孫小強(qiáng)，何川，徐德鋒，殷樂，李正義

（1常州大學(xué)石油化工學(xué)院，江蘇 常州 213164；2常州大學(xué)制藥與生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 常州 213164）

基于瑪咖酰胺的LC-UV/MS指紋圖譜和化學(xué)計(jì)量學(xué)分析技術(shù)在瑪咖質(zhì)量控制中的應(yīng)用

孫小強(qiáng)1，何川1，徐德鋒2，殷樂1，李正義1

（1常州大學(xué)石油化工學(xué)院，江蘇 常州 213164；2常州大學(xué)制藥與生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 常州 213164）

建立瑪咖中瑪咖酰胺類化合物液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-UV/MS）標(biāo)準(zhǔn)指紋譜圖，結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)對(duì)瑪咖及其衍生產(chǎn)品進(jìn)行組分比對(duì)分析，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。以不同產(chǎn)地的瑪咖干根和保健品作為供試樣品，采用石油醚進(jìn)行震蕩提取，提取液使用LC-UV/MS進(jìn)行分析。共有峰在40min內(nèi)得到了良好的分離，其中9個(gè)共有峰通過MS數(shù)據(jù)確證為瑪咖酰胺指紋特征峰。對(duì)8種瑪咖干根和保健品進(jìn)行了相似度分析，整體相似度在0.76以上，說明供試樣品的瑪咖酰胺種類相似。分別以全譜和瑪咖酰胺特征峰數(shù)據(jù)作為輸入變量進(jìn)行主成分分析，結(jié)果表明特征峰數(shù)據(jù)更適合作為質(zhì)量控制的依據(jù)，樣品可根據(jù)其真實(shí)產(chǎn)地和種類歸為三類，其中3個(gè)特征峰對(duì)質(zhì)量控制影響較大。該方法具有穩(wěn)定、高效和準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，可用于瑪咖的質(zhì)量控制和產(chǎn)地識(shí)別。

瑪咖；瑪咖酰胺；指紋圖譜；化學(xué)計(jì)量學(xué)；質(zhì)量控制

瑪咖，原產(chǎn)于南美，現(xiàn)廣泛種植于秘魯和中國(guó)[1]。因其富含蛋白質(zhì)、氨基酸等主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和具有功效作用的瑪咖酰胺、生物堿、芥子油苷、甾醇等化合物[2-3]，具有改善性功能、抗疲勞、緩解更年期綜合癥和良性前列腺增生等功效[1-4]。2011年，瑪咖粉作為新資源食品進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)，目前我國(guó)已成為世界第一大瑪咖生產(chǎn)和消費(fèi)國(guó)[5]。近幾年瑪咖干片及其保健品的價(jià)格波動(dòng)較大，且瑪咖保健品中添加其他廉價(jià)成分和虛假標(biāo)注產(chǎn)地的案例多發(fā)，其中缺乏有效的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和方法是重要的原因之一。

瑪咖酰胺，作為瑪咖中獨(dú)有的功效成分，和提高生育力、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)劑、平衡荷爾蒙、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)等功效有關(guān)[2-4,6-7]。許多研究者將瑪咖酰胺歸為生物堿，通過生物堿含量來判斷瑪咖品質(zhì)[8]，但GANZERA和CHOI等[6,9]測(cè)定的瑪咖生物堿提取物中瑪咖酰胺含量?jī)H為0.03%～0.84%，因此通過生物堿含量判斷瑪咖的品質(zhì)存在偏差。近幾年，對(duì)瑪咖酰胺的研究集中于指紋圖譜的定性分析和外標(biāo)法的定量分析，陳建等[10]所建立的HPLC瑪咖酰胺指紋圖譜所含的瑪咖酰胺類化合物種類較少，且未對(duì)特征峰信息進(jìn)行研究。劉興勇等[11]所建立的HPLC瑪咖指紋圖譜僅指出了各瑪咖樣品中的共有峰，且未對(duì)共有峰的信息進(jìn)行研究。朱財(cái)延等[12]所建立的LC-TOF法分離得到了多種瑪咖酰胺和瑪咖烯，并分析了3種云南產(chǎn)瑪咖的品質(zhì)，但該方法未對(duì)原產(chǎn)地秘魯瑪咖進(jìn)行對(duì)照研究；PAN等[13]將所建立的LC-MS/MS指紋圖譜用于不同產(chǎn)地的瑪咖根片的分析，并進(jìn)行了地域分類的主成分分 析，但目前市場(chǎng)問題主要集中于虛假宣傳瑪咖保健品的產(chǎn)地，該研究并未對(duì)此問題進(jìn)行深入研究。因此針對(duì)瑪咖保健品產(chǎn)地信息真實(shí)性的報(bào)道較為鮮見，需要建立廣泛且適用的方法。

