劉麗萍++朱金瑤

摘要：以大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌為供試菌，通過濾紙片法比較不同溶劑和干燥方法對(duì)桃葉提取物抑菌作用的影響。結(jié)果表明，不同干燥方法獲得的桃葉提取物對(duì)3種供試菌都具有較好的抑菌效果，以先曬后陰法對(duì)大腸桿菌的抑菌效果最好，抑菌圈直徑最大可達(dá)19.3 mm；供試菌的抑菌效果隨著菌懸液濃度的降低逐漸增大，對(duì)大腸桿菌最顯著；不同溶劑的提取物對(duì)3種供試菌都有抑制作用，但抑菌效果不同，3種供試菌最佳的提取溶劑都為60%的乙醇。

關(guān)鍵詞：桃葉；提取物；抑菌作用

中圖分類號(hào)：TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）21-5543-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.21.025

Study on Antimicrobial Effect of Extracts From Peach Leaf

LIU Li-ping， ZHU Jin-yao

（College of Life Science and Technology， Longdong University， Qingyang 745000， Gansu， China）

Abstract：In order to investigate antimicrobial effect of peach leaf， active components of peach leaf were extracted by different solvents. With Escherichia coli，Staphylococcus aureus， Bacillus subtilis as test samples，the influences of different solvent and drying method on antimicrobial effect were studied by using filter paper method. The results showed that，extracts of peach leaf by different drying method all had good inhibitory effect to 3 test bacteria，but the best drying method for 3 bacteria were different，the inhibition diameter of Escherichia coli was 19.3 mm. The antimicrobial effect was gradually increased with the decrease of suspension concentration，and Escherichia coli had the most significant effect. Extracts of different solvent all had inhibitory influence on 3 test bacteria but the antimicrobial effect was different，and the optimal extraction solvent was 60% ethanol.

Key words： peach leaf； extracts； antimicrobial effect

桃葉系薔薇科植物桃的葉子，桃樹在我國廣泛種植，是一種來源廣泛的天然可再生資源。桃葉主要成分是糖甙、柚皮素、奎a寧酸、番茄紅素、鞣質(zhì)和扁桃葉酸酰胺及少量腈甙[1-3]。桃葉具有抗過敏、抗菌、消炎、止痛、通便的作用[4-6]，所含的有效成分在現(xiàn)代食品、醫(yī)藥行業(yè)具有廣泛的用途。目前對(duì)桃葉的報(bào)道主要集中在桃葉有效成分分析、殺滅陰道滴蟲、殺蚊活性等方面[7-10]，抑菌研究方面還沒有相關(guān)的報(bào)道。本研究以食品中的常見污染菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌為供試菌，采用桃葉提取物對(duì)其進(jìn)行抑菌活性試驗(yàn)，以期為純天然的食品防腐保鮮劑與植物源醫(yī)藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

桃葉采自隴東學(xué)院附近多年生桃樹。菌種為大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌。

1.2 方法

1.2.1 桃葉的干燥 為降低桃葉的含水量，便于保存和提取，將采集的新鮮桃樹葉采用40 ℃熱風(fēng)干燥、陰干、先曬后陰和曬干4種干燥方法處理桃葉，粉碎后置于燒杯中備用。

1.2.2 桃葉提取物的制備

1）不同干燥方法提取物制備。分別稱取4份質(zhì)量為10 g經(jīng)陰干、曬干、先曬后陰和40 ℃熱風(fēng)烘干的桃葉于燒杯中，以60%乙醇為溶劑，液料比為 10∶1、在80 ℃條件下浸提1.5 h，浸提液用多層紗布過濾，濾液即為浸提液，濃縮干燥后備用。

2）不同溶劑提取物制備。取40 ℃烘干的桃葉10 g，取石油醚、乙酸乙酯、丙酮、60%乙醇、95%乙醇和蒸餾水6種不同極性的溶劑在液料比10∶1、溫度80 ℃下分別浸提桃葉粉1.5 h，收集濾液，濃縮干燥后備用。在測定抑菌活性前將6種提取物用無菌水溶解，配成質(zhì)量濃度為10 g/L的溶液，備用。

