鄧平　張生元　艾桃山　喻運(yùn)珍

摘要：以濃度分別為2.5×10⁶、5×10⁶、10×10⁶、20×10⁶cells/mL的蛋白核小球藻為食物，在溫度分別為25、28、30℃條件下對(duì)萼花臂尾輪蟲進(jìn)行群體累積培養(yǎng)研究。結(jié)果表明，食物濃度對(duì)輪蟲的種群動(dòng)態(tài)、最大種群密度、種群增長(zhǎng)率及非混交卵的日產(chǎn)生量動(dòng)態(tài)、產(chǎn)量均有明顯影響；溫度對(duì)輪蟲的種群動(dòng)態(tài)、最大種群密度及非混交卵的產(chǎn)量、形成效率、最大形成效率均有顯著影響。食物濃度為20×10⁶cells/mL的小球藻投喂輪蟲，在25～30 qC均能達(dá)到較高的種群密度，但25℃培養(yǎng)的輪蟲較28℃和30℃推遲到達(dá)峰值。非混交卵的日產(chǎn)生量與種群密度有相似的變化趨勢(shì)，28℃和30℃培養(yǎng)的輪蟲非混交卵較25℃提前到達(dá)峰值。當(dāng)輪蟲的種群密度還處于增長(zhǎng)階段，非混交卵日生產(chǎn)量已達(dá)峰值。因此在輪蟲的培養(yǎng)過(guò)程中可考慮監(jiān)測(cè)非混交卵的動(dòng)態(tài)變化預(yù)測(cè)輪蟲密度達(dá)到峰值的時(shí)間。

關(guān)鍵詞：萼花臂尾輪蟲；種群；非混交卵；食物濃度；溫度

中圖分類號(hào)：S955.3⁺2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1002—1302（2016）01—0251—03

食物濃度和溫度是影響輪蟲種群動(dòng)態(tài)的2個(gè)重要生態(tài)因子。有關(guān)食物濃度和溫度對(duì)輪蟲種群動(dòng)態(tài)的影響研究已有較多報(bào)道，內(nèi)容涉及溫度和食物濃度對(duì)輪蟲種群增長(zhǎng)率、最大種群密度、懷卵率、休眠卵產(chǎn)量及形成效率等方面的影響。研究表明溫度和食物濃度對(duì)輪蟲的種群增長(zhǎng)及休眠卵形成均有明顯的影響，但不同種類、同種種類的不同品系得出的種群增長(zhǎng)最適溫度和最適食物濃度各不相同。迄今為止，關(guān)于食物濃度和溫度對(duì)輪蟲非混交卵影響方面的研究未見(jiàn)報(bào)道。非混交雌體所產(chǎn)的卵為非混交卵，與輪蟲種群數(shù)量密切相關(guān)。

萼花臂尾輪蟲（Brachionus calyciflorus）是淡水中常見(jiàn)的輪蟲種類，也是淡水輪蟲工廠化培養(yǎng)的首選種類。本研究以萼花臂尾輪蟲為對(duì)象，研究了適宜溫度范圍內(nèi)不同食物濃度對(duì)輪蟲種群及非混交卵的影響，以豐富此方面的內(nèi)容，同時(shí)為該輪蟲的規(guī)?；囵B(yǎng)提供理論參考。

1材料與方法

1.1輪蟲來(lái)源及餌料

萼花臂尾輪蟲于2012年6月采自湖北省武漢市水產(chǎn)科學(xué)研究所旁的水庫(kù)，所采水樣首先用多層紗布濾去其中的枝角類和橈足類等大型浮游動(dòng)物及雜質(zhì)，然后置于解剖鏡下觀察，用微吸管吸出其中的萼花臂尾輪蟲并接種到事先準(zhǔn)備好的輪蟲培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。試驗(yàn)時(shí)先用紗布過(guò)濾，去除在培養(yǎng)輪蟲的過(guò)程中產(chǎn)生的廢棄物和剩余餌料的絮凝，再用300目的篩絹濾取輪蟲，并用蒸餾水沖洗輪蟲數(shù)次。

選用蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidsa）作為培養(yǎng)輪蟲的餌料。藻種購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所。小球藻采用sE培養(yǎng)液在光暗周期12 h-12 h實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)，光照度2 000～3 000 k，培養(yǎng)溫度25℃，充氣培養(yǎng)。每7～10 d轉(zhuǎn)接1次。投喂輪蟲的藻液經(jīng)300目篩絹過(guò)濾，以去除藻液中的絮凝。

