許世超,張憶一,董 凱,溫俊男

(1.天津工業(yè)大學 環(huán)境與化學工程學院,天津 300387；2.天津工業(yè)大學 中空纖維膜材料與膜過程省部共建國家重點實驗室，天津 300387；3.天津工業(yè)大學 水質安全評價與保障技術工程中心，天津 300387)

基于L-半胱氨酸/CdTe量子點修飾電極的電化學傳感器的制備及其對Pb2+的檢測

許世超1，2,3*,張憶一1,董 凱1,溫俊男1

(1.天津工業(yè)大學 環(huán)境與化學工程學院,天津 300387；2.天津工業(yè)大學 中空纖維膜材料與膜過程省部共建國家重點實驗室，天津 300387；3.天津工業(yè)大學 水質安全評價與保障技術工程中心，天津 300387)

成功制備了由L-半胱氨酸和CdTe量子點作為修飾材料的電化學傳感器并用于水體中Pb2+的檢測。巰基丙酸修飾的CdTe量子點通過水相合成，表面含有大量羧基，與L-半胱氨酸表面的氨基形成酰胺鍵，修飾于金電極表面。通過熒光分光光度計、透射電子顯微鏡、紅外光譜、X射線衍射對L-Cys/CdTe QDs復合材料進行表征。采用循環(huán)伏安法(CV)研究了L-Cys/CdTe QDs修飾成分在金電極上的電化學性能及CdTe量子點的最佳自組裝時間。采用差分脈沖溶出伏安法(DPSV)研究了鉛離子在修飾電極上的電化學行為。在優(yōu)化實驗條件下，Pb2+濃度在1.0×10-6～1.0×10-2mol/L范圍內與其峰電流呈良好的線性關系，相關系數(shù)(r2)為0.993 8，檢出限(3σ,n=5)為4.0×10-7mol/L。該傳感器具有良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，有望用于實際水樣中鉛離子的檢測。

CdTe量子點；L-半胱氨酸；修飾電極；電化學傳感器；鉛離子

CdTe量子點由于其特有的電子學性質和光學性質，具有非常高的研究價值和應用潛力[1-3]。由于量子點存在表面效應[4]，其表面原子具有非常高的化學活性，使得量子點可以輕易地獲得氧化還原能力，從而在基底電極表面發(fā)生氧化還原反應，產生電子的轉移，放大電化學檢測信號。此外，由于其粒徑較小，電子很容易從粒子內部遷移到粒子表面，縮短了電子的轉移距離，加速了電極表面的電子轉移速率，使得電信號增強[5]。這些特質使得量子點作為電極修飾材料被廣泛應用于電化學傳感器，Xia等[6]等制備了一種CdS量子點修飾的玻碳電極電化學傳感器，研究了CdS量子點對電化學傳感器電信號的影響，并對目標物質進行了檢測。Chen等[7]利用CdTe/CdS量子點作為電極修飾成分，以放大檢測信號，并成功檢測抗壞血酸，檢出限可達70 nmol/L。

隨著工業(yè)的發(fā)展，鉛的廣泛使用給環(huán)境帶來了嚴重污染[8-9]。同時，鉛可通過呼吸道、消化道和皮膚進入人體，在人體內的半衰期可達20年，損害人體的消化系統(tǒng)、神經系統(tǒng)及造血系統(tǒng)等[10-11]。因此，環(huán)境中鉛離子的檢測意義重大，目前鉛離子常用的檢測方法主要有原子吸收光譜法、原子熒光光譜法、電感耦合等離子體質譜法、紫外-可見分光光度法和電化學檢測法等。原子吸收光譜法的選擇性強、靈敏度高、抗干擾能力強，但其標準工作曲線的線性范圍窄。原子熒光光度法的檢測靈敏度較高，檢測濃度范圍大，但檢測的金屬種類有限。電感耦合等離子體質譜法的檢出限低，是目前最先進的痕量元素分析方法，但價格昂貴，同時易受污染。紫外-可見分光光度法成本低廉，測試方法簡單，但抗干擾能力差，檢測范圍窄。電化學檢測法是一種利用被測離子在溶液中的電化學性質，在電極表面發(fā)生電化學反應，通過產生電信號值來定量檢測離子濃度的分析方法。電化學檢測法的優(yōu)勢在于成本低、測試速度快、靈敏度高、檢測范圍寬、檢測金屬離子種類多，同時測量儀器操作簡單，因此在分析檢測中得到廣泛應用[12-13]。本文利用電化學分析法檢測鉛離子，通過水相合成MPA-CdTe，將其通過化學鍵作用負載于修飾有L-半胱氨酸的金電極表面，得到L-Cys/CdTe/GE傳感器，并采用循環(huán)伏安法對修飾成分L-Cys/CdTe的最優(yōu)化組裝時間進行了考察，以差分脈沖溶出伏安法對鉛離子進行了檢測。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