指紋圖譜作為一種綜合的、可量化的色譜鑒定手段，可用于鑒別真?zhèn)?、評(píng)價(jià)原料藥材及半成品和成品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性[14]。主成分分析作為一種無監(jiān)督的模式識(shí)別方法，利用降維的思想，把復(fù)雜的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為幾個(gè)綜合指標(biāo)，使復(fù)雜的問題簡(jiǎn)單化，將化學(xué)計(jì)量學(xué)結(jié)合指紋圖譜進(jìn)行分析可最大程度地反應(yīng)樣本數(shù)據(jù)的內(nèi)在信息[15]。本研究以瑪咖酰胺類化合物作為研究對(duì)象，通過優(yōu)化提取和分析方法，建立LC-UV/MS標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，確定特征色譜峰，用于評(píng)價(jià)瑪咖及其衍生產(chǎn)品的品質(zhì)；針對(duì)不同產(chǎn)地的瑪咖干根和瑪咖保健品，結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)，通過相似度和主成分分析對(duì)瑪咖產(chǎn)地信息進(jìn)行深入研究，探究影響瑪咖產(chǎn)品質(zhì)量控制的主要成分，為瑪咖及其衍生產(chǎn)品的質(zhì)量控制和產(chǎn)地識(shí)別提供數(shù)據(jù)支持和參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

秘魯、云南會(huì)澤和云南麗江瑪咖干根樣品由江蘇慧博生物科技有限公司提供；瑪卡益康牌瑪咖片，批號(hào)2014051，武漢三和生物工程有限公司；拉摩力拉牌瑪咖片，批號(hào)125414，秘魯赫塞爾公司；酷特利牌瑪咖片，批號(hào)20140701，昆明酷特利生物科技有限公司；七彩云花牌瑪咖片，生產(chǎn)日期20140409，昆明七彩云花生物科技有限公司；多寶牌瑪咖片生產(chǎn)日期20140619，寧波佳康生物科技有限公司，均購(gòu)于品牌旗艦店。

無水乙醇，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；三氟乙酸，色譜純，上海廣拓試劑有限公司；乙腈和無水乙醇，色譜純，Tedia。

島津Pr-LCMS-2020型液質(zhì)聯(lián)用儀，日本Shimadzu公司；Biotage Initiaor微波合成儀，瑞典Biotage公司；Heidolph Synthesis 16位平行反應(yīng)器，德國(guó)Heidolph公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 指紋圖譜樣品的制備

精確稱取1.50g瑪咖干根或瑪咖保健品樣品，加入25mL反應(yīng)管中，加入15mL石油醚，置于平行反應(yīng)器上，950r/min震蕩，45℃加熱回流提取24h。提取完成后靜置30min，取上清液，40℃、轉(zhuǎn)速80r/min下旋蒸減壓濃縮至油狀物，溶于無水乙醇定溶于5mL容量瓶中，取1.5mL經(jīng)0.22μm濾膜過濾，濾液為供試品溶液，LC-UV/MS待測(cè)。

1.2.2 樣品的LC-UV/MS分析

樣品分析通過Agilent ZORBAX Eclipse XDBC-18色譜柱（250×φ4.6mm，5μm）。流動(dòng)相體系為含0.005%三氟乙酸的乙腈溶液（A）和含0.005%三氟乙酸的水溶液（B），0～24min采用A∶B = (80∶20)～(100∶0)梯度洗脫，25～40min采用100%A溶液洗脫。流動(dòng)相流速為0.8mL/min，柱溫箱設(shè)置為40℃，進(jìn)樣量為10μL，瑪咖酰胺類化合物在波長(zhǎng)為210nm下檢測(cè)。

