羅良旭，高素萍,2*，王成聰，雷霆,2，聞金燕，羅雁

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)風(fēng)景園林學(xué)院，成都611130；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園林研究所，成都611130）

紫萼玉簪種子和幼苗對酸雨與鎘復(fù)合污染的生理生態(tài)響應(yīng)

羅良旭1，高素萍1,2*，王成聰1，雷霆1,2，聞金燕1，羅雁1

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)風(fēng)景園林學(xué)院，成都611130；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園林研究所，成都611130）

為了解紫萼玉簪生長初期對酸雨與鎘（Cd）復(fù)合污染的生理生態(tài)響應(yīng)，探究該物種在復(fù)合污染下的自我更新能力，分別以紫萼玉簪種子和幼苗為供試材料，采用2因子5水平完全隨機(jī)試驗(yàn)，研究不同梯度（pH分別為6.5、5.5、4.5、3.5、2.5）模擬酸雨與不同質(zhì)量濃度重金屬Cd2+（0、10、30、50、100 mg/L）復(fù)合污染脅迫下，該植物種子和幼苗的生理生態(tài)指標(biāo)變化。結(jié)果表明：酸雨和Cd復(fù)合污染比單一污染對紫萼玉簪種子和幼苗造成的傷害更大，兩者之間交互作用顯著，表現(xiàn)為協(xié)同作用，且這一作用在高強(qiáng)度復(fù)合污染下表現(xiàn)得尤為突出；紫萼玉簪種子和幼苗對低強(qiáng)度酸雨和低質(zhì)量濃度Cd脅迫有一定的耐受性，其中，低質(zhì)量濃度Cd2+（10 mg/L）處理對種子萌發(fā)表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用。幼苗對Cd脅迫的耐受能力弱于成苗，在本試驗(yàn)條件下，耐受的臨界質(zhì)量濃度值為30 mg/L。過氧化氫酶活性對Cd污染脅迫的敏感性高于超氧化物歧化酶，尤其在與酸雨復(fù)合作用下敏感性增加，表現(xiàn)在重金屬Cd2+質(zhì)量濃度為30 mg/L時(shí)就到達(dá)峰值，這也進(jìn)一步導(dǎo)致其在高質(zhì)量濃度Cd2+污染時(shí)對活性氧的清除能力下降，使活性氧的產(chǎn)生速率超過抗氧化酶系統(tǒng)的清除能力，從而使幼苗完全喪失了自我保護(hù)的能力。綜合各指標(biāo)結(jié)果認(rèn)為，紫萼玉簪種子萌發(fā)和幼苗生長分別在低強(qiáng)度酸雨（pH≥5.5）與低質(zhì)量濃度Cd2+（≤10和30 mg/L）污染脅迫下能順利進(jìn)行自我更新，而高強(qiáng)度復(fù)合污染對種子萌發(fā)和幼苗生長極為不利。該研究結(jié)果對復(fù)合污染地區(qū)的土壤環(huán)境修復(fù)工作具有一定的參考價(jià)值。

鎘；酸雨；復(fù)合污染；生態(tài)脅迫；抗性生理；紫萼玉簪

SummaryThe combined pollution of acid rain and cadmium(Cd)has been an important component of soil interacted with atmospheric pollution in China.The combined pollution posed harmful impact on human beings,and threatened the habitats of other creature,such as the urban garden plants.Therefore,it is important to investigate the effect of complicated pollution on plant growth,extension of plant population and ecosystem balance.The seed germination is the origin of the plant’s life cycle, which is the key link affecting extension of plant population.The stress resistance was bad in the seeding stage,especially poorer resistance to single and combined pollution compared to seedling stage.Therefore,the seeding period became the key toaccomplish extension of plant population under habitat destruction.

Previous studies onHosta ventricosafocused on single pollution of Cd or acid rain;recentlyH.ventricosawas found to have tolerance against combined pollution of Cd and acid rain.Therefore,it is potential for phytoremediation of Cd polluted soil in acid rain area.

In this study,H.ventricosawas selected as test material,to investigate the physico-ecological responses under combined pollution of simulated acid rain and Cd.The tolerance ofH.ventricosawas examined under both seed germination and seedling periods,to provide science evidence for selection of urban plants with strong stress resistance under combined pollution.A completely random scheme of two factors(simulated acid rain and Cd)and five levels was used.The simulated acid rain was set at five pH levels(6.5,5.5,4.5,3.5 and 2.5),and the Cd treatment fluids were set at five different Cd2+concentrations(0,10,30, 50 and 100 mg/L).Both normal and abnormal germination rates were measured in each group.Meanwhile,after the seedling ofH.ventricosagrew up to 10 to 15 cm height,the contents of chlorophyll,malondialdehyde(MDA)and H2O2,the activities of peroxidase(POD),superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT)were measured in each group to investigate the physicoecological responses.

Results showed that the combined pollution of acid rain and Cd had significant higher impact on seed germination and seedling growth ofH.ventricosathan single pollution.The interaction of acid rain and Cd posed obviously synergistic effect, especially in high strength pollution(Cd2+concentration≥30 mg/L).Seed germination and seedling growth ofH.ventricosashowed tolerance under stress of low concentration Cd2+(10 mg/L)and low intensity acid rain,and the seed germination was even promoted by low concentration Cd2+of 10 mg/L.The tolerance of seedling under Cd stress was weaker than mature seedling,and the critical tolerance value was believed to be 30 mg/L.The CAT activity was more sensitive than POD and SOD activites under the Cd stress,especially under the combined pollution of Cd and acid rain,and the peak value of the CAT activity was observed under 30 mg/L Cd2+.Therefore,the ability of CAT to eliminate reactive oxygen species(ROS)decreased under high concentration of Cd stress(≥30 mg/L).The production of H2O2was faster than scavenging by antioxidant enzyme systems,so the seedling would completely lose the self-defensive ability.

In conclusion,the seed germination and seedling growth can complete the self-update under the combined pollution of low intensity acid rain(pH≥5.5)and low concentration Cd2+(≤10 and 30 mg/L),respectively,but high intensity of the combined pollution will significantly affect seed germination and seedling growth,which can provide reference for phytoremediation of combined polluted soil environment.