1.3計(jì)算方法

輪蟲及其非混交卵的計(jì)數(shù)方法、有關(guān)參數(shù)的定義和計(jì)算方法均與文獻(xiàn)[7]相同。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

不同培養(yǎng)條件下的輪蟲種群數(shù)量及非混交卵日產(chǎn)生量的動(dòng)態(tài)變化采用重復(fù)測(cè)量的方差分析（repeated measure ANO-VA）。對(duì)不同食物濃度、不同溫度條件下的輪蟲種群最大密度、種群增長(zhǎng)率的差異顯著性采用兩因素方差分析進(jìn)行分析。對(duì)非混交卵的產(chǎn)量、形成效率及最大形成效率的差異顯著性也采用兩因素方差分析（two-way ANOVA）進(jìn)行分析（SPSS19.0.P<0.05）。

2結(jié)果與分析

2.1食物濃度和溫度對(duì)輪蟲種群增長(zhǎng)的影響

2.1.1食物濃度和溫度對(duì)輪蟲種群數(shù)量的影響 在各食物濃度及溫度條件下，輪蟲種群的動(dòng)態(tài)變化如圖1所示。重復(fù)測(cè)量的方差分析結(jié)果表明食物濃度和溫度對(duì)輪蟲種群動(dòng)態(tài)有顯著作用（P<0.05）。隨著培養(yǎng)溫度的升高，輪蟲繁殖高峰值出現(xiàn)的時(shí)間也總體上呈現(xiàn)逐漸前移的趨勢(shì)。溫度為28、30℃，食物濃度為20×106 cells/mL，培養(yǎng)4～6 d輪蟲種群的密度培養(yǎng)增長(zhǎng)極顯著（P<0.01），然后又迅速下降。25℃時(shí)，20×106 cells/mL食物濃度下，輪蟲種群密度從培養(yǎng)5 d開始顯著增長(zhǎng)（P<0.05）。

2.1.2食物濃度和溫度對(duì)輪蟲最大種群密度和種群增長(zhǎng)率的影響各條件組合下，輪蟲的最大密度和種群增長(zhǎng)率見(jiàn)表1。兩因素方差分析結(jié)果表明，溫度、食物濃度以及兩者之間的交互作用均對(duì)最大種群密度具有極顯著影響（P<0.01）。種群增長(zhǎng)率的兩因素方差分析結(jié)果顯示，溫度30℃與其他2個(gè)溫度之間的種群增長(zhǎng)率差異極顯著（P<0.01），而25℃和28℃條件下種群增長(zhǎng)率無(wú)明顯差異（P>0.05）；食物濃度為20×10⁶ cells/mL時(shí)輪蟲的種群增長(zhǎng)率遠(yuǎn)高于其他3種食物濃度（P<0.01）；溫度和食物濃度的交互作用對(duì)輪蟲的種群增長(zhǎng)率具有極顯著影響（P<0.01）。

2.2食物濃度和溫度對(duì)輪蟲非混交卵的影響

2.2.1食物濃度和溫度對(duì)輪蟲非混交卵日產(chǎn)生量的影響 各食物濃度及溫度條件下，輪蟲非混交卵日產(chǎn)生量的動(dòng)態(tài)變化如圖2所示。重復(fù)測(cè)量的方差分析結(jié)果表明，食物濃度為20×10⁶ cells/mL的非混交卵形成動(dòng)態(tài)與其他各組差異極顯著（P<0.01），30℃條件下除外。25℃食物濃度為2.5×10⁶ cells/mL輪蟲非混交卵增長(zhǎng)不明顯，其他3個(gè)食物濃度培養(yǎng)4 d非混交卵日產(chǎn)生量開始增加，20×10⁶cells/mL食物濃度的非混交卵日產(chǎn)生量在培養(yǎng)6 d時(shí)達(dá)到峰值105 ind/mL。28℃條件下各食物濃度均在培養(yǎng)3 d非混交卵日產(chǎn)生量開始增加，20×10⁶ cells/mL食物濃度的非混交卵日產(chǎn)生量在培養(yǎng)4 d達(dá)到峰值131 ind/mL。30℃條件下，20×10⁶ cells/mL食物濃度的非混交卵日產(chǎn)生量在培養(yǎng)4 d顯著增長(zhǎng)，培養(yǎng)5 d達(dá)到峰值90 ind/mL，其他3個(gè)食物濃度非混交卵日產(chǎn)生量增長(zhǎng)不明顯。

