周莉媛，張 毅，邵 靚，張 睿，鄧 飛，李 麗

（四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

四川省2016年小反芻獸疫免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析

周莉媛，張 毅，邵 靚，張 睿，鄧 飛，李 麗

（四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒感染小反芻獸的一種急性、烈性、接觸性傳染病，該病對(duì)我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展造成了極其嚴(yán)重的影響。為了解四川省2016年小反芻獸疫免疫抗體情況，我們分別在兩次集中免疫后，從四川省42個(gè)縣采集2557份羊血清，采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法進(jìn)行小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)，結(jié)果有1833份樣品免疫合格，免疫合格率為71.69%。

小反芻獸疫；競(jìng)爭(zhēng)ELISA；免疫抗體

小反芻獸疫（PPR）又稱(chēng)“羊瘟”，是由副粘病毒科麻疹病毒屬小反芻獸疫病毒引起的急性、接觸性傳染疫病，主要感染綿羊和山羊等小反芻獸，以高熱、口炎、胃炎、腹瀉和肺炎為特征，易感羊群的發(fā)病率和死亡率可達(dá)100%。該病是OIE法定報(bào)告動(dòng)物疫病，也是全球計(jì)劃根除的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。

小反芻獸疫是1942年在非洲的科特迪瓦首次報(bào)道，我國(guó)首次發(fā)生小反芻獸疫是在2007年的西藏自治區(qū)。2014年以來(lái)，新疆、甘肅、內(nèi)蒙、遼寧、湖南等地相繼發(fā)生了小反芻獸疫疫情，四川省在日常監(jiān)測(cè)中也零星監(jiān)測(cè)到小反芻獸疫病原學(xué)陽(yáng)性。為防范小反芻獸疫疫情在四川發(fā)生，四川省采取了小反芻獸疫的強(qiáng)制免疫，于每年的3月到4月、9月到10月各進(jìn)行一次集中免疫。為切實(shí)了解疫苗的免疫效果，我們分別在2016年5月和11月選取了四川省21個(gè)市州的部分規(guī)模羊場(chǎng)和散養(yǎng)戶進(jìn)行了免疫抗體水平監(jiān)測(cè)。

1 材料

1.1 檢測(cè)試劑 蘭州獸醫(yī)研究所小反芻獸疫競(jìng)爭(zhēng)ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，批號(hào)：20161010118。

1.2 樣品采集 血清樣品采集自四川省21個(gè)市（州）42個(gè)縣的規(guī)模羊場(chǎng)及散養(yǎng)戶，共計(jì)2557份羊血清（其中5月份采集1264份，11月份采集1293份）。抽樣范圍覆蓋全省21個(gè)市（州），每個(gè)市（州）隨機(jī)抽取兩個(gè)縣，每個(gè)縣隨機(jī)抽取2個(gè)規(guī)模羊場(chǎng)，2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（10個(gè)散養(yǎng)戶）。

2 方法

2.1 檢測(cè)方法

2.1.1 使用前將所有試劑恢復(fù)至室溫。

2.1.2 在酶標(biāo)板上檢測(cè)樣品孔中依次加50μL待檢血清，每份樣品做兩個(gè)重復(fù)孔；其中標(biāo)準(zhǔn)陰性血清設(shè)2孔，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清設(shè)2孔，每孔加入相應(yīng)血清50μL；空白對(duì)照設(shè)2孔，每孔加100μL血清稀釋液；單克隆抗體對(duì)照設(shè)4孔，每孔加50μL血清稀釋液。

2.1.3 將單克隆抗體用血清稀釋液作1∶100倍稀釋?zhuān)瞻讓?duì)照孔外其他各孔加50μL稀釋后的單克隆抗體；37℃孵育1h。

2.1.4 取出酶標(biāo)板甩干，用洗滌液洗滌3次，在吸水紙上甩干。

2.1.5 每孔加入50μL酶結(jié)合物，37℃孵育1h。

2.1.6 按洗滌步驟洗滌3次。

2.1.7 每孔加入底物溶液50μL，37℃避光作用10min。

2.1.8 每孔加50μL終止液，在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處測(cè)定每孔的OD值。

