趙雪潔，梁楚燕，李 杰，嚴(yán)群超，陳有軍

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006；2.昌吉州絲路弘毅農(nóng)業(yè)科技有限公司，新疆昌吉 831109；3.暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東廣州 510632；4.廣州宏韻醫(yī)藥科技股份有限公司，廣東廣州 510663)

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鷹嘴豆對小鼠的抗氧化作用研究

趙雪潔1，梁楚燕1，李 杰2，嚴(yán)群超3，陳有軍4*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006；2.昌吉州絲路弘毅農(nóng)業(yè)科技有限公司，新疆昌吉 831109；3.暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東廣州 510632；4.廣州宏韻醫(yī)藥科技股份有限公司，廣東廣州 510663)

通過檢測丙二醛(MDA)、蛋白質(zhì)羰基、超氧化物歧化酶(SOD)、還原性谷胱甘肽(GSH)等指標(biāo)含量，探究鷹嘴豆對 D- 半乳糖所致衰老模型小鼠的抗氧化作用。結(jié)果顯示，鷹嘴豆中劑量組小鼠體重增長速度較快，其余各組差異不大；模型組小鼠丙二醛、蛋白質(zhì)羰基含量與空白對照組相比差異顯著(P<0.05)，SOD活力和GSH含量顯著降低(P<0.05)；給藥組小鼠MDA含量下降明顯，與模型組相比差異極顯著(P<0.01)，SOD活力升高，其中鷹嘴豆高、中劑量組差異顯著(P<0.05)，GSH含量雖有升高的趨勢，但無顯著差異(P>0.05)。提示鷹嘴豆對 D-半乳糖所致衰老小鼠有一定的抗氧化作用。

鷹嘴豆；抗氧化；衰老模型

鷹嘴豆(chickpeas)屬于豆科鷹嘴豆屬(CicerarietinumL.)，一年生或多年生草本植物，因形如鷹頭，在種臍附近有詠狀突起而得名，別名桃豆、雞豌豆，是世界上栽培面積較廣的食用豆類品種之一，目前在豆科作物中居第2位。鷹嘴豆富含蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維、維生素及鈣、鎂、鐵等成分[1]，其中蛋白質(zhì)含量達(dá)22.50%，高于燕麥以及核桃，人體必需氨基酸達(dá)7.91%[2]。能夠滿足人體每日足夠的蛋白質(zhì)和必需氨基酸需求。鷹嘴豆富含人體所需要的18種氨基酸及蛋白質(zhì)、膳食纖維、鈣、鉀、鋅等多種微量元素和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，被譽(yù)為“營養(yǎng)之花，豆中之王”，因此，鷹嘴豆及制品已成為一種新型糧谷營養(yǎng)健康食品[3]。鷹嘴豆具有降血脂、降血糖、抗氧化及抗腫瘤等藥理作用[4-11]。但是否具有抗氧化作用目前尚不清楚，本試驗擬探究鷹嘴豆對D-半乳糖所致衰老小鼠體內(nèi)過氧化產(chǎn)物的水平是否具有調(diào)節(jié)作用，研究鷹嘴豆是否具有抗氧化的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 鷹嘴豆粉末，批次：20150624，由廣州宏韻醫(yī)藥科技有限公司提供。

1.1.2 儀器和試劑 移液器，BS110S型分析天平，T1000電子天平，CT14RD型高速冷凍離心機(jī)，1510型Thermo全波長酶標(biāo)儀，4 D-(+)-Galactose；注射用生理鹽水，丙二醛，超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒，蛋白羰基含量測試盒，微量還原型谷胱甘肽(GSH)測試盒。

1.1.3 實驗動物 雌性昆明小鼠，23 g～26 g，購自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心(許可證號：SCXK(粵) 2013-0020)。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物飼養(yǎng)管理 動物飼養(yǎng)在廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，飼養(yǎng)溫度與濕度：20 ℃～25 ℃，40%～70%，采用12 h∶12 h晝夜間斷照明，自由進(jìn)食飲水，飲用水為實驗動物中心制備的蒸餾水。小鼠維持飼料為廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心 SCXK(粵)2013-0002，營養(yǎng)成分含量為粗蛋白18%、粗脂肪4%、粗纖維5%、鈣1.0%～1.8% 、磷 0.6%～1.2%、能量比為粗蛋白21%、粗脂肪11%、碳水化合物68%、總能量3.5 kcal/g。

1.2.2 動物分組及處理 1周后，將小鼠按照體重隨機(jī)分為空白組、衰老模型組、鷹嘴豆高(0.8 g/kg)、中(0.4 g/kg)、低劑量組(0.2 g/kg)，每組各14只。對模型組和鷹嘴豆各劑量組腹腔注射D-半乳糖150 mg/kg制備衰老模型；空白對照組皮下注射等體積的生理鹽水；連續(xù)8周。造模的同時對試驗組灌胃給以不同劑量鷹嘴豆，空白組給予等容量的蒸餾水。試驗結(jié)束后，取血清按試劑盒說明檢測丙二醛、蛋白質(zhì)羰基、超氧化物歧化酶、還原性谷胱甘肽等指標(biāo)含量。

2 結(jié)果

2.1 試驗期間各組小鼠體重的變化

給藥8周后，鷹嘴豆中劑量組小鼠增長速度較快，其余各組差異不大(圖1)。

2.2 SOD、蛋白質(zhì)羰基、SOD、GSH檢測結(jié)果

給藥8周后，取血清檢測丙二醛、蛋白質(zhì)羰基、超氧化物歧化酶、還原性谷胱甘肽等指標(biāo)含量。與空白組比較，模型組小鼠血清MDA、蛋白質(zhì)羰基含量明顯升高(P<0.05)，SOD活力、GSH含量降低(P<0.05)；與模型組相比，給藥組小鼠MDA含量下降明顯，各劑量組均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)，SOD活力升高，其中鷹嘴豆中、高劑量組有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，GSH含量雖有升高的趨勢，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表1～表4)。說明鷹嘴豆具有一定的抗氧化作用。

