李仲玉，李佳凝，劉洋，田博，邢澤龍，徐良梅

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030）

不同能量水平限飼對肉種雞種蛋氨基酸及脂肪酸含量影響

李仲玉，李佳凝，劉洋，田博，邢澤龍，徐良梅*

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱 150030）

文章探討不同能量水平日糧對肉種雞種蛋氨基酸及脂肪酸含量影響。選用27周齡體重相近愛拔益加（AA）肉種雞240羽，隨機分為4組，每組設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)10羽，產(chǎn)蛋率達(dá)5%時開始試驗，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組飼糧能量水平分別為對照組80%、70%、50%，各組每日投料量及飼糧中粗蛋白質(zhì)、氨基酸等其他營養(yǎng)水平均相同，40周齡結(jié)束試驗，測定種蛋中氨基酸及脂肪酸含量。結(jié)果表明，①與對照組相比，35周齡時50%限飼組蛋黃中必需氨基酸含量顯著升高（P＜0.05），而80%、70%限飼組有上升趨勢，但差異不顯著（P＞0.05），其中70%、50%限飼組蛋黃中蘇氨酸、苯丙氨酸含量顯著升高（P＜0.05），各限飼組蛋黃中總游離氨基酸有升高趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）；各限飼組對蛋清中必需氨基酸、總游離氨基酸含量均無顯著影響（P＞0.05），但70%、50%限飼組蛋氨酸含量顯著升高（P＜0.05）。②與對照組相比，35周齡時50%限飼組蛋黃中必需脂肪酸、不飽和脂肪酸含量顯著升高（P＜0.05）；40周齡肉種雞70%、50%能量限飼組必需脂肪酸、飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸均顯著下降（P＜0.05）。綜上所述，35周齡時，肉種雞能量限飼可提高種蛋中氨基酸及脂肪酸含量，40周齡時不宜過度能量限飼。

肉種雞；能量限飼；氨基酸；脂肪酸

畜禽生長發(fā)育需從外界攝取營養(yǎng)供應(yīng)機體新陳代謝，自由采食可滿足其能量需求，但易造成機體脂肪沉積及各系統(tǒng)發(fā)育不協(xié)調(diào)等問題，適宜能量、蛋白水平飼糧限飼對動物機體生長、繁殖具有促進(jìn)作用[1-2]。王瑋等研究肉仔雞發(fā)現(xiàn)，日糧10%能量限飼對肉仔雞生長性能、機體內(nèi)臟器官發(fā)育具有促進(jìn)作用[3]。Teguia等指出，早期限飼可提高肉仔雞飼料利用率，降低生產(chǎn)成本，提高經(jīng)濟效益[4]。Moraes等研究發(fā)現(xiàn)，母體飼糧低能量、低蛋白水平限飼顯著降低子代肉雞體重，高能量水平日糧可引起子代肉雞機體肥胖癥[5]。但目前有關(guān)母體限飼對種蛋營養(yǎng)物質(zhì)影響研究較少，種蛋中營養(yǎng)物質(zhì)是提供雞胚生長發(fā)育必需成分[6]，其中卵黃中脂類為組織器官生長發(fā)育所需代謝庫[7-8]。胡景威、Peláez等試驗發(fā)現(xiàn)，母體采食量限飼可提高胚胎生長發(fā)育，影響后代脂肪細(xì)胞形態(tài)及其脂質(zhì)沉積[9-10]。牛樹鵬等發(fā)現(xiàn)，肉種雞產(chǎn)蛋中期能量限飼顯著提高13和17胚齡蛋黃膽固醇含量[11]。姜丹等研究發(fā)現(xiàn)，肉種雞能量限飼顯著降低16、18和20胚齡胚胎蛋黃EE和GE含量，降低產(chǎn)蛋后期胚胎蛋黃中脂類物質(zhì)沉積[12]。

綜上可知，改變母體營養(yǎng)水平，可調(diào)控種蛋中營養(yǎng)物質(zhì)積累，影響胚胎生長發(fā)育。然而有關(guān)母體能量限飼對種蛋中氨基酸及脂肪酸代謝影響尚無報道。本試驗旨在對產(chǎn)蛋期肉種雞作能量限飼處理，研究其對種蛋中必需氨基酸、脂肪酸含量影響，為母體能量限飼對子代生長發(fā)育和脂肪代謝影響提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與飼養(yǎng)管理

選用27周齡體重均勻的愛拔益加（AA）肉種雞240羽，隨機分為4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10羽。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組飼糧能量水平分別為對照組80%、70%、50%，試驗為期14周。按照我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》[13]（NY/T 33-2004）肉雞營養(yǎng)需要配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，且各組每日投料量及飼糧中粗蛋白質(zhì)、氨基酸等其他營養(yǎng)水平均相同，肉種雞40周齡時結(jié)束試驗。飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 肉種母雞飼養(yǎng)管理

