趙飛++高廣慧

摘 要：建立了紫外-可見分光光度法檢測(cè)水產(chǎn)品中二氧化硫殘留量的分析方法。方法采用紫外-可見分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為550 nm，以甲醛溶液作為吸收液，鹽酸副玫瑰苯胺溶液作為顯色劑，環(huán)境溫度控制在23 ℃時(shí)，顯色時(shí)間為20 min。亞硫酸鹽在0.4-2.0 μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.999，回收率在80.3-87.2%，精密度均小于3.0%。采用新建立的方法對(duì)水產(chǎn)品中的亞硫酸鹽含量進(jìn)行檢測(cè)，該方法重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高、毒性小，適用于水產(chǎn)品中二氧化硫殘留量的檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：紫外-可見分光光度法；二氧化硫；水產(chǎn)品

中圖分類號(hào)：O657.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-2064（2017）02-0227-02

Abstract：An ultraviolet-visible spectrophotometry method for the determination of sulfur dioxide in aquatic products was developed. Methods Ultraviolet-visible spectrophotometry， the detection wavelength was 550 nm， formaldehyde solution as absorption liquid， pararosaniline hydrochloric acid solution as chromogenic agent. The temperature was held constantly at 23 ℃， and the Chromogenic time was contoled at 20 min. sulfur dioxide has good linear relationship in the range of 0.4-2 μg with the correlation coefficient larger than 0.999. The recovery is between 80.3-87.2%， and the precision is below 3.0%. The method was used in the detecting of aquatic products， and the established method has been successfully applied to the determination of sulfur dioxide in aquatic products.

Key words：Ultraviolet-visible spectrophotometry； Sulfur dioxide； Aquatic products

亞硫酸鹽是一種較早就被廣泛使用的食品添加劑，可作為抗氧化劑、漂白劑和防腐劑，可抑制食物褐變，防止鮮蝦生成黑斑等，在酸性介質(zhì)中，也可作為抗菌劑使用[1]。GB 2760-2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定了各類食品中亞硫酸鹽的最大使用量（以二氧化硫殘留量計(jì)），若攝入過(guò)量的亞硫酸鹽，會(huì)造成胃腸障礙，引起頭疼，腎臟障礙等癥狀。

亞硫酸鹽的檢測(cè)方法通常采用顯色法、蒸餾法、離子色譜法[2，3]等，各種方法適用的食品類別不同。蒸餾法適用于色酒、葡萄糖糖漿、果脯；顯色法適用范圍更為廣泛，但該法中使用四氯汞鈉溶液作為吸收液，常溫下具有微小的揮發(fā)性，且配制時(shí)使用的氯化高汞為劇毒品，本研究中采用甲醛溶液作為吸收液，避免使用劇毒品，且具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，適用于水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的檢測(cè)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、材料與溶液配制

儀器：紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津公司）；渦旋混合器（德國(guó)IKA）；分析天平（德國(guó)賽多利斯）。

材料：二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液（質(zhì)量濃度為100mg/L，上海滬宇生物科技有限公司），氫氧化鈉（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），氨基磺酸銨（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），鄰苯二甲酸氫鉀（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），甲醛（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），0.2%鹽酸副玫瑰苯胺溶液（上海滬宇生物科技有限公司），乙二胺四乙酸二鈉鹽（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），亞鐵氰化鉀（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），乙酸鋅（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

溶液配制：甲醛吸收儲(chǔ)備液：稱取2.04g鄰苯二甲酸氫鉀，少量水溶解，加入20mL0.05mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液、5.5mL甲醛，用水定容至100mL，搖勻；甲醛吸收使用液：用水將甲醛吸收儲(chǔ)備液稀釋100倍即得，臨用現(xiàn)配；0.05mol/L乙二胺四乙酸二鈉鹽溶液：稱取1.8612g乙二胺四乙酸二鈉鹽，用新沸后冷卻水溶解并定容至100mL，搖勻；氨基磺酸銨溶液：稱取0.30g氨基磺酸銨，少量水溶解，加入3mL1mol/L氫氧化鈉溶液，用水定容至100mL，搖勻；1mol/L氫氧化鈉溶液：稱取4.00g氫氧化鈉，少量水溶解，并用水定容至100mL，搖勻；鹽酸副玫瑰苯胺使用液：移取13mL0.2%鹽酸副玫瑰苯胺，加入30mL濃磷酸、12mL濃鹽酸，用水定容至100mL，搖勻；亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用水溶解并定容至100mL，搖勻；乙酸鋅溶液：稱取22g乙酸鋅，用水溶解，加入3mL冰醋酸，并用水定容至100mL，搖勻；2μg/mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液：精密吸取二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2mL，用甲醛吸收使用液稀釋定容至20mL，搖勻待用。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)系列的配制