酸雨和重金屬等污染使城市綠化植物的生境問題正變得日趨嚴(yán)重[1-2]。在自然條件下，多種污染物進(jìn)入土壤后相互作用并最終形成復(fù)合污染[3]。復(fù)合污染不同于單一污染，往往表現(xiàn)出十分復(fù)雜的復(fù)合污染特點(diǎn)，各成分之間可能會產(chǎn)生加和、協(xié)同或拮抗等作用。目前，我國酸雨和重金屬鎘（Cd）的復(fù)合污染已成為土壤與大氣交互污染的重要組成部分，并具有普遍性，不僅給人類帶來危害，也給其他生物賴以生存的環(huán)境形成很大的威脅。酸雨進(jìn)入到土壤會影響土壤中Cd的化學(xué)性質(zhì)及其活性，激活并增加Cd對綠色植物的毒性，二者相互作用，往往會導(dǎo)致城市園林植物的生存條件進(jìn)一步惡化[4]。這種復(fù)雜的生存條件對植物的影響，以及它們能否順利完成自我更新、保持種群的延續(xù)和系統(tǒng)的穩(wěn)定是一個(gè)值得重視的課題。種子萌發(fā)是植物生長周期的起點(diǎn)，是否能順利地正常萌發(fā)直接決定植物種群能否進(jìn)行自我更新；而植物幼苗處于整個(gè)生長周期的初期，對外界環(huán)境的抗逆性較差，對復(fù)合性、突發(fā)性等污染的抵御能力較成苗更弱，因此，幼苗時(shí)期也成為植物在生境遭到破壞時(shí)是否能順利完成自我更新的關(guān)鍵點(diǎn)。紫萼玉簪（Hosta ventricosa）是園林中應(yīng)用較廣的植物。目前，國內(nèi)外對該植物的相關(guān)研究主要集中在鉛（Pb）脅迫方面[5]，而對其在模擬酸雨及Cd復(fù)合或單一脅迫方面的相關(guān)研究較少。王成聰?shù)萚6]對該植物的前期研究發(fā)現(xiàn)，無論是酸雨和Cd的單一污染還是復(fù)合污染，紫萼玉簪成苗都表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐受性，因此，該植物成苗可作為酸雨區(qū)土壤Cd污染背景下修復(fù)植物的選擇。但該植物種群在自我更新過程中非常關(guān)鍵的種子萌發(fā)和幼苗階段是否同樣具有耐受性尚未見報(bào)道。為此，本試驗(yàn)采用人工模擬酸雨與Cd復(fù)合污染對紫萼玉簪種子萌發(fā)和幼苗生長2個(gè)階段進(jìn)行處理，研究該植物在復(fù)合污染下的生理生態(tài)響應(yīng)，以期為城市綠化選擇既能抗酸雨和重金屬復(fù)合污染又能在污染環(huán)境下完成自我更新的植被提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

紫萼玉簪（Hosta ventricosa）種子采自四川農(nóng)業(yè)大學(xué)成都校區(qū)苗圃基地，經(jīng)除雜、去皮和篩選后，室外風(fēng)干，儲藏待用。幼苗是種子播種后生長的當(dāng)年生苗，苗木生長健康，長勢一致，高約10～15 cm。

1.2 模擬酸雨溶液配制

根據(jù)成都市溫江區(qū)氣象局提供的氣象觀測資料，參考成都市近年來降水的主要離子組成及濃度，參照王成聰?shù)萚6]的方法配制本試驗(yàn)研究所需溶液（表1）。

表1 模擬酸雨溶液中各主要離子組成及其濃度Table 1 Main components and ion concentrations of the simulated acid rainμmol/L

1.3 外源Cd溶液配制

根據(jù)國家土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及四川盆地Cd污染情況，設(shè)置5個(gè)Cd質(zhì)量濃度梯度，分別為0、10、30、50、100 mg/L（以純Cd2+計(jì)）。具體配制參照王成聰?shù)萚6]的方法。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 種子萌發(fā)試驗(yàn)設(shè)計(jì)

取均勻一致的紫萼玉簪種子，去黑皮，用0.5%KMnO4溶液浸泡0.5 h，消毒備用。采用2因子5水平完全隨機(jī)方案（表2），設(shè)置模擬酸雨和Cd處理2個(gè)因子，分別為5個(gè)水平，共25個(gè)處理組合，每個(gè)處理重復(fù)3次。模擬酸雨處理液pH值分別為6.5、5.5、4.5、3.5、2.5，表2中分別對應(yīng)代號為b1、b2、b3、b4、b5；Cd處理質(zhì)量濃度梯度為0、10、30、50、100 mg/L（以純Cd2+計(jì)），表2中分別對應(yīng)代號為a1、a2、a3、a4、a5。用處理液分別浸種24 h，各取30粒種子均勻放入培養(yǎng)皿中，定期更換相應(yīng)濃度的復(fù)合處理液（每皿等量），以保持種子的濕潤狀態(tài)。光照培養(yǎng)箱溫度設(shè)置為25℃，光照條件為4 000 lx。紫萼玉簪種子10 d左右即萌發(fā)結(jié)束，可選擇連續(xù)3 d發(fā)芽率不再變化時(shí)進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測定。

發(fā)芽率=（正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)）× 100%；

異狀發(fā)芽率=（發(fā)芽異常種子數(shù)/供試種子數(shù)）× 100%。

表2 Cd和模擬酸雨復(fù)合處理組合設(shè)計(jì)Table 2 Design of combination treatment of Cd and simulated acid rain

1.4.2 幼苗生理試驗(yàn)設(shè)計(jì)

同樣采用2因子5水平完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)（表2）。本階段在種子萌發(fā)試驗(yàn)濾紙法的基礎(chǔ)上加以改進(jìn)，克服濾紙法的缺點(diǎn)與不足，以增進(jìn)試驗(yàn)的可控性?？紤]到本階段試驗(yàn)周期相對較長，將種子萌發(fā)著床的基質(zhì)改為保水性更好的脫脂棉，將播種器皿更換成容量為1 L的燒杯（每個(gè)燒杯內(nèi)均勻放置10粒種子），更換處理液的周期延長至每周1次，從而可大大降低由于頻繁更換處理液導(dǎo)致的Cd2+濃度疊加效應(yīng)及種子污染情況的發(fā)生，以保證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