肉種母雞在3層金屬籠中飼養(yǎng)，每籠1只，每天08:00定量投料，全期自由飲水。雞舍溫度20℃，濕度55%，定期防疫消毒。

1.3 樣品采集與指標(biāo)測定

于肉種雞人工授精后第35、40周齡末收集種蛋。種蛋避光保存，保存室溫度10～12℃，相對濕度65%～70%。

1.3.1 蛋黃和蛋清中氨基酸測定

于試驗第35周齡末每個重復(fù)隨機選10枚雞蛋，測定蛋黃和蛋清中氨基酸含量。分別取蛋清0.2 g、蛋黃0.5 g，加去離子水10mL，在冰浴中用T10型分散器（IKA）高速勻漿3次（22 000 r·min1，每次10 s，間隔10 s），加入10%磺基水楊酸10 m L，震蕩混合，靜置10 min，離心機（Anke GL-20B，上海）15 200×g離心10min，定量濾紙過濾，4 mol·L-1LiOH調(diào)濾液pH 2.2，去離子水定容至25 mL，經(jīng)濾膜過濾，全自動氨基酸分析儀（日立L-8900）測定游離氨基酸含量。

1.3.2 蛋黃脂肪酸含量測定

于35、40周齡末取蛋黃（脂肪酸甲酯化法）測定氨基酸含量：稱取0.5 g蛋黃于離心管中，加入1.5 m L超純水震蕩，0.5m LC17:0內(nèi)標(biāo)溶液（5mg·L-1）、2.5mL甲醇、2.5mL氯仿，漩渦振蕩5min；靜止2 h后，在4 200 r·min-1下離心5min，取氯仿層1mL于螺口管中，氮吹儀在30℃恒溫中吹干，加入2mL甲醇鈉溶液，50℃孵育30min；冷卻后加入3mL鹽酸-甲醇溶液，90℃孵育60min；冷卻后加入1mL雙蒸水，1.5m L正己烷，振蕩1min，靜止分層，上層有機相（正己烷相）經(jīng)無水硫酸鈉過濾于進(jìn)樣瓶中，氣相色譜分析儀（島津GC）測定豆蔻酸（C14:0）、銀杏酸（C15:0）、棕櫚酸（C16:0）、棕櫚一烯酸（C16:1）、十七碳一烯酸（C17:1）、硬脂酸（C18:0）、反油酸甲酯（C18:1n9t）、二十二烷酸甲酯（C18:2n6t）、亞油酸（C18:2n6c）、γ-亞麻酸甲酯（C18:3n6）、花生一烯酸（C20:1）、花生酸（C21:0）、花生二烯酸（C20:2）、山崳酸（C22:0）、二十碳三烯酸甲脂（C20:3n6）、花生四烯酸（C20: 4n6）、木焦油酸（C24:0）、二十二碳六烯酸（C22: 6n3）含量[14]。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Tab le 1 Com position and nutrient levelsof diets(Air-d ry basis)

1.4 數(shù)據(jù)處理

SPSS 19.0對數(shù)據(jù)作單因素方差分析（one-way ANOVA），結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，各組間平均值采用Duncan作多重比較，以P＜0.05作為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同能量水平限飼種蛋氨基酸含量

由表2可知，與對照組相比，35周齡肉種雞50%能量限飼種蛋蛋黃中必需氨基酸含量顯著升高（P＜0.05），而80%、70%能量限飼組種蛋蛋黃中必需氨基酸有上升趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）；與對照組相比，80%、70%、50%能量限飼組種蛋蛋黃中總游離氨基酸有上升趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。與對照組相比，70%、50%能量限飼組種蛋蛋黃中Thr和Phe含量顯著提高（P＜0.05）。

由表3可知，與對照組相比，不同能量水平限飼對蛋清中必需氨基酸、總游離氨基酸均無顯著含量影響（P＞0.05）；但70%、50%能量限飼組必需氨基酸中Met含量顯著提高（P＜0.05）。

表2 肉種雞不同能量水平限飼種蛋蛋黃氨基酸含量Table 2 Different energy restriction on contentsof am ino acids in yolk of eggs

表3 不同能量水平限飼種蛋蛋清氨基酸含量Tab le3 Differentenergy restriction on contentsof am ino acids in albumen of eggs

