董素靜+王毅紅+王彥超+李嬋君+張娟

摘要 建立了固相萃取（SPE）前處理方法聯(lián)合氣相色譜/三重四極桿質(zhì)譜（GC-MS/MS）檢測(cè)蔬菜水果中西瑪津、莠去津、嘧霉胺、異丙甲草胺、二甲戊靈、氟蟲腈、稻瘟靈、蟲螨腈、乙酯殺螨醇、噠螨靈、咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、嘧菌酯共13種農(nóng)藥多殘留的檢測(cè)分析方法。結(jié)果表明：13種農(nóng)藥在30 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)了良好的分離，在0.01～2.00 mg/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)>0.998，方法檢出限為0.001～0.010 mg/kg。13種農(nóng)藥在0.01、0.10、1.00 mg/L 3個(gè)濃度添加水平下，平均回收率在82.9%～111.2%之間，測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）在1.1%～5.6%之間，能夠滿足農(nóng)藥多殘留的分析要求。

關(guān)鍵詞 蔬菜水果；農(nóng)藥殘留；固相萃取技術(shù)；氣相色譜/三重四極桿質(zhì)譜

中圖分類號(hào) TS207.5+3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）05-0108-03

Abstract SPE-GC-MS/MS was proposed for the determination of 13 kinds of pesticide residues，including simazine，atrazine，pyrimethanil，metolachlor，pendimethalin，fipronil，isoprothiolane，chlorfenapyr，chlorobenzilate，pyridaben，prochloraz，difenoconazole，azoxystrobin in vegetables and fruits.Results showed that 13 pesticides could be well separated within 30 minutes，and the linear ranges of 13 pesticides were all 0.01～2.00 mg/L with the linear relative coefficients more than 0.998 and detection limits in the range of 0.001～0.010 mg/kg.Recovery rates at the three concentrat-ions of 0.01，0.10，1.00 mg/L ranged from 82.9% to 111.2%，and RSDs（n=6） were in the range of 1.1%～5.6%，which fitted for the requirements of

residue analysis.

Key words vegetables and fruits；pesticide residues；SPE；GC-MS/MS

“民以食為天，食以安為先”，讓老百姓吃得安心和放心是食品安全的宗旨。但近年來蔬菜水果安全問題層出不窮，其中農(nóng)藥殘留污染是一個(gè)重要因素[1]。蔬菜水果中農(nóng)藥殘留問題已成為社會(huì)關(guān)注的重點(diǎn)。為此，世界各國政府制定了大量的、嚴(yán)格的農(nóng)藥最高殘留限量（MRL）標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)[2-3]。截至目前，我國農(nóng)業(yè)部已在全國152個(gè)大中城市開展了農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的例行監(jiān)測(cè)和專項(xiàng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[4]。

西瑪津（MRL：0.1～0.5 mg/kg）、莠去津（MRL：0.05 mg/kg）、嘧霉胺（MRL：0.05～7.00 mg/kg）、異丙甲草胺（MRL：0.05～0.50 mg/kg）、二甲戊靈（MRL：0.1～0.2 mg/kg）、氟蟲腈（MRL：0.02～0.10 mg/kg）、稻瘟靈（MRL：1 mg/kg）、蟲螨腈（MRL：0.5～2.0 mg/kg）、乙酯殺螨醇（MRL：2 mg/kg）、噠螨靈（MRL：2 mg/kg）、咪鮮胺（MRL：0.05～10.00 mg/kg）、苯醚甲環(huán)唑（MRL：0.02～2.00 mg/kg）、嘧菌酯（MRL：0.1～5.0 mg/kg）是近幾年新增的例行監(jiān)測(cè)項(xiàng)目或者是鄭州市蔬菜水果中檢出較多的項(xiàng)目[5-7]，目前針對(duì)這13種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)報(bào)道較少。當(dāng)前，國內(nèi)外關(guān)于蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留測(cè)定的研究，采取的分析方法主要集中在氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法[8-11]等。其中，氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜法具有高效、準(zhǔn)確、適宜多種農(nóng)藥檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，已被普遍應(yīng)用于各種農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

