王建棟/ 唐山市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所

鄭健穩(wěn) 張立穎/唐山市灤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

新囊寶（雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯(lián)滅活疫苗La Sota株 + HQ株）對1日齡白羽肉雞的免疫效果試驗(yàn)

王建棟/ 唐山市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所

鄭健穩(wěn) 張立穎/唐山市灤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

法氏囊病是一種急性高度接觸性傳染病，能引起雛雞的免疫抑制，破壞法氏囊上B淋巴細(xì)胞的形成，目前成為危害養(yǎng)雞業(yè)的主要疫病之一。由于法氏囊病毒的特殊性，強(qiáng)毒性疫苗引起的免疫抑制經(jīng)常發(fā)生，增加了本病的預(yù)防難度。新囊寶作為一種新型全病毒滅活疫苗，可以減少雞群排毒和環(huán)境污染，消除免疫抑制，為評價(jià)本疫苗在白羽肉雞的免疫效果，本試驗(yàn)分別對新囊寶疫苗免疫后抗體水平監(jiān)測及攻毒保護(hù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

一、材料及方法

1.試驗(yàn)用疫苗。新囊寶（雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯(lián)滅活疫苗La Sota株+HQ株）2016002批，由遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)，1日齡白羽肉雞頸背部皮下免疫0．2 mL。

新支剋星（雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)滅活疫苗）2016004批，遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)。

2.試驗(yàn)用雞。1日齡白羽肉雞，由沈陽耘墾牧業(yè)提供，按實(shí)驗(yàn)方案分組、免疫、采血及攻毒，其中攻毒試驗(yàn)雞在負(fù)壓隔離器內(nèi)喂養(yǎng)。

3.免疫程序。1日齡頸背部注射新囊寶（新城疫、傳染性法氏囊二聯(lián)滅活疫苗），每只雞0．2 ml，同時(shí)用新支 星每只雞1羽份氣霧免疫；7日齡，新流二聯(lián)滅活疫苗每只雞0．3 ml，新支剋星點(diǎn)眼。

4.抗體測定方法。免疫后按實(shí)驗(yàn)方案定期采血測定抗體。ND HI抗體測定按“中國獸藥典”附錄進(jìn)行；IBD微量中和試驗(yàn)參照“中國獸藥典”附錄，在96孔微量細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行，采用固定抗原稀釋血清的β微量法，抗原用200個(gè)TCID50/0．1ml，陰性血清的幾何平均效價(jià)應(yīng)≤1∶8。IBD定量瓊擴(kuò)試驗(yàn)按常規(guī)方法進(jìn)行，中央孔加抗原，周邊孔加倍比稀釋的血清，血清原液為20，血清1∶2稀釋為21。為了提高HI試驗(yàn)、中和試驗(yàn)或瓊擴(kuò)試驗(yàn)在不同實(shí)驗(yàn)條件下測定結(jié)果的可比性，使之逐步標(biāo)準(zhǔn)化，測定時(shí)一律采用了ND和IBD定量參照血清。

5.攻毒試驗(yàn)。按試驗(yàn)方案進(jìn)行攻毒 IBD攻毒試驗(yàn)時(shí)，免疫組、對照組各取10只采血測定中和抗體，經(jīng)口接種雞傳染性法氏囊病病毒BC6-85株強(qiáng)毒，每只0．2 ml（含2×104BID50），72 h后全部剖殺，檢查免疫組和對照組法氏囊病的病變，要求對照組雞至少9/10有病變。

6.實(shí)驗(yàn)方法。1日齡白羽肉雞分為2組，新囊寶免疫組7 000只，于1日齡每只注射二聯(lián)滅活疫苗0．2 ml；同時(shí)設(shè)不免疫對照組200只。1日齡起每隔7天采血20只，進(jìn)行新城疫HI抗體檢測和法氏囊的中和抗體檢測，并于28、42、56日齡時(shí)分別用BC6-85株強(qiáng)毒株進(jìn)行攻毒。免疫組囊體比的檢測，于7日齡、14日齡、21日齡、28日齡、35日齡各取5只雞稱體重后放血致死，取法氏囊，稱法氏囊重量，計(jì)算囊體比。（囊體比=囊重/體重X100）

二、結(jié)果

1.1 日齡白羽肉雞免疫二聯(lián)苗免疫效果。1日齡有母源抗體的白羽肉雞，按試驗(yàn)方案分別進(jìn)行二聯(lián)苗和活毒疫苗的免疫，且每隔7天采血測定抗體，結(jié)果見表1、2。

表1 1日齡免疫新囊寶后新城疫HI抗體監(jiān)測結(jié)果（單位Log2）

表2 1日齡免疫新囊寶后法氏囊中和抗體監(jiān)測結(jié)果（單位Log2）

2.1 日齡白羽肉雞免疫后免疫攻毒結(jié)果(見表3 )。

3.免疫組囊體比測定結(jié)果(見表4 )。

表3 BC6-85株強(qiáng)毒株攻毒保護(hù)率

表4 免疫組囊體比檢測結(jié)果

三、討論與分析

1．新囊寶免疫母源抗體陽性的1日齡白羽肉雞，前期表現(xiàn)與非免疫對照組相似，母源抗體水平緩慢下降，隨著時(shí)間的延長，免疫組產(chǎn)生主動(dòng)免疫，抗體水平迅速上升，到28日齡時(shí)已表現(xiàn)了較高抗體，至42日齡升至14．79 log2；從28日齡到56日齡，攻毒保護(hù)都在9/10以上，而對照組全部不保護(hù)，作為一種新型全病毒滅活苗，新囊寶表現(xiàn)了良好的免疫效果。由于采用1日齡注射，配合新支克星的噴霧使用，大大減化免疫程序，降低勞動(dòng)強(qiáng)度，更適合肉雞籠養(yǎng)模式的推廣使用。

2．免疫組囊體比測定數(shù)據(jù)表明，雞群法氏囊大小均無明顯變化，發(fā)育狀況良好，表明新囊寶作為一種滅活苗對雛雞法氏囊沒有任何損傷和毒害作用。雞法氏囊做為雞中樞免疫器官，在體液免疫中發(fā)揮著決定性作用，其健康發(fā)育對雞群在新城疫，傳支，腺病毒等其他疫苗的免疫應(yīng)答影響巨大。相比較傳統(tǒng)的雞法氏囊中等毒力活疫苗以及抗原抗體復(fù)合物疫苗，新囊寶的使用對于雞群后期免疫抑制的控制更有積極意義。

3．傳染性法氏囊炎病毒是一種無囊膜的病毒，對外界溫度，化學(xué)消毒劑抵抗力有很強(qiáng)的抵抗力。在傳統(tǒng)中等毒力以上活疫苗以及抗原抗體復(fù)合物疫苗的使用，雞群體外排毒造成了養(yǎng)殖環(huán)境的持續(xù)污染，并隨著病毒的變異，造成法氏囊病在一些養(yǎng)殖場循環(huán)發(fā)生，難以控制和消滅。新囊寶滅活苗的使用，減小了病毒在場內(nèi)循環(huán)擴(kuò)散，杜絕了對外環(huán)境的微生物污染，配之以科學(xué)免疫的程序和綜合性防控措施，可以逐漸實(shí)現(xiàn)雞場的法氏囊病毒凈化。

（略）