2.2 不同能量水平限飼種蛋脂肪酸含量

2.2.1 35周齡能量限飼種蛋蛋黃中脂肪酸含量

由表4可知，35周齡肉種雞50%能量限飼種蛋蛋黃中必需脂肪酸和不飽和脂肪酸含量顯著高于其他各組（P＜0.05）。與對照組相比，80%、70%能量限飼組種蛋蛋黃中必需脂肪酸、不飽和脂肪酸有下降趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。50%能量限飼種蛋蛋黃中C18:0、C18:1、C18:2n6t、C18: 2n6c、C20:1、C21:0、C22:1、C20:2、C20:3n6、C20:4n6、C24:0、C22:6n3含量顯著高于其他組。

表4 35周齡肉種雞能量限飼種蛋蛋黃脂肪酸含量Table4 Energy restriction on contentsof fatty acids in 35weeksyolk ofeggs

2.2.2 40周齡能量限飼種蛋蛋黃脂肪酸含量

結(jié)果見表5。

由表5可知，與對照組相比，40周齡肉種雞70%、50%能量限飼組中必需脂肪酸、飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸均顯著下降（P＜0.05），而80%能量限飼組有下降趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。

表5 40周齡肉種雞能量限飼種蛋蛋黃脂肪酸含量Tab le5 Energy restriction on contentsof fatty acids in 40weeksyolk of eggs

3 討論

3.1 不同能量水平限飼對種蛋氨基酸含量影響

動物自身無法合成必需氨基酸或合成量不足，須由飼糧提供，其含量增加有益于機體生長發(fā)育、繁殖。家禽攝入氨基酸不足或產(chǎn)蛋性能提高引起相對不足時，動用分解體組織以保證產(chǎn)蛋需要[15]。有關(guān)家禽母體限飼對種蛋氨基酸含量影響尚無定論。本試驗結(jié)果表明，肉種雞50%能量限飼蛋黃、蛋清必需氨基酸（蘇氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸）含量顯著升高，可能由于木桶效應(yīng)，蛋氨酸影響蛋黃、蛋清氨基酸組成，但對總游離氨基酸含量無顯著影響。種蛋蘇氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸等氨基酸直接來源于飼料，通過血液運輸?shù)铰殉膊课唬练e到卵黃中[16]，約占雞蛋中氨基酸含量15%～20%[17-18]，其余大部分氨基酸均來自體組織分解。王強等研究表明，日糧能值對鴨蛋氨基酸含量影響比較復(fù)雜，高能量日糧可提升蛋殼質(zhì)量，降低鴨蛋氨基酸含量。本試驗也發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，70%、50%能量限飼組種蛋蛋黃中蘇氨酸和苯丙氨酸含量顯著升高，而蛋清中蛋氨酸含量顯著升高。日糧能量直接影響蛋中氨基酸含量，還是較低能量日糧影響機體蛋白質(zhì)代謝進(jìn)而影響蛋中氨基酸含量，有待深入研究。前期研究發(fā)現(xiàn)，肉種雞產(chǎn)蛋后期能量限飼對子代生長發(fā)育、胚胎期血脂代謝指標(biāo)具有顯著母體營養(yǎng)效應(yīng)[20]，子代生長過程表現(xiàn)明顯補償性生長[21]，由此推測，氨基酸沉積于蛋黃中，通過母體效應(yīng)作用于子代機體，促進(jìn)其生長發(fā)育。

3.2 不同能量水平限飼對種蛋脂肪酸含量影響

必需脂肪酸為動物維持機體正常代謝不可缺少而自身又無法合成，須通過食物供給，其含量不足導(dǎo)致動物免疫力下降，生長受阻，繁殖力下降。種蛋中必需脂肪酸直接來源于飼料，日糧中脂肪酸組成影響蛋黃中脂肪酸含量，影響胚胎發(fā)育和孵化率[22-23]。家禽蛋中脂肪酸沉積主要靠肝臟脂肪酸合成[24]，因此，家禽營養(yǎng)狀況直接影響肝臟脂肪酸合成及蛋中脂肪酸積累。胚胎生長發(fā)育時期對脂肪酸吸收與利用完全來自于雞蛋，母體飼糧營養(yǎng)及胚胎發(fā)育胚齡可改變胚胎脂肪酸含量，其中主要被利用脂肪酸包括9-十六碳烯，油酸，亞油酸，亞麻酸，其次為花生四烯酸、二十二碳六烯酸及二十四碳烯酸。胚胎發(fā)育過程中，吸收利用率最高的飽和脂肪酸為棕櫚酸、十八烷酸[25]。因此，通過母體營養(yǎng)影響蛋中脂肪酸沉積，改善胚胎脂肪酸的吸收與利用成為有效途徑。Wang等研究表明，高蛋白飼糧可促進(jìn)家禽膽固醇、降低脂肪酸合成[26]。高脂肪飼糧抑制脂肪酸合成，胚胎發(fā)育期蛋黃內(nèi)脂肪被吸收利用，在孵化12胚齡以后，蛋黃吸收利用率大幅上升[27]，脂肪酸為脂肪水解的產(chǎn)物，肉種雞飼喂低能量水平飼糧對產(chǎn)蛋后期子代生長發(fā)育和脂類代謝有顯著影響，在早期生長過程出現(xiàn)補償性生長[28]。母體過高強度能量限飼則給子代生長發(fā)育帶來不利影響[29]。本試驗結(jié)果表明，在35周齡時，50%能量限飼組必需脂肪酸和不飽和脂肪酸含量顯著增加，可能由于能量限飼抑制一些脂酶活性使脂肪合成減少，促進(jìn)脂肪水解，脂肪酸含量升高。40周齡時，80%、70%、50%能量限飼組中必需脂肪酸、不飽和脂肪酸和飽和脂肪酸均顯著降低。40周齡階段能量需求較高，脂肪酸用以提供機體能量，不適合大幅度能量限飼。