該文采用固相萃取技術(shù)，利用石墨炭黑-氨基串聯(lián)柱[12]凈化樣品，建立了固相萃取-氣相色譜/三重四級(jí)桿質(zhì)譜法（gas chromatography/triple quadrupole tandem mass spectrome-try，GC-MS/MS）同時(shí)測(cè)定蔬菜水果中13種農(nóng)藥多殘留的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)試劑。西瑪津、莠去津、嘧霉胺、異丙甲草胺、二甲戊靈、氟蟲腈、稻瘟靈、蟲螨腈、乙酯殺螨醇、噠螨靈、咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、嘧菌酯等13種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，規(guī)格為1 000 mg/L，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津）提供；乙腈、正己烷，均為色譜純，由德國Merck公司生產(chǎn)；甲苯，色譜純，由賽默飛世爾科技（中國）有限公司生產(chǎn)；氯化鈉、無水硫酸鎂，分析純，由天津科密歐化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 試驗(yàn)儀器。布魯克道爾頓SCION TQ氣相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀；分析天平（上海良平儀器儀表有限公司）；勻漿機(jī)（德國Hettich科學(xué)儀器公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）；離心機(jī)（德國Hettich科學(xué)儀器公司）；氮吹儀（美國Organomation公司）；石墨炭黑固相萃取柱（美國Agilent公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理。①提取。準(zhǔn)確稱取15.0 g粉碎均勻的樣品于100 mL離心管中，加入30 mL乙腈，高速勻漿2 min，繼續(xù)加入7.5 g無水Mg2SO4，高速勻漿1 min，于5 000 r/min條件下離心5 min。準(zhǔn)確移取10 mL上清液于50 mL茄形瓶中，50 ℃減壓濃縮至1 mL左右時(shí)加10 mL乙腈，使乙腈和提取液中少量的水形成共沸物以除去少量水分，繼續(xù)減壓濃縮至1 mL，待凈化。②凈化。將石墨碳黑氨基串聯(lián)柱用5 mL乙腈甲苯溶液（v/v=3∶1）活化，之后加入上述提取液并收集，再用5 mL乙腈甲苯溶液（v/v=3∶1）淋洗，共淋洗5 次[13]。收集液于50 ℃水浴中氮?dú)獯抵两?，用正己烷?zhǔn)確定容至 5.0 mL，渦旋混勻后倒入樣品瓶，待測(cè)。

1.2.2 儀器條件。①色譜條件。色譜柱：BR-5 ms柱（30.0 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣為高純氦氣，流量1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；檢測(cè)器溫度300 ℃。柱升溫程序：初始溫度80 ℃，保持2 min，以20 ℃/min升溫至180 ℃，再以5 ℃/min升溫至280 ℃，再以20 ℃/min升溫至300 ℃，保持5 min。進(jìn)樣體積1 μL；進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比為20∶1。②質(zhì)譜條件。離子化方式為EI；接口溫度150 ℃；離子源溫度220 ℃；電離電壓70 eV；掃描質(zhì)量數(shù)范圍（m/z）為50～400；溶劑延遲時(shí)間7.9 min。質(zhì)譜檢測(cè)的方式：先全掃描（Scan），后選擇離子檢測(cè)（SIM）。

2 結(jié)果與分析

2.1 母離子、子離子和碰撞能量試驗(yàn)

按照1.2.2設(shè)定的儀器條件，Scan模式下確定目標(biāo)農(nóng)藥豐度高且質(zhì)量數(shù)較大的離子作母離子，后選擇SIM模式，在0～50 eV之間調(diào)節(jié)碰撞能量，選取豐度較高的2個(gè)離子分別作為定量和定性離子，并確定最佳碰撞能量。13種農(nóng)藥殘留化合物的保留時(shí)間、母離子、子離子和碰撞能量等參數(shù)見表1。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

按表1確定的各農(nóng)藥的質(zhì)譜參數(shù)，對(duì)13種農(nóng)藥的0.1 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行GC-MS/MS測(cè)定分析，得到13種農(nóng)藥的總離子流色譜圖，見圖1?？梢钥闯?，13種目標(biāo)農(nóng)藥在30 min內(nèi)均能良好出峰，且分離效果較好，能夠滿足蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)的相關(guān)要求。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