2.2.2食物濃度和溫度對(duì)輪蟲非混交卵產(chǎn)量和形成效率的影響 在輪蟲非混交卵的第1個(gè)形成周期內(nèi)，各條件組合下非混交卵的產(chǎn)量、形成效率和最大形成效率見(jiàn)表2。兩因素方差分析結(jié)果顯示，在培養(yǎng)全過(guò)程中，溫度、食物濃度以及兩者之間的交互作用均對(duì)非混交卵產(chǎn)量具有極顯著影響（P<0.01）。對(duì)非混交卵形成效率進(jìn)行的兩因素方差分析結(jié)果表明，溫度對(duì)非混交卵的形成效率具有極顯著影響（P<0.01）；食物濃度對(duì)非混交卵形成效率沒(méi)有明顯作用（P>0.05）；溫度與食物濃度的交互作用對(duì)非混交卵的形成效率具有極顯著影響（P<0.01）。對(duì)最大形成效率進(jìn)行的兩因素方差分析結(jié)果顯示，溫度對(duì)非混交卵的最大形成效率具有極顯著影響（P<0.01）；食物濃度為2.5×10⁶cells/mL的最大形成效率與其他各組差異極顯著（P<0.01）；溫度與食物濃度的交互作用對(duì)非混交卵的最大形成效率具有極顯著影響（P<0.01）。

3討論

3.1食物濃度和溫度對(duì)輪蟲種群增長(zhǎng)的影響

已有研究結(jié)果表明，同一溫度下萼花臂尾輪蟲種群密度隨食物濃度的升高而增加。本研究結(jié)果與已有的研究結(jié)果一致，25、28、30℃條件下萼花臂尾輪蟲的種群動(dòng)態(tài)與食濃度密切相關(guān)。在同一食物濃度下，種群密度隨溫度的升高而增大。本研究中25℃和28℃條件下各食物濃度條件下的種群密度有相同的變化趨勢(shì)，但30℃條件下各食物濃度沒(méi)有表現(xiàn)出這種變化趨勢(shì)，可能與較高溫度條件對(duì)低起始物密度的輪蟲種群增長(zhǎng)有抑制作用有關(guān)。

黃祥飛研究發(fā)現(xiàn)，萼花臂尾輪蟲種群的最大密度隨溫度的升高而有所增加，而種群達(dá)到高峰所需的時(shí)間則隨著溫度的升高而縮短。本研究結(jié)果也表明，輪蟲種群在28℃和30℃條件下較25℃提前1 d達(dá)到最大密度，但25℃與28℃條件下的輪蟲種群增長(zhǎng)率差異不顯著，且明顯高于30℃。

3.2食物濃度和溫度對(duì)輪蟲非混交卵的影響

已有關(guān)于輪蟲繁殖方面的研究主要是通過(guò)考察輪蟲的懷卵量這一指標(biāo)，懷卵輪蟲既有產(chǎn)非混交卵的非混交雌體又有產(chǎn)休眠卵的混交雌體。非混交雌體與輪蟲種群增長(zhǎng)密切相關(guān)，考察非混交雌體所產(chǎn)非混交卵的動(dòng)態(tài)變化將能更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)出輪蟲種群密度的變化。本研究中同一溫度下萼花臂尾輪蟲種群密度隨食物濃度的升高而增加，非混交卵的日產(chǎn)生量也表現(xiàn)出相似的變化趨勢(shì)。同一食物濃度下，非混交卵動(dòng)態(tài)與種群數(shù)量動(dòng)態(tài)也表現(xiàn)出極大的相似性，即25℃和28℃條件下各食物濃度條件下的非混交卵日產(chǎn)生量與種群密度有相同的變化趨勢(shì)，30℃條件下非混交卵日產(chǎn)生量沒(méi)有表現(xiàn)出這種變化趨勢(shì)。

溫度為25℃時(shí)輪蟲的非混交卵產(chǎn)量、形成效率和最大形成效率均明顯高于28℃和30℃條件下，這可能與25℃條件下輪蟲非混交卵的日產(chǎn)生量增長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)當(dāng)輪蟲的種群密度還處于增長(zhǎng)階段，非混交卵日生產(chǎn)量已達(dá)峰值。因此可用非混交卵的動(dòng)態(tài)變化提前預(yù)測(cè)出輪蟲種群的動(dòng)態(tài)變化。