MS分析中離子源為ESI，對(duì)樣品采取正離子模式進(jìn)行分析。MS中一些主要參數(shù)為高純氮作為噴霧器和干燥器氣體的壓力分別為100psi和90psi（1psi=6.895kPa）；界面電壓為4500V；N2作為干燥氣速率為15L/min；霧化速率為1.5L/min；射頻電壓為60V；界面溫度為350℃；去溶劑化毛細(xì)管溫度為250℃；加熱器溫度為200℃；掃描范圍為10～1000m/z。

1.3 數(shù)據(jù)處理

LC-UV/MS數(shù)據(jù)處理通過島津自帶軟件Lab Solutions Insight完成；LC-UV指紋圖譜處理通過中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版，中國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì)）完成；相似度比較也由中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)完成；主成分分析法通過指紋圖譜全譜和特征峰的峰面積數(shù)據(jù)由SIMCA-P 11.5（Umertrics，Sweden）完成。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品提取方法的優(yōu)化

首先，分別比較了無水乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、無水乙醇和石油醚6種提取溶劑的提取效率，以LC-UV/MS譜圖中所出現(xiàn)的瑪咖酰胺類化合物種類作為評(píng)判提取效率的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，石油醚提取物中所含瑪咖酰胺種類較多，提取效率較高，最終選用石油醚作為提取溶劑。

然后，以石油醚作為提取溶劑，分別比較了超聲提取法、加熱攪拌提取法、震蕩提取法和微波提取法4種提取方法。結(jié)果表明，所得的瑪咖酰胺種類相同，但峰面積大小存在差異，其中震蕩提取法所得譜圖峰面積較大，相對(duì)濃度較高，提取效率較高。此外，震蕩提取法使用平行合成儀進(jìn)行提取，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣品提取，保證多樣品提取實(shí)驗(yàn)平行進(jìn)行，以減少提取中的誤差，最終選用震蕩提取法作為樣品提取的方法。

2.2 LC-UV/MS分析條件的優(yōu)化

2.2.1 色譜柱的選擇

分別比較了Agilent ZORBAX Eclipse XDB C-18柱、XDB C-8柱、Plus C-18柱、Shimadzu Intersil ODS-3柱和依利特 Hypersil ODS-2柱7種不同長(zhǎng)度和類型色譜柱的分離效果。綜合比較色譜峰形、分離度、分離時(shí)間和分離效率，XDB C-18柱的分離效果最為理想，且長(zhǎng)度為250mm的色譜柱分離效果明顯好于長(zhǎng)度為150mm和100mm的色譜柱，可有效分離各個(gè)瑪咖酰胺組分。

2.2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

有研究提出在210nm的LC-UV檢測(cè)波長(zhǎng)下檢測(cè)瑪咖烯和帶不飽和酮基的瑪咖酰胺，在280nm的LC-UV檢測(cè)波長(zhǎng)下檢測(cè)無飽和酮基的瑪咖酰胺和亞油酸、亞麻酸[9]。因此，本實(shí)驗(yàn)分別比較了210nm和280nm兩種不同的檢測(cè)波長(zhǎng)。結(jié)果表明，LC-UV檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm時(shí)，未檢測(cè)到瑪咖酰胺；檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm時(shí)，色譜峰的分離度和響應(yīng)值較好。最終指紋圖譜LC-UV分析的檢測(cè)波長(zhǎng)選擇210nm。

2.2.3 流動(dòng)相的選擇

首先，分別比較了甲醇、乙腈、甲醇-水、乙腈-水4種常規(guī)流動(dòng)相的洗脫效果，結(jié)果表明乙腈-水作為流動(dòng)相的分離效率最高。在流動(dòng)相中加入一定比例的三氟乙酸（TFA）可減少其色譜峰拖尾，提高各特征峰的分離度和峰形，當(dāng)流動(dòng)相為含0.005% TFA的乙腈溶液-含0.005% TFA的水溶液時(shí)，絕大部分組分在32min內(nèi)得到了有效的分離。

然后，以含0.005% TFA的乙腈溶液（A）-含0.005% TFA的水溶液（B）作為流動(dòng)相，分別篩選了不同流動(dòng)相比例[A∶B=(100∶0)～(70∶30)]和梯度時(shí)間。綜合分離結(jié)果和效率，最終選擇A∶B = (80∶20)～(100∶0)（0～24min）（體積比）梯度洗脫，后用100%A溶液洗脫（25～40min）。