待紫萼玉簪幼苗長高至10～15 cm時(shí)，各處理間幼苗的形態(tài)特征差異明顯，生物量也已足夠進(jìn)行試驗(yàn)指標(biāo)的測定，同時(shí)，模擬酸雨與Cd復(fù)合污染的傷害在形態(tài)學(xué)上也表現(xiàn)出十分明顯的差異，因而，選擇在此時(shí)進(jìn)行幼苗相關(guān)生理指標(biāo)的測定：葉綠素含量采用分光光度法，用80%丙酮浸提[7]；丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量參照李合生[7]的方法測定；H2O2含量參照PATTERSON等[8]的方法測定；過氧化物酶（peroxidase,POD）活性測定采用愈創(chuàng)木酚法[7,9]；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性測定采用氮藍(lán)四唑光還原法[10]；過氧化氫酶（catalase,CAT）活性測定采用紫外分光光度法[10]。

1.4.3 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用Excel 2016制作圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 在復(fù)合污染環(huán)境中紫萼玉簪種子的萌發(fā)情況

2.1.1 對種子發(fā)芽率的影響

種子發(fā)芽率可以定量體現(xiàn)種子的萌發(fā)能力。由表3可以看出，模擬酸雨和Cd污染對紫萼玉簪種子萌發(fā)產(chǎn)生了很大的影響。

在單一的酸雨或Cd處理下，隨著pH值下降或Cd質(zhì)量濃度增加，紫萼玉簪種子萌發(fā)率整體呈下降趨勢。當(dāng)Cd2+在10 mg/L低質(zhì)量濃度條件下時(shí)對種子萌發(fā)表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用：這表明紫萼玉簪種子具有一定的耐Cd污染能力。低強(qiáng)度酸雨（pH＝5.5）對種子萌發(fā)率的影響與對照相比差異不顯著：說明紫萼玉簪種子對酸雨具有一定的耐受力，在低強(qiáng)度酸雨（pH≥5.5）下能順利完成自我更新。

在模擬酸雨和Cd復(fù)合污染條件下，隨著復(fù)合脅迫強(qiáng)度的提高，種子萌發(fā)率整體呈現(xiàn)出下降的態(tài)勢，這一作用在高質(zhì)量濃度重金屬Cd2+與高強(qiáng)度模擬酸雨的復(fù)合處理下表現(xiàn)得尤為突出。在復(fù)合強(qiáng)度較低（Cd2+質(zhì)量濃度≤10 mg/L，pH≥5.5）時(shí)，萌發(fā)率與對照相比差異不顯著：表明種子對低復(fù)合脅迫強(qiáng)度具有一定的耐受性。在中等強(qiáng)度酸雨（pH=4.5）、低質(zhì)量濃度Cd2+（10 mg/L）處理下，復(fù)合與單一處理相比，種子萌發(fā)率降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）：表明兩者間存在交互作用，且表現(xiàn)為協(xié)同作用。在Cd2+質(zhì)量濃度≥30 mg/L脅迫下，與對照相比，隨著酸雨強(qiáng)度增大，種子萌發(fā)率顯著降低直至為0：表明在此質(zhì)量濃度Cd2+脅迫下，兩者的復(fù)合作用仍表現(xiàn)為協(xié)同作用，加劇了對紫萼玉簪種子的傷害。

表3 復(fù)合污染對紫萼玉簪種子發(fā)芽率的影響Table 3 Effects of combined pollution on the seed germination ofHosta ventricosa%

2.1.2 對種子異狀發(fā)芽率的影響

種子在受到外界環(huán)境干擾時(shí)，常常會引起發(fā)芽異常。通過測定種子的異狀發(fā)芽率，可以了解在逆境下種子萌發(fā)受到的傷害強(qiáng)度。如表4所示，pH≥ 5.5時(shí)，種子異狀發(fā)芽率為0，表明紫萼玉簪種子具有一定的耐酸雨能力；但隨著pH值繼續(xù)下降，種子異狀發(fā)芽率明顯增大，與對照（pH=6.5）相比差異顯著，說明高強(qiáng)度酸雨對種子的傷害程度較大。在單一Cd處理下，種子異狀發(fā)芽率在Cd2+質(zhì)量濃度為10 mg/L時(shí)為0，表明紫萼玉簪種子對低質(zhì)量濃度重金屬具有一定的耐受能力；隨著Cd2+脅迫質(zhì)量濃度的上升，種子異狀發(fā)芽率明顯增大，表明高質(zhì)量濃度Cd2+可以毒害紫萼玉簪種子，使其發(fā)育成為不健全的芽。在高強(qiáng)度的復(fù)合脅迫下，紫萼玉簪種子異狀發(fā)芽率較低，其表面效應(yīng)并不代表脅迫傷害程度的大小，這與復(fù)合處理下紫萼玉簪種子萌發(fā)數(shù)較低有關(guān)。

表4 復(fù)合污染對紫萼玉簪種子異狀發(fā)芽率的影響Table 4 Effects of combined pollution on the abnormal seed germination rate ofHosta ventricosa%

2.2 紫萼玉簪在復(fù)合污染環(huán)境中幼苗的生理變化

2.2.1 對幼苗葉綠素含量的影響

由表5可知：在單一模擬酸雨處理下，隨著pH值的下降，紫萼玉簪幼苗葉片中的葉綠素含量變化整體呈十分明顯的下降趨勢，與對照差異顯著。在單一Cd處理下，與對照（Cd2+質(zhì)量濃度為0 mg/L）相比，當(dāng)Cd2+質(zhì)量濃度≥30 mg/L時(shí)，紫萼玉簪葉片中的葉綠素含量顯著下降。在復(fù)合處理下，Cd2+質(zhì)量濃度為10 mg/L時(shí)，各酸雨脅迫與對照相比差異不顯著；當(dāng)Cd2+質(zhì)量濃度≥30 mg/L時(shí)，與對照相比，隨著酸雨強(qiáng)度的增大，葉綠素含量顯著降低，至高酸度（pH＝2.5）和高Cd2+質(zhì)量濃度（50～100 mg/L）時(shí)含量為0，表明兩者間存在著交互作用，且表現(xiàn)為協(xié)同作用。