1.2.3 抑菌活性測定 供試菌株懸浮液的制備：將供試菌接種于固體肉湯培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24 h，用接種針挑取菌塊加入到無菌生理鹽水中，調(diào)節(jié)菌懸液濃度。將供試菌濃度設(shè)定為1×105～6×105、1×106～6×106、1×107～6×107 cfu/mL 3個(gè)梯度。

抑菌試驗(yàn)：采用濾紙片法，用打孔器將濾紙片打成直徑為8 mm的圓片，濾紙片經(jīng)高壓滅菌后，在桃葉提取物溶液及空白對(duì)照的生理鹽水中浸泡30 min，瀝去多余的試液，用無菌鑷子將濾紙片置于涂好菌液的培養(yǎng)基上。每皿4片，細(xì)菌經(jīng)37 ℃培養(yǎng)24 h后，量取抑菌圈直徑，作為桃葉抑菌活性指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

2.1 桃葉不同干燥方法對(duì)提取液抑菌活性的影響

桃葉分別經(jīng)過陰干、曬干、先曬后陰及烘干4種方法干燥粉碎，采用60%乙醇浸提有效成分，控制供試菌濃度為1×106～6×106 cfu/mL，并以細(xì)菌為指示菌測定抑菌活性，結(jié)果見表1。從表1可知，4種干燥方法獲得的桃葉提取物對(duì)枯草芽孢桿菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均具有較好的抑制作用，且不同干燥方法桃葉提取物的抑菌作用不同。對(duì)金黃色葡萄球菌，采用烘干法桃葉提取物的抑菌效果最好，對(duì)其他兩種菌則采用先曬后陰法桃葉提取物的抑菌效果最好。

2.2 不同濃度菌懸液對(duì)桃葉抑菌活性的影響

將桃葉烘干后，用60%乙醇浸提有效成分，以細(xì)菌為指示菌測定抑菌活性，考察不同濃度菌懸液對(duì)抑菌活性的影響，分別將供試菌的菌懸液濃度控制在1×105～6×105、1×106～6×106、1×107～6×107 cfu/mL，結(jié)果如表2所示。從表2可知，隨著菌懸液濃度的降低，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的抑菌圈直徑逐漸增大，抑菌效果逐漸增強(qiáng)，當(dāng)菌懸液濃度降低到1×105～6×105時(shí)，抑菌圈直徑達(dá)23.3 mm，抑菌效果最好。對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌，隨著菌懸液濃度的降低，抑菌圈直徑有一定程度的變化，但變化很小。

2.3 不同溶劑對(duì)桃葉抑菌活性的影響

為了考察不同溶劑對(duì)桃葉抑菌活性的影響，采用烘干桃葉法獲得不同溶劑的提取液，控制菌懸液濃度為1×106～6×106測定抑菌效果，結(jié)果見表3。由表3可知，不同溶劑獲得的提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌都有抑制效果，60%乙醇、90%乙醇和蒸餾水提取物對(duì)3種供試菌的抑菌效果最好，石油醚和丙酮提取物的抑菌效果最差。不同溶劑的提取物對(duì)大腸桿菌的抑菌效果較為顯著，對(duì)金黃色葡萄球菌次之，對(duì)枯草芽孢桿菌的抑菌效果較差，說明不同溶劑桃葉提取物對(duì)革蘭氏陰性菌的抑菌效果比陽性菌好。桃葉不同溶劑提取物對(duì)同一種菌的抑菌效果也有較大差別，但最佳的提取溶劑均為60%乙醇。

3 小結(jié)與討論

本研究通過對(duì)桃葉提取物進(jìn)行抑菌活性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)桃葉的各種溶劑提取物在一定程度上具有抑制細(xì)菌生長的作用，特別是60%乙醇提取物抑菌效果顯著，說明桃葉中含有抑菌活性化合物。試驗(yàn)結(jié)果表明，桃葉提取物對(duì)食品常見的有害菌有抑菌作用，可進(jìn)一步將提取物中的抑菌活性成分分離出來，對(duì)用于食品防腐保鮮與植物源藥物研究具有一定意義。

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