碲粉、氯化鎘、三羥基烷基甲烷(Tris)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS，98%)、巰基丙酸(>90%)、L-半胱氨酸(上海拉丁試劑公司)；硼氫化鈉(天津光復精細化工研究所)；氯化鈉、磷酸氫二鈉、鐵氰化鉀、磷酸二氫鉀(天津市北方天醫(yī)化學試劑廠)。實驗用水為超純水。

熒光分光光度計(F380，天津市港東科技發(fā)展有限公司)；紫外分光光度計(Helios-γ，日本日立公司)；傅立葉紅外光譜儀(Nicolet 6700,Thermo Fisher公司)；透射電子顯微鏡(TEM,JEOL-2100,日本日立公司)；X射線衍射儀(XRD,DMAX-2500，日本Rigaku公司)；電化學工作站(LK2010,天津蘭立科電子高技術有限公司)，實驗采用三電極體系：金電極(GE)為工作電極，鉑絲電極為對電極，飽和甘汞電極為參比電極。

1.2 實驗方法

1.2.1 CdTe量子點的合成 根據文獻選擇MPA為穩(wěn)定劑，按照Cd2+∶Te2+∶MPA=1∶0.5∶2.4的比例(質量比)進行制備。將151 mg NaBH4粉末和25 mg Te粉放入針筒中，抽取5 mL 水。然后將針筒內氣體全部排出，確保針筒內只有混合液存在。將上述裝有混合液的針筒在常溫下靜置反應3 h，直至溶液變?yōu)闇\粉色，并有少量白色絮狀沉淀出現(xiàn)，反應完成。此時，針筒中淺粉色上清液即為NaHTe溶液。

在三口燒瓶中加入91.3 mg CdCl2·2.5 H2O和95 mL水，再加入84 μL MPA，磁力攪拌均勻。然后用1 mol/L NaOH 將上述溶液調至pH 11.0，再通入氮氣排氧15 min。最后，將制備好的NaHTe溶液快速注入到三口瓶中，在96 ℃條件下加熱回流數(shù)小時后得到MPA-CdTe量子點。

圖1 傳感器的組裝過程Fig.1 Schematic illustration of the fabrication of sensor

1.2.2 修飾電極的制備 將金電極浸泡在Piranha溶液(98%濃硫酸和30% H2O2以體積比 3∶1 混合配制)10 min后用水洗凈，進行打磨拋光操作，至電極表面無劃痕并呈鏡面，在水中超聲清洗1 min并用氮氣吹干。再將處理好的金電極靜置于0.02 mol/L的L-半胱氨酸溶液10 h，取出后用水輕輕沖洗電極2～3次，在空氣中自然晾干，記為L-Cys/GE。

圖3 CdTe量子點的透射電子顯微鏡圖Fig.3 TEM image of CdTe QDs

圖4 MPA-CdTe量子點的傅立葉紅外光譜圖Fig.4 FTIR spectra of MPA modified CdTe QDs

取20 μL MPA-CdTe量子點溶液和適量25 mmol/L EDC與10 mmol/L NHS的混合溶液滴在上述電極表面，室溫下反應一段時間，然后用水輕輕洗去電極表面未連接的部分，氮氣吹干，制得修飾電極，記為L-Cys/CdTe/GE。如圖1所示，由于MPA-CdTe是含有羧基官能團的納米顆粒，在EDC/NHS交聯(lián)劑的作用下可與負載L-半胱氨酸(含有氨基官能團)的金電極作用，以共價鍵的形式自組裝于電極表面。