表5 復(fù)合污染對紫萼玉簪葉片葉綠素含量的影響Table 5 Effects of combined pollution on the leaf chlorophyll content ofHosta ventricosamg/g

2.2.2 對幼苗葉片質(zhì)膜過氧化的影響

圖1 模擬酸雨與Cd復(fù)合污染對紫萼玉簪幼苗葉片MDA含量的影響Fig.1 Effects of combined pollution of simulated acid rain and Cd on the MDA content in leaves ofHosta ventricosaseedlings

由圖1、2可知，隨著酸雨pH值的下降，紫萼玉簪幼苗葉片中的MDA含量和H2O2產(chǎn)生速率整體呈上升趨勢，兩者與pH值呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。與對照相比，在單一Cd處理下，當(dāng)Cd2+質(zhì)量濃度≤10 mg/L時(shí)，MDA含量和H2O2產(chǎn)生速率的變化趨勢均不明顯；而當(dāng)Cd2+質(zhì)量濃度≥30 mg/L時(shí)，兩者均隨Cd脅迫強(qiáng)度增強(qiáng)而明顯增大，與對照差異顯著。在復(fù)合處理下，酸雨和Cd之間交互作用顯著，且表現(xiàn)為協(xié)同作用。結(jié)合葉綠素含量變化，可初步認(rèn)為幼苗順利完成自我更新的臨界值為酸雨pH=5.5和ρ(Cd2+)=30 mg/L。

圖2 模擬酸雨與Cd復(fù)合污染對紫萼玉簪幼苗葉片H2O2含量的影響Fig.2 Effects of combined pollution of simulated acid rain and Cd on the H2O2content in leaves ofHosta ventricosaseedlings

2.2.3 對幼苗抗氧化酶活性的影響

由圖3A可知，隨著酸雨和Cd的單一處理強(qiáng)度的增加，SOD活性持續(xù)增強(qiáng)。單一酸雨處理時(shí)，隨著pH值的下降，葉片中的SOD活性不斷增強(qiáng)，當(dāng)pH≤3.5時(shí)，SOD活性才開始明顯升高，與對照（pH=6.5）相比，差異達(dá)到顯著水平。在單一Cd處理下，隨著Cd脅迫強(qiáng)度的持續(xù)增大，SOD活性呈現(xiàn)出持續(xù)增大的趨勢，在Cd2+質(zhì)量濃度為100 mg/L時(shí)SOD活性達(dá)到最大值。復(fù)合污染與單一處理趨勢相似，隨著復(fù)合強(qiáng)度的增加，SOD活性持續(xù)增加，在中低強(qiáng)度酸雨（pH≥4.5）單一處理時(shí)，與對照（pH＝6.5）相比差異不顯著，而與Cd（≤30 mg/ L）復(fù)合后，SOD活性降低，與對照相比差異顯著，這說明中低強(qiáng)度酸雨與Cd污染[pH≥4.5，ρ(Cd2+)≤30 mg/L]對SOD活性的交互作用表現(xiàn)為拮抗作用；而高強(qiáng)度酸雨與高質(zhì)量濃度Cd復(fù)合[pH≤3.5，ρ(Cd2+)≥50 mg/L]的交互作用則更多地表現(xiàn)為協(xié)同和加和作用。

由圖3B可知：單一酸雨處理時(shí)，POD活性變化趨勢與SOD相似；單一Cd處理時(shí)，隨著Cd脅迫強(qiáng)度增加，POD活性提高，在Cd2+質(zhì)量濃度為50 mg/L處出現(xiàn)峰值，之后逐漸下降；隨著復(fù)合污染強(qiáng)度的增加，POD活性先增加后減少，復(fù)合脅迫對POD活性的交互作用表現(xiàn)為協(xié)同和加和作用。

由圖3C可知：單一酸雨處理時(shí)，CAT活性變化趨勢與SOD、POD一致，不同的是，當(dāng)pH=4.5時(shí)，CAT活性與對照（pH＝6.5）相比差異顯著，這說明CAT與SOD、POD相比，對酸雨脅迫的敏感性更高；單一Cd處理時(shí)，CAT活性變化趨勢與POD一致，不同的是，CAT在Cd2+質(zhì)量濃度為30 mg/L處出現(xiàn)峰值。這進(jìn)一步說明，CAT無論對酸雨還是重金屬Cd污染脅迫都更為敏感。在復(fù)合污染條件下，復(fù)合脅迫對CAT活性的交互作用也表現(xiàn)為協(xié)同作用和加和作用，與POD相似。

值得注意的是，在酸雨pH=2.5時(shí)，各處理組合的SOD活性隨著Cd脅迫強(qiáng)度增大而顯著增大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他處理組合的SOD活性，表現(xiàn)出明顯的爆發(fā)式增長現(xiàn)象，這對緩解紫萼玉簪受到的脅迫起著積極作用，但此時(shí)POD和CAT活性呈下降趨勢，說明抗氧化酶系統(tǒng)的平衡遭到巨大破壞，細(xì)胞受傷害嚴(yán)重。這一結(jié)果與MDA和H2O2含量變化相印證，進(jìn)一步說明高強(qiáng)度酸雨與重金屬Cd的復(fù)合污染脅迫雖然刺激了保護(hù)酶的活性，但因此時(shí)清除活性氧的酶功能受限，不利于發(fā)揮抗氧化酶系統(tǒng)的功能，故導(dǎo)致植物幼苗受到嚴(yán)重傷害。