分別精密移取2μg/mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)使用液0、0.2、0.4、 0.6、0.8、1.0mL于試管中，以甲醛吸收液定容至10mL，搖勻，加入0.5mL氨基磺酸銨溶液，搖勻，加入1.0mL1mol/L氫氧化鈉溶液，搖勻待用；取另一套試管，分別加入0.5mL鹽酸副玫瑰苯胺使用液，將第一套管中溶液快速倒入第二套管中，立即蓋塞并搖勻，23℃條件下20min測(cè)定。

1.3 樣品前處理

（1）提取準(zhǔn)確稱取混合均勻的水產(chǎn)品樣品5-10g（精確至0.01g），置于100mL容量瓶中，加入相當(dāng)于20mL的甲醛吸收液，浸泡4h以上，加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液各3mL，搖勻，用水稀釋定容至刻度，搖勻并用定量濾紙過(guò)濾待用。

（2）顯色：精密移取上述濾液0.5-5mL于試管中，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)系列配制中“以甲醛吸收液定容至10mL”至“23℃條件下20min測(cè)定”。

1.4 紫外-可見分光光度計(jì)條件

檢測(cè)波長(zhǎng)550nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收液的選擇

本文中采用甲醛吸收液代替國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.34《食品中亞硫酸鹽的測(cè)定》方法中采用四氯汞鈉吸收液提取樣品中的二氧化硫，其目的在于避免使用劇毒試藥氯化高汞，以及避免各單位采購(gòu)、領(lǐng)取、使用和廢液處理中帶來(lái)的諸多不便；采用甲醛吸收液進(jìn)行亞硫酸鹽檢測(cè)的原理是樣品在酸性條件下釋放出二氧化硫，被甲醛吸收液中甲醛結(jié)合形成羥甲基磺酸加成物，并與顯色劑鹽酸副玫瑰苯胺形成紫紅色絡(luò)合物，通過(guò)紫外分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。

2.2 顯色條件的優(yōu)化與控制

鹽酸副玫瑰苯胺顯色法檢測(cè)亞硫酸鹽含量中，顯色反應(yīng)受溫度影響較大，溫度較低時(shí)，顯色反應(yīng)較慢，相同顯色時(shí)間較溫度稍高時(shí)的靈敏度低；溫度過(guò)高時(shí)，顯色反應(yīng)快，有效測(cè)定待測(cè)液吸光度值的時(shí)間較短，重復(fù)性較差，因此在均衡考慮顯色速度與顯色時(shí)間兩者，通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)試表明，在23℃下，顯色20min較優(yōu)，且標(biāo)準(zhǔn)系列溶液同樣品溶液應(yīng)在相同條件下顯色，并控制顯色時(shí)間一致才能保證檢測(cè)的準(zhǔn)確度和精密度。

2.3 方法的線性

在相同的檢測(cè)條件下，依次測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，得到相應(yīng)的響應(yīng)值，以響應(yīng)值為縱坐標(biāo)、含量為橫坐標(biāo)作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性為y=0.0342x-0.0006，相關(guān)系數(shù)為0.9993，線性關(guān)系較好。如圖1所示。

2.4 方法的精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn)

稱取空白樣品六份，分別加入一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按樣品前處理方法進(jìn)行處理并檢測(cè)，分別計(jì)算回收率和精密度，得出回收率在80.3%-87.2%之間，RSD小于3.0%，測(cè)定結(jié)果見表1。

3 結(jié)語(yǔ)

本文采用紫外可見分光光度計(jì)檢測(cè)水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的含量，采用甲醛吸收液代替四氯汞鈉作為吸收液，避免使用劇毒試藥，同時(shí)也避免了劇毒試藥采購(gòu)、使用等方面的一系列問(wèn)題；同時(shí)方法中需要注重的細(xì)節(jié)也一一進(jìn)行詳細(xì)的闡述；且本文建立的方法具有較好的回收率、精密度，線性關(guān)系良好，適用于水產(chǎn)品中亞硫酸鹽的檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)：

[1]李雪蓮，楊麗等.食品中亞硫酸鹽研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2015，11：34-37.

[2]黃慧玲，王玉健等.食品中亞硫酸鹽的離子色譜法測(cè)定[J].分析試驗(yàn)室，2009，08：15-18.

[3]宋蓮芳.食品中亞硫酸鹽的離子色譜法測(cè)定分析[J].生物技術(shù)世界，2016，2：57.