2 結果與討論

2.1 CdTe量子點的表征

圖2為不同回流時間的CdTe量子點熒光發(fā)射譜圖。由圖2可知，隨著回流時間的增加(1～3 h)，量子點的粒徑不斷增大，熒光發(fā)射峰向長波長方向發(fā)生移動(由539 nm紅移至575 nm)，這是因為晶體的粒徑越小，其比表面積會越大，表面分布的原子就會越多，對表面的束縛能力越強，吸收的光能也越高，使其吸收帶發(fā)生紅移，其熒光發(fā)射峰位也發(fā)生相應紅移[14]。同時，利用穩(wěn)定劑MPA來修飾CdTe量子點表面(在光照下MPA釋放硫離子，與Cd2+結合形成CdS的殼結構)形成CdS的殼結構，隨著回流時間的增加其表面缺陷減少，從而使得熒光強度增強。當回流3 h時，所合成的CdTe量子點的熒光光譜峰形良好，具有很好的半高峰寬，說明此時CdTe量子點的光學性能良好，在溶液中分散均勻[15]。綜上所述，本實驗選擇回流3 h的CdTe量子點作為金電極的修飾材料。

圖5 CdTe量子點的XRD圖Fig.5 XRD pattern of CdTe QDs

圖6 不同電極在0.1 mol/L PBS緩沖液中的循環(huán)伏安曲線Fig.6 Cyclic voltammograms of different electrodes in 0.1 mol/L PBS buffer(pH 7.0)a:bare gold；b：L-Cys/GE；c：L-Cys/CdTe/GE

CdTe量子點的XRD圖如圖5所示。由圖可知，在(111)，(220)，(311)晶面出現(xiàn)CdTe量子點的特征峰，這表明CdTe量子點晶體的閃鋅礦結構已經形成，CdTe粒子核生長良好[18]。CdTe量子點的紫外吸收譜圖顯示在489 nm處出現(xiàn)了第1個紫外吸收峰，CdTe量子點的粒徑可根據方程D=(9.8131×10-7)λ2-(1.715×10-2)λ2+1.006λ-194.8計算[19],式中λ為CdTe量子點的紫外吸收波長。經計算，得到合成的CdTe量子點粒徑為2.0 nm,說明本實驗已成功制備了量子點。

2.2L-Cys/CdTe/GE傳感器的電化學表征

采用循環(huán)伏安法考察了CdTe量子點不同自組裝時間(0,2,4,6 h)對于L-Cys/CdTe/GE傳感器的影響，結果顯示，隨著自組裝時間的增加，所制備的CdTe/Au傳感器的電信號逐漸增強，當組裝時間超過4 h時，經L-半胱氨酸修飾的金電極表面形成了一層致密的CdTe量子點膜，此時繼續(xù)延長組裝時間電信號無明顯增強。因此，實驗選擇CdTe量子點的自組裝時間為4 h。

圖6是CdTe/Au傳感器組裝過程的循環(huán)伏安法表征。從圖6曲線b可以看出，當金電極表面被L-半胱氨酸修飾時，由于Au—S鍵形成的膜阻礙了電極表面的電子傳遞作用，因此電信號強度相比于玻碳電極的信號(曲線a)有所降低。但當CdTe量子點在金電極表面進行自組裝后(曲線c)，電信號明顯增加。這說明當CdTe量子點固定在電極表面后，由于CdTe粒徑很小，電子很容易從粒子內部遷移到粒子表面，從而加快了電子傳遞速率，表現(xiàn)出量子點的量子化效應[20]。

2.3 檢測條件的優(yōu)化

以0.2 mol/L HAc-NaAc緩沖液作為支持電解質，通過差分脈沖溶出伏安法考察了不同pH值(pH 3.0，4.0，5.0，6.0，7.0)對Pb2+溶出峰電流值的影響。實驗結果顯示，當HAc-NaAc緩沖溶液的pH值為5.0時，Pb2+的溶出峰電流值最大，因此實驗選用pH 5.0的0.2 mol/L HAc-NaAc緩沖液進行Pb2+檢測。實驗還考察了富集時間(30,60,90,120,150,180 s)對Pb2+溶出峰電流值的影響。結果表明，當富集時間由30 s增至120 s時，溶出峰電流值明顯增強，繼續(xù)延長富集時間，Pb2+的溶出峰電流值變化不大。這是因為Pb2+在修飾電極表面的吸附已逐漸趨于飽和。因此，本文采用120 s作為最佳富集時間。

2.4 不同濃度Pb2+的檢測

用上述制備好的L-Cys/CdTe/GE傳感器通過差分脈沖陽極溶出伏安法檢測不同濃度的Pb2+,以pH 5.0的0.2 mol/L HAc-NaAc緩沖液作為支持電解質。實驗結果顯示，Pb2+的伏安峰強度隨其濃度的增加而增強。且在1.0×10-6～1.0×10-2mol/L濃度范圍內呈良好的線性關系。其線性方程為Ip=-1.159 lg[c(Pb2+)]-14.56，r2=0.993 8，檢出限(3σ,n)為4.0×10-7mol/L 。