3 討論

3.1 復(fù)合污染對紫萼玉簪種子萌發(fā)的影響

種子萌發(fā)是植物自我更新的起始，這一時(shí)期種子非常脆弱，遭受酸雨脅迫時(shí)，其細(xì)胞代謝途徑被擾亂，內(nèi)部結(jié)構(gòu)受到破壞，種子胚和幼芽正常生長也受到干擾[11]。通過對種子在逆境脅迫下的萌發(fā)情況研究，可以較為直觀地發(fā)現(xiàn)逆境脅迫對植物的損害情況[12]。本試驗(yàn)表明，低強(qiáng)度模擬酸雨（pH≥5.5）對紫萼玉簪種子發(fā)芽率、異狀發(fā)芽率的影響不大，而中等強(qiáng)度的模擬酸雨（pH≤4.5）則嚴(yán)重抑制了紫萼玉簪種子萌發(fā)，導(dǎo)致種子發(fā)芽率降低和異狀發(fā)芽率升高，這一結(jié)果進(jìn)一步證明了酸雨對種子萌發(fā)的危害，同時(shí)也說明植物種子對酸雨脅迫具有一定的耐受性，但這種忍受有一定的限度。此外，種子萌發(fā)也容易遭受土壤重金屬的傷害[13]，無毒的重金屬Cd變?yōu)橛坞x態(tài)Cd2+，與其他物質(zhì)化合后再被植物吸收，就會發(fā)揮出極大的毒性，并可富集于植物體內(nèi)，帶來持續(xù)傷害。PATRA等[14]的研究結(jié)果表明，低濃度Cd會對植物表現(xiàn)出正面的“刺激作用”。這一結(jié)論在本試驗(yàn)中也得到證實(shí)，可能是因?yàn)橛酌缟L需要少量的Cd。曹德菊等[15]研究發(fā)現(xiàn)，低濃度Cd可能促進(jìn)了植物細(xì)胞分裂，從而對其生長起到了一定的促進(jìn)作用。而高濃度Cd卻能嚴(yán)重抑制紫萼玉簪種子萌發(fā)，表明高濃度的重金屬會對種子產(chǎn)生毒害作用，還可能會促使種子進(jìn)入休眠狀態(tài)，與崔大練等[16]的研究成果一致。當(dāng)酸雨與Cd形成復(fù)合污染后，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，低質(zhì)量濃度Cd2+（10 mg/L）與中低強(qiáng)度酸雨（pH≥4.5），以及高質(zhì)量濃度Cd2+（≥30 mg/L）與所有模擬酸雨強(qiáng)度間存在明顯的交互作用。通過對各復(fù)合處理分析發(fā)現(xiàn)：復(fù)合污染脅迫對種子萌發(fā)的影響并非是單一污染脅迫結(jié)果的簡單加和，更多地表現(xiàn)為協(xié)同作用；隨著脅迫強(qiáng)度的增加，這種作用尤為明顯，加劇了對種子的毒害作用。這可能是因?yàn)樗嵊旮淖兞伺囵B(yǎng)溶液的pH值，使得溶液中的重金屬離子有效性增強(qiáng)，從而使植物對重金屬離子的吸收作用增強(qiáng)[17]。

圖3 模擬酸雨與Cd復(fù)合污染對紫萼玉簪幼苗葉片抗氧化酶活性的影響Fig.3 Effects of combined pollution of simulated acid rain and Cd on the activities of antioxidant enzymes in leaves ofHosta ventricosaseedlings

3.2 復(fù)合污染對紫萼玉簪幼苗生理指標(biāo)的影響

幼苗期是植物對外界環(huán)境因子最敏感的生長階段之一[18]，也是植物自我更新的關(guān)鍵點(diǎn)。為此，本研究通過測量在脅迫下幼苗生長的各項(xiàng)生理指標(biāo)，可靈敏地反映出復(fù)合脅迫對植株幼苗本身的傷害，提前預(yù)知幼苗的自我更新能力。

葉綠素是參與光合作用的重要色素[19]，其含量往往決定著植物光合作用有機(jī)質(zhì)的生產(chǎn)量和累積量[20]。當(dāng)植物處于酸雨逆境脅迫下時(shí)，地上部分便會直接遭受到酸雨的毒害作用，因?yàn)樗嵊曛写嬖诘拇罅康腍+直接接觸到葉片表面的角質(zhì)層，與葉片內(nèi)部的陽離子發(fā)生交換反應(yīng)，最終嚴(yán)重破壞葉片組織與細(xì)胞結(jié)構(gòu)[21]。而幼嫩的紫萼玉簪幼苗葉片由于代謝旺盛、角質(zhì)層較薄、保衛(wèi)組織發(fā)育不完全等，相較于成熟葉片會遭受到更大的傷害[22]。低強(qiáng)度酸雨（pH=5.5）即可對紫萼玉簪幼苗葉片葉綠素含量造成嚴(yán)重傷害，使其含量大大降低，影響幼苗生長，從而影響其自我更新能力。Cd能破壞植物葉綠體的結(jié)構(gòu)，降低光合酶活性以及葉綠素的合成速率，導(dǎo)致葉綠素總量下降，光合作用強(qiáng)度下降[23]。低質(zhì)量濃度的Cd2+（10 mg/L）對紫萼玉簪幼苗葉綠素含量未產(chǎn)生顯著的抑制作用，當(dāng)Cd2+質(zhì)量濃度≥30 mg/L，葉綠素含量才開始顯著降低。由此可見，紫萼玉簪幼苗對酸雨的生理響應(yīng)敏感，對Cd的耐受力更強(qiáng)，在本試驗(yàn)條件下，其對Cd耐受的臨界質(zhì)量濃度值為30 mg/L。