2.2.4 質(zhì)譜離子源的選擇

對(duì)比研究了電噴霧電離源（ESI）和大氣壓化學(xué)電離源（APCI）兩種質(zhì)譜離子源。結(jié)果表明，APCI未檢測(cè)到瑪咖酰胺類化合物，最終選擇ESI離子源作為質(zhì)譜分析條件。另外，對(duì)樣品采取正負(fù)離子模式同時(shí)分析，瑪咖酰胺類化合物僅在正離子ESI模式下有響應(yīng)，可直觀地獲得（準(zhǔn)）分子離子峰。

2.3 瑪咖酰胺指紋圖譜的建立

通過優(yōu)化后.的提取和LC-UV/MS分析條件，對(duì)3個(gè)不同產(chǎn)地的瑪咖干根（秘魯、云南麗江和會(huì)澤）和5種不同市場(chǎng)主流價(jià)位的保健品（0.8元/g～19.87元/g）進(jìn)行了平行提取和LC-UV/MS分析實(shí)驗(yàn)。將LC-UV譜圖保留時(shí)間和峰面積信息導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)，分析8種樣品的LC-UV譜圖，采用均值法進(jìn)行計(jì)算和比對(duì)，選擇云南麗江瑪咖干根樣品的分析圖譜作為瑪咖中瑪咖酰胺類化合物的LC-UV標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜（圖1）。將各個(gè)色譜峰的MS數(shù)據(jù)與已報(bào)道文獻(xiàn)中酰胺類化合物的MS數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比（表1），并通過對(duì)照實(shí)驗(yàn)室合成的標(biāo)準(zhǔn)品在保留時(shí)間和準(zhǔn)分子離子峰等信息，確證了其中9個(gè)共有峰的分子結(jié)構(gòu)，由此將它們作為瑪咖酰胺指紋圖譜的特征峰（圖1中1～9）。

圖1 瑪咖中瑪咖酰胺類化合物的LC-UV標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜

2.4 指紋圖譜方法學(xué)考察

2.4.1 精密度試驗(yàn)

取同一批次樣品S3（云南麗江瑪咖）的待測(cè)提取液，在優(yōu)化條件下連續(xù)進(jìn)行5次LC-UV/MS分析，以6號(hào)色譜峰（N-芐基-十六烷酰胺）為參照峰（圖1中S峰），計(jì)算其他特征峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各特征峰相對(duì)保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值均小于0.6%，相對(duì)峰面積的RSD值均小于3.9%，表明儀器的精密度良好。

2.4.2 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批次樣品S3的待測(cè)提取液樣品分成6份，分別進(jìn)行LC-UV/MS分析，以6號(hào)色譜峰為參照峰（圖1中S峰），計(jì)算其他特征峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各特征峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值均小于0.8%，相對(duì)峰面積的RSD值均小于3.4%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批次樣品S3的待測(cè)提取液樣品，分別在提取結(jié)束后0h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、48h進(jìn)行LC-UV/MS分析，以6號(hào)色譜峰為參照峰（圖1中S峰），計(jì)算其他特征峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。各特征峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值均小于0.7%，相對(duì)峰面積的RSD值均小于4.1 %，表明該方法的穩(wěn)定性良好。

2.5 化學(xué)計(jì)量學(xué)考察及瑪咖的質(zhì)量控制

2.5.1 實(shí)際樣品的分析

將3種瑪咖干根和5種保健品的石油醚提取物的LC-UV譜圖與瑪咖酰胺類化合物的LC-UV標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜（圖1）進(jìn)行對(duì)比。圖2為8種樣品的石油醚提取物L(fēng)C-UV指紋圖譜，從圖中可發(fā)現(xiàn)19個(gè)共有峰分離情況較好，通過保留時(shí)間和質(zhì)譜數(shù)據(jù)對(duì)比，確證了其中共同含有特征峰1～8，部分缺少特征峰9；各特征峰保留時(shí)間的RSD在0.09%～0.29%之間，各特征峰峰面積的RSD在53.63%～90.88%之間；其中樣品S4和S5各個(gè)特征峰峰面積相對(duì)較小且缺少特征峰9。結(jié)果說明將1～9號(hào)峰作為了瑪咖指紋圖譜的特征色譜峰是合理可行的，可定性分析瑪咖樣品的品質(zhì)。

表1 瑪咖石油醚提取物的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜特征色譜峰信息及MS數(shù)據(jù)