4 結(jié)論

a.在肉種雞35周齡時，能量限飼提高蛋黃必需氨基酸含量。

b.在肉種雞35周齡時，50%能量限飼組必需脂肪酸和不飽和脂肪酸顯著升高；40周齡時各組脂肪酸均有所下降，不適宜大幅度能量限飼。

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Effect of different energy restriction levels on amino acids and fattyacids of broiler breeders during laying period

LIZhongyu,LIJianing,LIU Yang,TIAN Bo,XING Zelong,XU Liangmei
(School of Animal Sciences and Technology, NortheastAgricultural University, Harbin 150030, China)

This experiment studied the effect of different energy restriction levels on amino acids andfatty acids of Arbor Acres (AA) broiler breeders during the initial laying period. 240 AA broiler breeders (27weeks old) with similar body weights were randomly divide into four groups with six replicates per group and10 birds each replicate. The experiment was conducted when laying rate reached 5%. The birds in thecontrol group were fed the basal diet, and those in trial groups were fed the diets with 80%, 70% and 50%energy levels of the basal diet, respectively. During the experimental period, feed intake of each group wasrestricted and set the same for each day. The experiment ended at 40 weeks old of broiler breeders, andwent on for 14 weeks, determination of the amino acids and fatty acid content of eggs. ① The resultsshowed that the contents of essential amino acids in 50% energy restriction group in egg yolk of 35 weekold broiler breeder was significantly higher than that of control group (P＜0.05), the content of essentialamino acids in egg yolk of 80% and 70% energy restriction group was increased, but not significant (P＞0.05), and the content of Thr and Phe in 70%, 50% energy restriction group in egg yolk was significantlyincreased（P＜0.05）. Total free amino acids in egg yolk of each energy restriction groups were increased, butthe difference was not significant (P＞0.05); The content of essential amino acids and total free amino acidsin egg white had no significant difference (P＞0.05), but the contents of the Met in 70%, 50% energyrestriction groups were significantly increased（P＜0.05）. ② The content of essential fatty acids andunsaturated fatty acids in 50% energy restriction group in egg yolk of 35 week old broiler breeder wassignificantly higher than that of control group (P＜0.05); The contents of essential fatty acids, saturated fattyacids and unsaturated fatty acids of 40 weeks old broiler breeder in 70% and 50% energy restriction groupswere significantly decreased (P＜0.05). In summary, energy restriction of broiler breeders could increase thecontents of amino acids and fatty acids in eggs at 35 weeks, but could not be excessive energy restriction at40 weeks.

broiler breeder; energy restriction; amino acids; fatty acid

S816

A

1005-9369（2017）03-0031-09

時間2017-3-21 14:04:00[URL]http://kns.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20170321.1404.016.htm l

李仲玉,李佳凝,劉洋,等.不同能量水平限飼對肉種雞種蛋氨基酸及脂肪酸含量影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2017,48(3):31-39.

Li Zhongyu, Li Jianing, Liu Yang, et al. Effect of different energy restriction levels on amino acids and fatty acids of broilerbreeders during laying period[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2017, 48(3): 31-39. (in Chinese with Englishabstract)

2016-12-01

黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目（12531036）；哈爾濱市應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)項目（2016RAXXJ015）

李仲玉（1982-），女，實驗師，碩士，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail:potato_li@163.com

*通訊作者：徐良梅，教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向為家禽營養(yǎng)與肉質(zhì)。E-mail:xuliangmei@sina.com