2.5 修飾電極的重現(xiàn)性與穩(wěn)定性

為了考察修飾電極的重現(xiàn)性，在相同條件下制備兩組L-Cys/CdTe/GE傳感器(每組5個)，分別檢測濃度為1.0×10-6mol/L和1.0×10-2mol/L的Pb2+溶液，在相同條件下進行差分脈沖陽極溶出伏安檢測。結果表明，測得每組傳感器的峰電流相對標準偏差分別為5.3%和5.5%，表明該傳感器有較好的重現(xiàn)性。另外，在1周內測定其對1.0×10-6mol/L Pb2+溶液的差分脈沖溶出伏安響應，測得溶出電流的平均值為-8.887 μA,相對標準偏差(RSD)為4.3%，說明該修飾電極有良好的穩(wěn)定性。

2.6 干擾實驗

在相同的實驗條件下考察L-Cys/CdTe/GE傳感器對Pb2+檢測的選擇性，對濃度為1.0×10-4mol/L的Pb2+溶液進行干擾實驗。若干擾物引起 Pb2+響應信號的變化不超過 10%,則認為該物質對Pb2+的測定無干擾。實驗結果表明：15倍的Cd2+，Hg2+及100倍的Ca2+，Cu2+，Zn2+，Cr3+對Pb2+的測定無干擾。

2.7 實際水樣中Pb2+的測定

采用標準加入法將L-Cys/CdTe/GE傳感器用于實際水樣中Pb2+的測定。取10 mL自來水加至等量的HAc-NaAc緩沖液中，測定其溶出峰電流，再向溶液中加入4 μL 5.0×10-2g/L 的Pb2+標準溶液。該方法測得水樣中Pb2+的濃度為10.0 μg/L，與原子吸收分光光度法(GB7475-87)的測定結果(9.88 μg/L)相差不大[21]。

3 結 論

本文成功制備了MPA-CdTe，并將其通過化學鍵作用負載于修飾有L-半胱氨酸的金電極表面，得到L-Cys/CdTe/GE傳感器，探究了傳感器修飾材料的最優(yōu)化組裝時間。初步考察了L-Cys/CdTe修飾電極對Pb2+的電化學行為，實驗結果表明，Pb2+在1.0×10-6～1.0×10-2mol/L范圍內呈良好的線性關系，檢出限達4.0×10-7mol/L。該傳感器具有制備簡單、成本低、重現(xiàn)性良好等優(yōu)點，在實際水樣檢測中具有很大應用空間。

[1] Nozik A J,Beard M C,Luther J M,Law M,Ellingson R J,Johnson J C.Chem.Rev.，2010,110(11):6873-6890.[2] Xu Y H,Liu J Q,Gao C L,Wang E K.Electrochem.Commun.，2014,48:151-154.

[3] Gilmartin N,O’Kennedy R.EnzymeMicrob.Technol.，2012,50(2):87-95.

[4] Amelia M,Lincheneau C,Silv S,Cred A.Chem.Soc.Rev.，2012,41(17):5728-5743.

[5] Tang M L,Wang M,Xing T R,Zeng J,Wang H L,Ruan D Y.Biomaterials，2008,29(33):4383-4391.

[6] Xia Q,Chen X,Liu J H.Biophys.Chem.，2008,136(2):101-107.

[7] Chen H C,Li W,Zhao P,Nie Z,Yao S Z.Electrochim.Acta，2015,178:407-413.

[8] Huang Z H，Zheng X Y，Lv W,Wang M，Yang Q H，Kang F Y.Langmuir，2011,27:7558-7562.

[9] Wei Y,Gao C,Meng F L,Li H H,Wang L,Liu J H,Huang X J.J.Phys.Chem.C，2012,116:1034-1041.

[10] Wang B,Luo B,Liang M H,Wang A L,Wang J,Fang Y,Chang Y H,Zhi L J.Nanoscale，2011,3:5059-5066.

[11] He Y,Lu H T,Sai L M,Lai Y W,Fan Q L,Wang L H,Huang W.J.Phys.Chem.B，2006,110(27):13370-13374.