圖2 8種瑪咖干根和保健品的石油醚提取物L(fēng)C-UV指紋圖譜

2.5.2 相似度評(píng)價(jià)

通過相似度評(píng)價(jià)瑪咖干根和保健品中瑪咖酰胺的指紋圖譜可較為全面系統(tǒng)地定量分析指紋圖譜的相似度和差異度，以石油醚提取物的全譜數(shù)據(jù)作為計(jì)算依據(jù)，通過中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)完成分析。表2為瑪咖干根和保健品指紋圖譜的相似度。整體來看各干根之間相似度較高，而保健品相對(duì)較低。

表2 瑪咖干根和保健品指紋圖譜的相似度

2.5.3 主成分分析

使用SIMCA-P 11.5分別對(duì)8種樣品的石油醚提取物L(fēng)C-UV譜圖數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析，通過這種無監(jiān)督的模式識(shí)別方法反映出原始變量中的大部分?jǐn)?shù)據(jù)，得到更加科學(xué)有效的化學(xué)信息。如圖3所示，分別以指紋圖譜特征色譜峰峰面積和全譜數(shù)據(jù)作為輸入變量，并使用兩個(gè)主成分變量PC1和PC2建立模型，進(jìn)行主成分分析。

圖3 瑪咖干根和保健品提取物樣本指紋圖譜的主成分分析

當(dāng)以特征色譜峰峰面積作為輸入變量時(shí)[圖3(a)]，所有樣本都處于95%的置信區(qū)間中，PC1和 PC2分別占64.30%和42.90%，模型可以解釋86.70%的X變量的變化和擁有67.80%的預(yù)測(cè)能力；當(dāng)以全譜數(shù)據(jù)作為輸入變量時(shí)[圖3(b)]，PC1和PC2分別占31.10%和3.29%，模型可以解釋54.90%的X變量的變化和擁有11.60%的預(yù)測(cè)能力。模型解釋能力越高，說明模型模擬了X矩陣越多的變異；而預(yù)測(cè)能力越高則說明模型預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確率越高，兩個(gè)組別之間差異也較大。因此，以特征色譜峰峰面積作為輸入變量的主成分分析方法明顯優(yōu)于以全譜數(shù)據(jù)作為輸入變量的主成分分析方法。此外，通過圖3(a)可發(fā)現(xiàn)，該模型將3個(gè)主要產(chǎn)地的瑪咖干根S1～S3歸為了一類，且相互之間距離較近，說明所用云南和秘魯瑪咖的差異較小，含有相同種類的瑪咖酰胺類化合物；將3種瑪咖保健品S4～S6歸為一類，其中樣品S4和樣品S5的原料均為秘魯瑪咖，而樣品S6屬于引種在云南麗江的秘魯瑪咖品種；將S7和S8兩種瑪咖保健品歸為一類，這兩種保健品的原料均為云南麗江種植的瑪咖品種。由此可見，該主成分分析結(jié)果與樣品的實(shí)際信息一致，具有較高的可信度。

最后，通過模型可有效區(qū)分干根和保健品，結(jié)合指紋圖譜（圖2）的統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)可發(fā)現(xiàn)，各特征峰峰面積的RSD存在較大差異，這可能和瑪咖保健品中使用的原材料瑪咖產(chǎn)地不同或所添加的原料瑪咖比例不同或原料品種不同有關(guān)，且很多保健品會(huì)在其中加入一些其他成分以提高其功效[23-24]，這也會(huì)導(dǎo)致相似度存在差異。此外，模型對(duì)樣品S6的歸類凸顯了主成分分析的真實(shí)性，客觀直接地反應(yīng)出各個(gè)瑪咖以及其衍生產(chǎn)品的真實(shí)產(chǎn)地和品種。由于所用原料瑪咖的產(chǎn)地不同，海拔、溫度、濕度等生態(tài)環(huán)境的差異，種植方式和種植生產(chǎn)過程中使用其他化學(xué)物質(zhì)等生產(chǎn)因素，都可能對(duì)保健品的品質(zhì)產(chǎn)生影響。因此，化學(xué)計(jì)量學(xué)——指紋圖譜技術(shù)可客觀反映出樣品的內(nèi)在信息，通過建立樣本數(shù)據(jù)庫(kù)，可進(jìn)一步完善現(xiàn)有瑪咖產(chǎn)地識(shí)別方法。