SOD、POD和CAT是植物體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)的重要組成酶類，三者協(xié)同使得植物體內(nèi)的活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量維持在較低水平，從而防止逆境脅迫對植物造成的ROS傷害[24-25]。ROS的產(chǎn)生與抗氧化酶的清除維持著動態(tài)平衡。SOD是植物防御機(jī)制的第一道防線[26]，能將轉(zhuǎn)化為H2O2，防止其對細(xì)胞造成傷害；POD和CAT緊隨其后，將SOD生成的H2O2轉(zhuǎn)化為無害的水[27]，使其維持在一個(gè)較低的、對細(xì)胞無害的濃度。酸雨和Cd脅迫可以改變?nèi)咴谧陷嘤耵⒂酌缛~片中的活性。從3種酶活性峰值可以看出，CAT對復(fù)合污染的敏感性明顯高于POD，而POD對復(fù)合污染的敏感性明顯高于SOD。在酸雨pH=2.5的各處理組合中，SOD活性呈現(xiàn)出持續(xù)增大的趨勢，并且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他處理組合：表明高強(qiáng)度的酸雨能夠大大激發(fā)SOD的潛在活性，從而有效地清除紫萼玉簪體內(nèi)過剩的ROS，減少其對植物組織的損傷。這一結(jié)果與H2O2含量的提高相互印證。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，紫萼玉簪幼苗在酸雨與Cd復(fù)合污染強(qiáng)度較小時(shí)，其體內(nèi)產(chǎn)生的ROS會誘導(dǎo)SOD、POD以及CAT活性上升，從而減少ROS含量并防止逆境脅迫傷害[25,28]。這是因?yàn)镾OD產(chǎn)生的H2O2刺激了POD和CAT的合成。當(dāng)脅迫強(qiáng)度持續(xù)增大到超過植物的耐受限度時(shí)，紫萼玉簪幼苗體內(nèi)ROS的產(chǎn)生速率超過了抗氧化酶系統(tǒng)的清除能力，對植物體內(nèi)多種膜系統(tǒng)和酶系統(tǒng)造成破壞，POD和CAT活性開始呈現(xiàn)出下降趨勢。這一結(jié)果與段文芳等[29]的研究結(jié)果一致。

植物遭受傷害和脅迫時(shí)，首先作用于細(xì)胞膜，產(chǎn)生活性氧，損傷細(xì)胞膜，導(dǎo)致質(zhì)膜過氧化[6,30]。其中，H2O2不僅會對植物組織造成傷害，還會產(chǎn)生氧化能力極強(qiáng)的·OH和，進(jìn)一步對細(xì)胞造成傷害。本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著復(fù)合污染強(qiáng)度的增加，紫萼玉簪幼苗的H2O2含量提高，說明高強(qiáng)度復(fù)合污染加劇了植物體內(nèi)的活性氧含量，植物細(xì)胞傷害嚴(yán)重。H2O2含量增加這一結(jié)果與SOD活性爆發(fā)性增長有著密切的關(guān)系，由于POD和CAT活性的喪失，無法將H2O2轉(zhuǎn)化為無害物質(zhì)，而是轉(zhuǎn)化為·OH和，最終形成質(zhì)膜過氧化的最終產(chǎn)物MDA。MDA是損傷細(xì)胞膜的活性物質(zhì)，具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，因此，MDA含量可作為植物抗逆性的一個(gè)生理指標(biāo)[30-31]。高強(qiáng)度酸雨（pH≤3.5）促進(jìn)紫萼玉簪細(xì)胞質(zhì)膜過氧化反應(yīng)，使MDA含量增加。這與本研究中H2O2含量變化相印證。在模擬酸雨和Cd脅迫下，雖然抗氧化酶系統(tǒng)被激活，在Cd達(dá)到一定強(qiáng)度后，紫萼玉簪幼苗體內(nèi)抗氧化酶達(dá)到峰值，SOD出現(xiàn)爆發(fā)性增長，在一定程度上可以緩解脅迫傷害，但此時(shí)細(xì)胞膜仍然遭受到了巨大傷害，POD和CAT活性降低，無法清除體內(nèi)大量的H2O2，因而紫萼玉簪自我保護(hù)能力被大大削弱。隨脅迫強(qiáng)度的增大表現(xiàn)為電導(dǎo)率的持續(xù)增大[32]，這也進(jìn)一步說明ROS的產(chǎn)生速率超過了抗氧化酶系統(tǒng)的清除能力，幼苗完全喪失了自我保護(hù)的能力。

4 結(jié)論

4.1 酸雨和Cd復(fù)合污染比單一污染對紫萼玉簪種子和幼苗造成的傷害更大，二者間存在明顯的交互作用，更多地表現(xiàn)為協(xié)同作用，且高強(qiáng)度復(fù)合污染對紫萼玉簪的影響更大。

4.2 紫萼玉簪種子和幼苗對低強(qiáng)度酸雨脅迫有一定的耐受性，臨界值為pH=5.5，弱于成苗（pH=3.5）[6]。

4.3 紫萼玉簪種子和幼苗對低質(zhì)量濃度Cd2+脅迫也有一定的耐受性，種子耐受的臨界值為10 mg/L，弱于幼苗的耐受臨界值（30 mg/L）。

總之，無論是復(fù)合污染還是單一污染，紫萼玉簪種子和幼苗都表現(xiàn)出一定的耐受性，但這種耐受性具有一定的閾值。紫萼玉簪種子和幼苗分別在酸雨（pH≥5.5）和Cd2+（≤10和30 mg/L）污染脅迫下能順利進(jìn)行自我更新，保證了該植物完成其生活史，為該植物種群在低強(qiáng)度復(fù)合污染下的繁衍提供了可能。

[1]齊澤民,王玄德,宋光煜.酸雨對植物影響的研究進(jìn)展.世界科技研究與發(fā)展,2004,26(2):36-41. QI Z M,WANG X D,SONG G Y.Research progress of the effect of acid rain on plant.Journal of World Science and Technology Research and Development,2004,26(2):36-41.(in Chinese with English abstract)

[2]徐旭,孫振元,潘遠(yuǎn)智,等.園林植物對重金屬脅迫的響應(yīng)研究現(xiàn)狀.世界林業(yè)研究,2007,12(6):36-38. XU X,SUN Z Y,PAN Y Z,et al.Review on responses of garden plants to heavy metal stress.Journal of World Forestry Research, 2007,12(6):36-38.(in Chinese with English abstract)

[3]周東美,王慎強(qiáng),陳懷滿,等.土壤中有機(jī)污染物-重金屬復(fù)合污染的交互作用.土壤與環(huán)境,2000,9(2):143-145. ZHOU D M,WANG S Q,CHEN H M,et al.Interaction of organic pollutantsand heavy metalin soil.JournalofSoiland Environmental Sciences,2000,9(2):143-145.(in Chinese with English abstract)