[12] Yang S M，Li R Q,Li H,Chen Y S,Ding S Y.J.Instrum.Anal.( 楊紹明，李瑞琴，李紅,陳延勝,丁素游.分析測試學報)，2015,34(4):395-400.

[13] Ma X Q,Sun Z,Yan P,Liu F,Liu M M,Yao H.J.Instrum.Anal.( 馬曉倩，孫卓,燕萍，劉凡,劉苗苗，姚慧.分析測試學報)，2015,34(2):153-158.

[14] Choi J H,Chen K H,Strano M S.J.Am.Chem.Soc.，2006,128:15584-15585.

[15] Wang Y,Vaneski A,Yang H H,Gupta S,Hetsch F,Kershaw S V,Wey Y T,Li H R,Rogach A L.J.Phys.Chem.C，2013,117(4):1857-1862.[16] Silva F O,Carvalho M S,Mendon?a R,Macedo W A A,Balzuweit K.NanoscaleRes.Lett.，2012,7(1):536.

[17] EI-Sadek M S.A,Nooralden A Y,Babu S M,Palanisamy P K.Opt.Commun.，2011,284(12):2900-2904.

[18] Zhou D,Lin M,Chen Z C,Bai Y.Chem.Mater.，2011,23(21):46-53.

[19] D’Souza S,Antunes E,Nyokong T.Inorg.Chim.Acta，2011,367(1):173-181.

[20] Zhang Y,Mi L,Wang P N,Chen J Y.J.Lumin.，2008,128(12):1948-1951.

[21] Luo S Z,Zhao J L,Chen H Y,Yang T.J.Instrum.Anal.(羅世中，趙金龍，陳懷銀，楊濤.分析測試學報)，2016,35(1)：23-27.

Preparation of an Electrochemical Sensor Based onL-cysteine/CdTe Quantum Dots Modified Electrode and Its Detection of Lead Ions

XU Shi-chao1,2,3*,ZHANG Yi-yi1,DONG Kai1,WEN Jun-nan1

(1.School of Environmental and Chemical Engineering,Tianjin Polytechnic University,Tianjin 300387,China；2.State Key Laboratory of Separation Membranes and Membrane Processes,Tianjin Polytechnic University,Tianjin 300387,China;3.Tianjin Engineering Center for Safety Evaluation of Water Quality & Safeguards Technology,Tianjin Polytechnic University,Tianjin 300387,China)

A simple and sensitive electrochemical sensor was fabricated for the detection of Pb2+based onL-cysteine(L-Cys)/CdTe quantum dots(QDs) hybrid nanocomposites modified gold electrode(GE).CdTe QDs were synthesized in aqueous phase.Then,carboxyl labeled CdTe QDs were covalently bonded toL-cysteine on gold electrode,depending on connection between-COOH on MPA-CdTe surface and —NH2inL-cysteine.The morphology and composition of CdTe QDs and hybrid nanocomposites were characterized by fourier transform infrared spectroscopy(FTIR),X-ray powder diffraction(XRD),transmission electron microscopy(TEM),UV-Vis and fluorescence spectrometry.The electrochemical performance ofL-Cys/CdTe nanocomposite and the optimized self-assembly time of CdTe QDs on electrode were investigated by cyclic voltammetry(CV).The electrochemical behavior of lead ions atL-Cys/CdTe nanocomposite modified gold electrode was investigated by different pulse stripping voltammetry(DPSV).Under the optimal hybridization conditions,different pulse stripping voltammetric responses ofL-Cys/CdTe/GE sensor were in linearity with Pb2+in the concentration range of 1.0×10-6-1.0×10-2mol/L with a detection limit of(3σ,n=5) 4.0×10-7mol/L and a correlation coefficient(r2) of 0.993 8.Therefore,the electrochemical sensor modified withL-Cys/CdTe/GE nanocomposites exhibited the advantages of high sensitivity,good reproducibility and stability,providing a potential platform for the fabrication of other electrochemical sensors.Key words：CdTe QDs;L-cysteine;modified electrode;electrochemical sensor;lead ions

10.3969/j.issn.1004-4957.2017.04.014

2016-09-18；

2016-11-24

天津市自然科學基金(11JCZDJC22300,13JCQNJC02600)；天津市外國專家局引智項目(Y2012061)

O657.1;O614.433

A

1004-4957(2017)04-0524-05

*通訊作者：許世超，博士，副教授，研究方向：電化學傳感器，Tel：022-83955112，E-mail:xushichao@tjpu.edu.cn