2.5.4 特征峰對(duì)質(zhì)量控制的影響

通過主成分分析可以得到特征峰的荷載值p，其代表了特征色譜峰峰面積變量對(duì)樣品分類的貢獻(xiàn)值，從而反映出特征峰對(duì)樣品質(zhì)量控制的影響。如圖4所示，特征峰4、5和8對(duì)分類影響最大，特征峰1、2、6、7和9對(duì)分類影響次之，而特征峰3對(duì)分類影響最小。因此，盡管特征峰5和8對(duì)應(yīng)的組分在瑪咖中的相對(duì)含量較低（圖2），但它們對(duì)樣品分類結(jié)果影響較大，說明采用主成分分析更有利于客觀地分析和控制瑪咖質(zhì)量。

圖4 主成分分析中特征峰對(duì)樣品分類的影響

3 結(jié)論

本文建立了瑪咖干根和保健品中功效成分瑪咖酰胺類化合物的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，并結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證和樣品品質(zhì)及產(chǎn)地分析。通過對(duì)比8種樣品指紋圖譜的保留時(shí)間RSD可知，所選的9種瑪咖酰胺類化合物特征峰是合理的，結(jié)合保留時(shí)間和MS數(shù)據(jù)可以定性地判別瑪咖的品質(zhì)和真?zhèn)涡浴＝Y(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)，將指紋圖譜中9種瑪咖酰胺類化合物特征峰的峰面積數(shù)據(jù)作為輸入變量，相比全譜數(shù)據(jù)的主成分分析，可更準(zhǔn)確地反映出樣品的真實(shí)信息?？傊诂斂０返腖C-UV/MS指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)分析技術(shù)具有穩(wěn)定、高效和準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，可用于瑪咖的質(zhì)量控制和產(chǎn)地識(shí)別。

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Application of analytical technology of LC-UV/MS fingerprint and chemometrics base on macamides in maca quality control

SUN Xiaoqiang1，HE Chuan1，XU Defeng2，YIN Yue1，LI Zhengyi1
（1School of Petrochemical Engineering，Changzhou University，Changzhou 213164，Jiangsu，China；2School of Pharmaceutical Engineering & Life Science，Changzhou University，Changzhou 213164，Jiangsu，China）

The liquid chromatography-mass spectrometric（LC-UV/MS）and standard chromatographic fingerprints of macamides in maca were established. Combined with chemometrics technology，the quality control of maca and maca-based products had been achieved using comparative analysis of components. Different regions of dried maca hypocotyls and dietary supplement tablets were used as samples，and the macamides were extracted by oscillations with petroleum ether. The extracts were analyzed using LC-MS，and the results indicated that a better separation of commom peaks was obtained in 40mins and nine of these peaks were identified as characteristic macamide peaks by mass data. The overall similarity among eight kinds of maca dried hypocotyls and dietary supplements was no less than 0.76，which indicated that varieties of macamides in all samples were similar. Principal component analysis was performed using the data of whole spectrum and characteristic peaks of macamides as input variables，respectively. The results indicated that using the data of characteristic peaks as input variables was the better choice for quality control of maca. All samples were dividedinto three categories on the basis of their real origins and types of samples; and three of nine characteristic peaks had greater effect on the quality control. This method has some merits such as stable，efficient and accurate，and it is suitable for the quality control and the origin identification of maca.

maca；macamide；fingerprint；chemometrics；quality control

TS207.7

：A

：1000–6613（2017）05–1855–07

10.16085/j.issn.1000-6613.2017.05.038

2016-10-25；修改稿日期：2016-11-02。

國(guó)家自然科學(xué)基金（21572026）、江蘇省中小企業(yè)創(chuàng)新基金（BC2014026）、常州市龍城英才項(xiàng)目及常州大學(xué)江蘇省先進(jìn)催化與綠色制造協(xié)同創(chuàng)新中心項(xiàng)目（ACGM2016-06-05）。

孫小強(qiáng)（1956—），男，博士，教授，主要從事有機(jī)合成和藥物分析相關(guān)研究。聯(lián)系人：李正義，副教授，從事有機(jī)合成及分析研究。E-mail：zyli@cczu.edu.cn。徐德鋒，教授，從事藥物合成及分析。E-mail：markxu@cczu.edu.cn。