[4]何翠屏.環(huán)境中重金屬污染及其對植物生長發(fā)育的影響.青海草業(yè),2004,13(2):26-29. HE C P.Influenced on plant growth and development by heavy metals in environment.Qinghai Prataculture,2004,13(2):26-29. (in Chinese with English abstract)

[5]劉興樂,羅敬東,唐雪輝.紫萼玉簪的繁殖及應(yīng)用.南方農(nóng)業(yè)(園林花卉版),2008,2(8):76-77. LIU X L,LUO J D,TANG X H.Breeding and application ofHosta ventricosa.Journal of South China Agriculture,2008,2(8): 76-77.(in Chinese)

[6]王成聰,高素萍,黃麗,等.模擬酸雨與Cd對紫萼膜脂過氧化及形態(tài)特征的影響.草業(yè)學(xué)報(bào),2014,23(6):336-341. WANG C C,GAO S P,HUANG L,et al.Effects of simulated acid rain and Cd on the membrane lipid peroxidation and morphological characteristics ofHosta ventricosa.Acta Prataculturae Sinica,2014,23(6):336-341.(in Chinese with English abstract)

[7]李合生.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù).北京:高等教育出版社,2000:134-261. LI H S.Principles and Techniques of Plant Physiology and Biochemistry Experiment.Beijing:Higher Education Press,2000: 134-261.(in Chinese)

[8]PATTERSON B D,MACRAE E A,FERGUSON I B.Estimation of hydrogen peroxide in plant extracts using titanium（Ⅳ）.Analytical Biochemistry,1984,139:487-492.

[9]熊慶娥.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程.成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社, 2003:72-78. XIONG Q E.Plant Physiology Experiment Course.Chengdu: Sichuan Science and Technology Press,2003:72-78.(in Chinese)

[10]郝再彬,蒼晶,徐仲.植物生理實(shí)驗(yàn).哈爾濱:哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社,2004:111-114. HAO Z B,CANG J,XU Z.Plant Physiology Experiment.Harbin: Harbin Institute of Technology Press,2004:111-114.(in Chinese)

[11]陶麗華,楊國棟,周青.不同水稻品種種子萌發(fā)對酸雨脅迫的響應(yīng).農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2006,25(3):566-569. TAO L H,YANG G D,ZHOU Q.Responses of seed germination of different varieties of rice to the acid rain stress.Journal of Agricultural Environment Science,2006,25(3):566-569.(in Chinese with English abstract)

[12]張霞,李妍.鉛脅迫對補(bǔ)血草種子萌發(fā)和幼苗初期生長及膜透性的影響.德州學(xué)院學(xué)報(bào),2007,23(2):23-25. ZHANG X,LI Y.Effects of lead on the germination and growth ofLimonium sinense.Journal of Dezhou University,2007,23(2):23-25.(in Chinese with English abstract)

[13]楊穎麗,王文瑞,尤佳,等.Cd2+脅迫對小麥種子萌發(fā)、幼苗生長及生理生化特性的影響.西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2012,48(3):88-94. YANG Y L,WANG W R,YOU J,et al.Effects of cadmium stress on the germination,growth of seedling and physiological and biochemical characters of wheat.Journal of Northwest Normal University(Natural Science),2012,48(3):88-94.(in Chinese with English abstract)

[14]PATRA J,LENKA M,PANDA B B.Tolerance and CO-tolerance of the grassChloris barbataSw.to mercury,cadmium and zinc.New Phytologist,1994,128:165-171．

[15]曹德菊,湯斌.鉛,鎘及其復(fù)合污染對蠶豆根尖細(xì)胞的誘變效應(yīng).激光生物學(xué)報(bào),2004,13(4):302-305. CAO D J,TANG B.Effect of plumbum,cadmium and the combined pollution actate on root tip cell ofVicia faba.Acta Laser Biology Sinica,2004,13(4):302-305.(in Chinese with English abstract)

[16]崔大練,馬玉心,俞興偉.Cd2+對海濱木槿種子萌發(fā)及根伸長抑制效應(yīng)的研究.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(8):4591-4593. CUI D L,MA Y X,YU X W.Inhibition effect of Cd2+on the seed germination and root elongation ofHibiscus hamabosiebet Zucc.Journal of Anhui Agricultural Sciences,2011,39(8):4591-4593. (in Chinese with English abstract)

[17]汪雅各,盛沛麟,袁大偉.模擬酸雨對土壤金屬離子的淋溶和植物有效性的影響.環(huán)境科學(xué),1988,9(2):22-26. WANG Y G,SHENG P L,YUAN D W.Effects of simulated acid rain on the leaching and plant availability of metal ions in soil.Environmental Science,1988,9(2):22-26.(in Chinese)

[18]馬文麗,金小弟,王轉(zhuǎn)花.鎘處理對烏麥種子萌發(fā)幼苗生長及抗氧化酶的影響.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2004,23(1):55-59. MA W L,JIN X D,WANG Z H.Effects of cadmium on seed germination,growth of seedling and antioxidant enzymes of rye and wheat.Journal of Agro-Environment Science,2004,23(1):55-59.(in Chinese with English abstract)

[19]儲玲,劉登義,王友保,等.銅污染對三葉草幼苗生長及活性氧代謝影響的研究.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2004,15(1):119-122. CHU L,LIU D Y,WANG Y B,et al.Effect of copper pollution on seedling growth and activate oxygen metabolism ofTrifolium pretense.Chinese Journal of Applied Ecology,2004,15(1):119-122.(in Chinese with English abstract)

[20]秦天才,吳玉樹,黃巧云,等.鎘鉛單一和復(fù)合污染對小白菜抗壞血酸含量的影響.生態(tài)學(xué)雜志,1997,16(3):31-34. QIN T C,WU Y S,HUANG Q Y,et al.Effect of cadmium,lead single and combination pollution on the contents of ascorbic acid inBrassica chinensisL.Chinese Journal of Ecology,1997,16(3): 31-34.(in Chinese with English abstract)

[21]單運(yùn)鋒,馮宗煒,陳楚瑩.模擬酸雨對七種森林樹種生物量的影響.生態(tài)學(xué)報(bào),1989,9(3):274-276. SHAN Y F,FENG Z W,CHEN C Y.The effects of simulated acid rain on biomass of seven species of forest plants.Acta Ecologica Sinica,1989,9(3):274-276.(in Chinese with English abstract)

