物制品檢定所,等.中國(guó)民族藥志[M].第二卷.北京:人民衛(wèi)生出版社,1990:152.

[3]Chen W， Yu Z， Li S.Effects of the water-soluble extracts from the single herb of ganduqing against hepatitis B virus in vitro[J]. Zhong Yao Cai,1999 Sep；22(9)：463-5.

[4]Azad Chowdhury AK， Sushanta KC， Azad Khan AK.Antifertility activity of Plumbago zeylanica Linn. Root[J].Indian J Med Res. 1982 Dec；76 Suppl：99-101.

[5]Sharma I， Gusain D， Dixit VP.Hypolipidaemic and antiatherosclerotic effects of plumbagin in rabbits[J]. Indian J Physiol Pharmacol. 1991 Jan；35(1)：10-4

[6]Olagunju JA,Jobi AA,Oyedapo OO,An investigation into the biochemical basis of the observed hyperglycaemia in rats treated with ethanol root extract of plumbago zeylanica[J].Phytother Res. 1999 Jun;13(4):346-8.

[7]Bopaiah CP, Pradhan N.Central nervous system stimulatory action from the root extract of Plumbago zeylanica in rats[J]..Phytother Res. 2001 Mar；15(2):153-6.

[8] Durga R， Sridhar P， Polasa H.Effects of plumbagin on antibiotic resistance in bacteria[J]..Indian J Med Res. 1990 Jan；91：18-2.

[9]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1994.112.

[10]陳少鋒，黃琳蕓，鐘鳴，等.瑤藥“猛老虎”對(duì)大鼠免疫性肝纖維化影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19(8)：1813.

2016年11月7日收稿

廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科技專項(xiàng)課題：GZBZ14-13

陳少鋒(1970- )，男,漢族，廣西博白人，廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)藥研究院副主任藥師，學(xué)士學(xué)位，主要從事中藥，民族藥藥理研究工作。

R295.1

A

1006-6810(2017)02-0065-02