李小霞+肖仲久+姜仕敏

摘要：為了研究不同藥劑對(duì)山茶枯斑病菌的毒力作用，對(duì)山茶枯斑病的防治提供幫助。采用生長(zhǎng)速率法進(jìn)行了試驗(yàn)，測(cè)定了20%井.唑.多菌靈、75%百菌清、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素、68%精甲霜.錳鋅和35%快克5種藥劑在不同濃度下對(duì)山茶枯斑病病菌的影響。結(jié)果表明：75%的百菌清對(duì)病原菌的抑菌的抑制效果最好，EC50為145.6829 μg/mL；其次是20%井唑多菌靈，EC50為257.9576 μg/mL；35%快克的抑菌效果最差，EC50為13563.7054 μg/mL。

關(guān)鍵詞：山茶；枯斑病病菌；殺菌劑；毒力

中圖分類號(hào)：S685文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：16749944（2017）03011102

1引言

山茶（Camellia japonica L.）是山茶花科的常綠灌木，又名曼陽(yáng)羅樹(shù)、紅茶花等，小喬木或灌木，葉卵形或橢圓形，邊有細(xì)鋸齒，革質(zhì)，表面亮綠色?；ò甓?，呈圓形，花的顏色多樣，花期因品種不同而異。山茶花具有觀賞價(jià)值和藥用價(jià)值[1]。

山茶枯斑病菌，由交鏈格孢菌（Alternaria alternata）侵染山茶葉片而引起。病斑癥狀多發(fā)生于葉面，由暗綠色斑紋擴(kuò)大成不規(guī)則大斑，顏色由褐色變?yōu)楹谏?，病斑擴(kuò)散到整個(gè)葉片，從而引起大落葉。因此本試驗(yàn)通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定方法測(cè)定了5種殺菌劑對(duì)山茶枯斑病病菌的毒力，旨在為山茶枯斑病病菌的防治提供理論依據(jù)。

2材料與方法

2.1菌種來(lái)源

山茶枯斑病樣本分別采自貴州遵義桐梓縣松坎鎮(zhèn)、正安縣土坪鎮(zhèn)及遵義市區(qū)鳳凰山、三閣公園，采集有山茶枯斑病典型癥狀的山茶葉部樣本經(jīng)分離、純化和致病性鑒定[2]，最終確定是由交鏈格孢菌（Alternaria alternata）引起的，將其置于4℃的環(huán)境下保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2供試藥劑

毒力測(cè)定所采用的5種實(shí)驗(yàn)藥劑名稱、劑型、生產(chǎn)廠家見(jiàn)表1。

2.3試驗(yàn)方法

以大田施用濃度為參考值，按有效成分從高濃度到低濃度逐步測(cè)試，每種藥劑選定5個(gè)濃度進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)處理重復(fù)3次，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)得出殺菌劑的濃度梯度如表2。然后將供試菌株接種于PSA培養(yǎng)基上，25 ℃培養(yǎng)5 d，待菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿后，用無(wú)菌的打孔器打取直徑

為5 mm的菌餅備用[3]。

采用生長(zhǎng)速率測(cè)定法，測(cè)定致病菌的菌絲在上述5種藥劑中的敏感性，從而篩選高效的藥劑。將上述藥劑分別配制成所需濃度10倍的藥劑，取1 mL加入9 mL約50 ℃的PSA中混勻，倒入培養(yǎng)皿中制成含藥平板，中央接入直徑為5 mm的菌餅，27 ℃下培養(yǎng)3 d后測(cè)量菌落直徑，計(jì)算抑菌率[4，5]：

抑菌率（%）=（對(duì)照菌落直徑-5）-（處理菌落直徑-5）（對(duì)照菌落直徑-5）×100

將抑菌率換算成抑制幾率值，以設(shè)定的藥劑濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，抑制幾率值為縱坐標(biāo)，作回歸曲線，求得殺菌劑對(duì)該菌的抑制回歸方程Y=A+BX和抑制濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)（r）。EC50值與藥劑毒力大小成反比，EC50值越小，說(shuō)明毒力越強(qiáng)[6～8]。試驗(yàn)結(jié)果如表3。

4試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明（圖1，表2），5種藥劑對(duì)山茶枯斑病菌菌絲生長(zhǎng)均有一定的抑制作用，5種藥劑的EC50值結(jié)果顯示，35%快克菌靈最大，13563.7054ug/ml，75%百菌清最小，為145.6829ug/ml。綜合殺菌劑的EC50值，對(duì)山茶枯斑病病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用75%百菌清最強(qiáng)，其次是20%井.唑.多菌靈，35%快克最弱。

5討論與結(jié)論

本試驗(yàn)以5種藥劑對(duì)山茶枯斑病病原菌進(jìn)行了毒力測(cè)定，這5種藥劑對(duì)該病原菌都有一定的抑制作用，但抑制效果不同。通過(guò)本試驗(yàn)，可以初步確定75%百菌清和20%井唑多菌靈者兩種殺菌劑為防治山茶枯斑病的高效藥劑。在綜合考慮病害防治成本的前提下，應(yīng)該合理確定田間使用濃度，本研究是在室內(nèi)離體條件下進(jìn)行的，但在試驗(yàn)過(guò)程中得到的試驗(yàn)數(shù)據(jù)是否可以運(yùn)用于實(shí)際生產(chǎn)中，還待進(jìn)行田間試驗(yàn)明確供試藥劑對(duì)山茶枯斑病的防效，為生產(chǎn)上山茶枯斑病防治藥劑的選擇提供理論依據(jù)。表2不同殺菌劑對(duì)山茶枯斑病菌的室內(nèi)測(cè)定

藥劑毒力回歸方程Y=A+BX EC50/（μg/mL）相關(guān)系數(shù)/r20%井唑多菌靈y=0.4840+1.8726x257.9576r=0.914975%百菌清

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