[22]趙棟,潘遠(yuǎn)智,鄧仕槐,等.模擬酸雨對茶梅生理生態(tài)特性的影響.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,43(15):3191-3198. ZHAO D,PAN Y Z,DENG S H,et al.Effects of simulated acid rain on physiological and ecological characteristics ofCamellia sasanqua.Scientia Agricultura Sinica,2010,43(15):3191-3198. (in Chinese with English abstract)

[23]李俊梅,王煥校.鎘脅迫下玉米生理生態(tài)反應(yīng)與抗性差異研究.云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2000,22(4):311-317. LI J M,WANG H X.Eco-physiological responses and resistance to cadmium stress in three varieties of maize.Journal of Yunnan University(Natural Sciences),2000,22(4):311-317.(in Chinese with English abstract)

[24]陳良,隆小華,鄭曉濤,等.鎘脅迫下兩種菊芋幼苗的光合作用特征及鎘吸收轉(zhuǎn)運(yùn)差異的研究.草業(yè)學(xué)報(bào),2011,20(6):60-67. CHEN L,LONG X H,ZHENG X T,et al.Effect on the photosynthetic characteristics of Cd uptake and translocation in seedlings of twoHelianthus tuberosusvarieties.Acta Prataculturae Sinica,2011,20(6):60-67.(in Chinese with English abstract)

[25]湯葉濤,關(guān)麗捷,仇榮亮,等.鎘對超富集植物滇苦菜抗氧化系統(tǒng)的影響.生態(tài)學(xué)報(bào),2010,30(2):324-332. TANG Y T,GUAN L J,QIU R L,et al.Antioxidative defense to cadmium in hyperaccumulatorPicris divaricata V.Acta Ecologica Sinica,2010,30(2):324-332.(in Chinese with English abstract)

[26]杜秀敏,殷文璇,趙彥修,等.植物中活性氧的產(chǎn)生及清除機(jī)制.生物工程學(xué)報(bào),2001,17(2):121-125. DU X M,YIN W X,ZHAO Y X,et al.The production and scavenging of reactive oxygen species in plants.Chinese Journal of Biotechnology,2001,17(2):121-125.(in Chinese with English abstract)

[27]楊淑慎,高俊鳳.活性氧、自由基與植物的衰老.西北植物學(xué)報(bào), 2001,21(2):215-220. YANG S S,GAO J F.Influence of active oxygen and free radicals on plant senescence.Northwest Journal of Botany,2001,21(2): 215-220.(in Chinese with English abstract)

[28]龍?jiān)?劉蕓,鐘章成.酸雨和UV-B對玉米幼苗光合速率和抗氧化酶活性的影響.生態(tài)學(xué)報(bào),2009,29(9):4956-4966. LONG Y,LIU Y,ZHONG Z C.Effects of UV-B irradiation and acid rain on photosynthetic rate and antioxidant enzyme activities of maize seedlings.Acta Ecologica Sinica,2009,29(9):4956-4966.(in Chinese with English abstract)

[29]段文芳,石貴玉,秦麗鳳,等.鎘脅迫對桐花樹光合、蒸騰作用及保護(hù)酶活性的影響.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(4):1355-1356. DUAN W F,SHI G Y,QIN L F,et al.Effects of Cd stress on the physiological indexes inAegiceras corniculatum.Journal of Anhui Agricultural Sciences,2008,36(4):1355-1356.(in Chinese with English abstract)

[30]孫勝,張智,盧敏敏,等.Cd2+脅迫對西瓜幼苗光合生理及活性氧代謝的影響.核農(nóng)學(xué)報(bào),2010,24(2):389-393. SUN S,ZHANG Z,LU M M,et al.Effects of cadmium stress on photosynthesis and active oxygen metabolism in the leaves of small watermelon seedlings.Journal of Nuclear Agricultural Sciences,2010,24(2):389-393.(in Chinese with English abstract)

[31]劉蕓,鐘章成,WERGER M J A,等.α-NAA和UV-B輻射對栝樓幼苗光合色素及保護(hù)酶活性的影響.生態(tài)學(xué)報(bào),2003,23(1): 8-13. LIU Y,ZHONG Z C,WERGER M J A,et al.Effects of α-NAA and UV-B radiation on photosynthetic pigments and activities of protective enzymes inTrichosanthes kirilowiiMaxim leaves.Acta Ecologica Sinica,2003,23(1):8-13.(in Chinese with English abstract)

[32]張治安,王振民,徐克章.Cd脅迫對萌發(fā)大豆種子中活性氧代謝的影響.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2005,24(4):670-673. ZHANG Z A,WANG Z M,XU K Z.Effect of cadmium stress on active oxygen metabolism in germinated soybean seeds.Journal of Agro?Environment Science,2005,24(4):670-673.(in Chinese with English abstract)

Physio-ecological responses of seeds and seedlings of Hosta ventricosa to combined pollution of simulated acid rain and cadmium.

LUO Liangxu1,GAO Suping1,2*,WANG Chengcong1,LEI Ting1,2,WEN Jinyan1,LUO Yan1(1.College of Landscape Architecture, Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China;2.Landscape Research Institute,Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130,China)

cadmium;acid rain;combined pollution;ecological stress;resistant physiology;Hosta ventricosa

S 682.19

A

10.3785/j.issn.1008-9209.2016.05.192

Journal of Zhejiang University(Agric.&Life Sci.),2017,43(2):192-202

四川省教育廳項(xiàng)目“鄉(xiāng)村景觀植物藍(lán)雪花的高效快繁體系建立研究”（JGYQ2016010）；四川省科技計(jì)劃項(xiàng)目“突破性竹類（花卉）育種材料與方法創(chuàng)新”（2016NYZ0038）。

高素萍(http://orcid.org/0000-0002-4609-9988)，E-mail:gao_suping@sicau.edu.cn

（First author）：羅良旭（http://orcid.org/0000-0001-8200-8281），E-mail:liangxuluo@163.com

2016-05-19；接受日期(Accepted)：2016-08-23