用8 mg/L的13種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液逐級(jí)稀釋，配制成質(zhì)量濃度為0.01、0.05、0.10、0.50、1.0、2.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列，按照1.2.2確定的儀器色譜、質(zhì)譜條件和2.1確定的農(nóng)藥質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，以各農(nóng)藥峰面積相對(duì)應(yīng)的溶液濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。13種農(nóng)藥線性范圍、回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2?？梢钥闯?，13種農(nóng)藥在質(zhì)量濃度0.01～2.00 mg/L之間線性關(guān)系良好，且線性相關(guān)系數(shù)r均大于0.998。以各標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰信噪比S/N>3計(jì)算方法的檢出限，結(jié)果見表2?？梢钥闯?，該研究方法的最低檢出限遠(yuǎn)低于各國規(guī)定的農(nóng)藥最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（MRL），完全能夠滿足日常蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留的檢測(cè)要求。

2.4 精密度和回收試驗(yàn)

在已知不含目標(biāo)農(nóng)藥的空白樣品中進(jìn)行添加回收試驗(yàn)。稱取空白樣品若干份，分別在0.01、0.10、1.00 mg/L 3個(gè)添加水平上做13種農(nóng)藥的加標(biāo)回收試驗(yàn)，每個(gè)添加濃度水平分別設(shè)定6個(gè)平行，按1.2.1方法進(jìn)行前處理，并進(jìn)行GC-MS/MS測(cè)定分析，得到方法平均回收率及精密度，結(jié)果見表3?？梢钥闯觯?3種農(nóng)藥的平均加標(biāo)回收率在82.9%～111.2%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.1%～5.6%之間，均在正常范圍。說明該方法具有較好的回收率和精密度，符合蔬菜水果中農(nóng)藥殘留的分析要求。

3 結(jié)論

該研究采用石墨化炭黑-氨基固相萃取技術(shù)對(duì)蔬菜和水果樣品進(jìn)行提取和凈化處理，建立了一種同時(shí)測(cè)定蔬菜和水果中西瑪津等13種農(nóng)藥殘留的氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜分析方法。該方法操作簡單、快速高效，同時(shí)具有良好的回收率和重現(xiàn)性，適用于蔬菜水果中西瑪津等農(nóng)藥殘留的日常檢測(cè)分析。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 龐鶯鶯.蔬菜農(nóng)藥殘留污染分析及防治對(duì)策[J].現(xiàn)代園藝，2014（1）：70-71.

[2] 毋永龍，聶繼云，李志霞，等.我國和CAC新鮮水果農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)研究[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全，2015（2）：31-34.

[3] 王潔蓮，?，|，劉巍，等.蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及其檢測(cè)方法概述[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2016，7（4）：1587-1592.

[4] 崔建玲.2015年農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全工作穩(wěn)步推進(jìn)[J].農(nóng)產(chǎn)品市場(chǎng)周刊，2016（1）：32-33.

[5] 食品中農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763-2014[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2014.

[6] 李嬋君，朱香玲，宋延娟.鄭州市蔬菜中農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)分析[J].中國瓜菜，2013，26（5）：36-38.

[7] 杜利敏，王彥平，洪月玲.鄭州市部分食品中化學(xué)污染物監(jiān)測(cè)與分析[J].醫(yī)藥論壇雜志，2016（8）：66-69.

[8] 朱莉萍，朱濤，潘玉香，等.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜及水果中多種農(nóng)藥殘留量[J].分析化學(xué)，2008，36（7）：999-1003.

[9] 趙曉萌，于同泉，朱高群，等.氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)蔬菜和水果中35種農(nóng)藥殘留[J].色譜，2005，23（3）：328.

[10] 邵金良，黎其萬，劉宏程，等.高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中8種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留[J].現(xiàn)代食品科技，2011，27（7）：856-860.

[11] 郭春景，李娜，王建忠.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定8種蔬菜中114種農(nóng)藥殘留[J].質(zhì)譜學(xué)報(bào)，2014，35（3）：279-288.

[12] 盧亞玲，賈清華，肖加加，等.固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定果蔬中36種農(nóng)藥殘留[J].理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊(cè)），2015，51（6）：828-832.

[13] 田相旭.微波加熱-氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)蔥蒜類蔬菜中農(nóng)藥多殘留技術(shù)研究[D].濟(jì)南：山東大學(xué)，2013.