2.2 檢測(cè)結(jié)果判定 通過(guò)血清樣品和對(duì)照孔的OD值計(jì)算血清樣品的抑制率（PI值），當(dāng)待檢血清PI值≥45%時(shí)，判為抗體陽(yáng)性，即為免疫抗體合格。

3 結(jié)果

3.1 2016年全年共檢測(cè)免疫羊血清2 557份，合格1833份，平均合格率為71.69%。其中5月份平均合格率為70.09%，11月份平均合格率為73.24%。

3.2 在1680份規(guī)模場(chǎng)羊血清中，合格1217份，平均合格率為72.44%。其中5月份平均合格率為70.36%，11月份平均合格率為74.52%。

3.3 在877份散養(yǎng)戶羊血清中，合格616份，平均合格率為70.24%。其中5月份平均合格率為69.58%，11月份平均合格率為70.86%。

表12016 年四川省小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 份

4 分析討論

4.1 從檢測(cè)結(jié)果看，2016年全年小反芻獸疫免疫抗體平均合格率在70%以上，達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的要求，可以對(duì)羊群產(chǎn)生免疫保護(hù)，表明四川省小反芻獸疫強(qiáng)制免疫工作基本達(dá)到預(yù)期效果。下半年抗體合格率較上半年有所提高，這與實(shí)行強(qiáng)制免疫后，防疫人員及養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）主免疫意識(shí)增強(qiáng)和免疫操作水平提高有一定關(guān)系。

4.2 小反芻獸疫尚無(wú)有效的治療方法，疫苗接種是阻止該病發(fā)生，減少病毒擴(kuò)散及潛伏感染的有效手段。免疫平均合格率與疫苗種類(lèi)、冷鏈系統(tǒng)、免疫操作、動(dòng)物身體狀態(tài)等多種因素相關(guān)，要進(jìn)一步提高免疫合格率，還需從多方面優(yōu)化，從而降低疫情發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

4.3 不同養(yǎng)殖方式下，小反芻獸疫免疫抗體的合格率有所差異。散養(yǎng)戶羊的抗體合格率低于規(guī)模場(chǎng)，說(shuō)明除了免疫意識(shí)，飼養(yǎng)環(huán)境和管理水平也對(duì)羊群小反芻獸疫的免疫效果有一定影響。四川省目前對(duì)小反芻獸疫進(jìn)行強(qiáng)制免疫，能有效地保護(hù)易感動(dòng)物，然而應(yīng)該強(qiáng)調(diào)的是，加強(qiáng)引種檢疫、改善養(yǎng)殖環(huán)境、重視飼養(yǎng)管理也是遠(yuǎn)離傳染源、阻斷傳播途徑的重要措施。■

[1] 蔡冬冬，李金海,邢坤，等.小反芻獸疫概述[J].四川畜牧獸醫(yī)，2014，41（5）：31-33.

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Surveillance and Analysis of Immune Antibodies on Peste des Petits Ruminants in Sichuan Province in 2016

Zhou Liyuan，Zhang Yi，Shao Jing，et al.
（Animal Disease Prevention and Control Center of Sichuan Province，Sichuan Chengdu 610041，China）

Peste des petits ruminants（PPR）is a severe acute，potent，contagious infection on ruminants. This disease caused extremely serious influence on the development of animal husbandry in China.In order to understand the immune antibody of PPR in Sichuan province，2 557 samples of goat serum from 42 counties were collected after two concentrated immunization in 2016.Competitive ELISA was used to detect immune antibody of PPR，of which 1 833 samples had qualified immunity and the immune qualified rate was 71.69%.

Peste des petits ruminants；Competitive ELISA；Immune antibody

S854.43

：B

：1001-8964（2017）04-0030-02

2017-02-10

周莉媛（1988-），女，四川德陽(yáng)人，大學(xué)本科，助理獸醫(yī)師。