N.空白組；M.模型組；DL.鷹嘴豆低劑量組；DM.鷹嘴豆中劑量組；DH.鷹嘴豆高劑量組

3 討論

正常機(jī)體擁有一套完整的抗氧化防御體系，包括SOD[12]、CAT[13]和谷胱甘肽過氧化物酶[4]等，從而機(jī)體內(nèi)自由基保持一種動態(tài)平衡。但當(dāng)抗氧化系統(tǒng)遭到破壞時，就會產(chǎn)生過量的MDA等脂質(zhì)過氧化物，從而引起細(xì)胞損傷。SOD是一種超氧化物歧化酶，能催化超氧陰離子產(chǎn)生歧化反應(yīng)，生成過氧化氫(H2O2)。

D-半乳糖致亞急性衰老動物模型最初根據(jù)衰老代謝紊亂學(xué)說為指導(dǎo)研制而成，方法是在一定時間內(nèi)連續(xù)給動物注射大劑量的D-半乳糖，使機(jī)體細(xì)胞內(nèi)半乳糖濃度增高，在醛糖還原酶的催化下還原成半乳糖醇，半乳糖醇不能被細(xì)胞進(jìn)-步代謝而堆積在細(xì)胞內(nèi)，影響細(xì)胞正常滲透壓，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹、功能障礙、代謝紊亂，最終致使衰老發(fā)生[14]。近年來對D-半乳糖致衰老模型的大量研究證實，D-半乳糖在體內(nèi)的堆積不僅引起機(jī)體代謝紊亂，而且還可導(dǎo)致其他如免疫功能低下、過氧化水平增加、學(xué)習(xí)記憶障礙等與人類自然衰老相似的一系列改變。 本試驗通過建立D-半乳糖致衰老模型小鼠研究了鷹嘴豆的抗氧化作用，結(jié)果顯示，造模后動物SOD活力明顯下降，MDA、蛋白質(zhì)羰基含量升高，提示對動物造成氧化損傷；給藥8周后，小鼠氧化損傷指標(biāo)SOD活力、MDA含量等均有改善，表明鷹嘴豆對D-半乳糖所致衰老模型小鼠具有一定的抗氧化作用。

表1 鷹嘴豆對D-半乳糖致衰老模型小鼠MDA含量的影響

注： “**”表示與模型對照組相比差異極顯著(P<0.01)， “##”表示與空白對照組相比差異極顯著(P<0.01)。

Note:"**" indicates extremely significant difference compared with model control group(P<0.01); "##" indicates extremely significant difference compared with negative control group(P<0.01).

表2 鷹嘴豆對D-半乳糖致衰老模型小鼠蛋白質(zhì)羰基含量的影響

注： “#”表示與空白對照組相比差異顯著(P<0.05)。

Note:"#" indicates significant difference compared with negative control group(P<0.05) .

表3 鷹嘴豆對D-半乳糖致衰老模型小鼠SOD含量的影響

注：“*”表示與模型對照組相比差異顯著(P<0.05);“**”表示與模型對照組相比差異極顯著(P<0.01);“##”表示與空白對照組相比差異極顯著(P<0.01)。

Note:"*" indicates significant difference compared with model control group(P<0.05); "**" indicates extremly significant difference compared with negative control group(P<0.05); "##" indicates extremely significant difference compared with negative control group(P<0.01).

表4 鷹嘴豆對D-半乳糖衰致老模型小鼠GSH含量的影響

注： “#”表示與空白對照組相比差異顯著(P<0.05)。

Note:“#”indicates significant difference compared with negative control group(P<0.05).

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Study on Antioxidation Activity of Chickpeas in Aging Mice Induced by D-Galactose

ZHAO Xue-jie1,LIANG Chu-yan1,LI Jie2,YAN Chao-qun3,CHEN You-jun4

(1.GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou，Guangdong，510006，China；2.ChangjiStateDooouAgriculturalScienceandTechnologyCo.,Ltd，Changji，Xinjiang，831109，China；3.SchoolofMedicineJinanUniversity，Guangdong，Guangzhou，510632，China；4.GuangzhouHongyunMedicalScientificandTechnologicalCo.,Ltd，Guangzhou，Guangdong，510663，China)

To explore the antioxidation activity of chickpeas in aging mice induced by D-galactose,the content of MDA,protein carbonyl,SOD and GSH were detected.The results showed that mice in chickpeass middle dose group obtained faster body weight gain than that in other groups; Compared with the negative control group,the serum MDA and protein carbonyl content in mic of model control group were significant increased(P<0.05 ),SOD vitality and GSH content were decreased significantly (P<0.05); Compared with the model control group,MDA content in three doses of chickpeas groups was decreased significantly (P<0.01),SOD activity was increased,with significant difference in chickpeas high and middle dose groups (P<0.05),GSH content had a rising trend,but without significant difference (P>0.05).In total,this study showed that chickpeas has antioxidant effect on D-galactose induced aging mice.

chickpeas; antioxidation; aging mice

2016-04-22

趙雪潔(1991-)，女，安徽阜陽人，碩士研究生，主要從事免疫藥理學(xué)研究。*通訊作者

S853.71

A

1007-5038(2017)05-0073-04