趙麗琪 楊敬平 徐喜媛 王秀香 常欣欣 趙曉靜

溶血磷脂對(duì)膿毒癥治療作用的研究進(jìn)展

趙麗琪1楊敬平2徐喜媛2王秀香2常欣欣1趙曉靜1

膿毒癥(Sepsis)是宿主對(duì)嚴(yán)重感染或創(chuàng)傷免疫應(yīng)答失調(diào)而導(dǎo)致的多臟器功能障礙的臨床癥候群，其關(guān)鍵是全身性過度的炎癥反應(yīng)及廣泛的免疫抑制[1]。Sepsis的根本發(fā)病機(jī)制尚不明，網(wǎng)絡(luò)炎癥效應(yīng)、基因的多態(tài)性表型、失控的免疫反應(yīng)、及宿主對(duì)不同病原及毒素不同的反應(yīng)等參與發(fā)病[2]。盡管美國(guó)胸科醫(yī)師協(xié)會(huì)(ACCP)和美國(guó)危重癥醫(yī)學(xué)會(huì)(SCCM)對(duì)Sepsis制定了隨時(shí)更新的指南[3]，指南指導(dǎo)的治療包括早期液體復(fù)蘇、活化 C蛋白、加強(qiáng)胰島素和腎上腺功能替代治療以及一些新的治療靶點(diǎn)，但發(fā)病率和死亡率仍處于較高水平[1-3]。因此，加強(qiáng)對(duì)Sepsis發(fā)病機(jī)制的探索，研究具有拮抗Sepsis的藥物或治療措施，對(duì)救治膿毒患者具有重要的意義。溶血磷脂(Lysophospholipids，LPs)是磷脂類信號(hào)小分子家族成員，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)及存活等的生物活性作用，包括溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid，LPA)、鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate，S1P)和溶血磷脂酰膽堿(Lysophosphatidylcholine，LPC)等，它們來源于激活的血小板及包括紅細(xì)胞在內(nèi)的多種類型細(xì)胞。溶血磷脂可能參與Sepsis的發(fā)病過程，可成為潛在的Sepsis治療靶點(diǎn)[4-5]。

一、溶血磷脂酸(Lysophosphatidicacid，LPA)在Sepsis中的作用

溶血磷脂酸(LPA)是一種自然產(chǎn)生的內(nèi)源性炎癥磷脂，它參與了多種肺部疾病的發(fā)生包括哮喘、急性肺損傷和肺纖維化[6]。從生化角度來講，LPA可以通過與它的G蛋白偶聯(lián)受體LPA1-6相結(jié)合，從而激活下游的轉(zhuǎn)錄因子(包括核因子-κB)和第二信使(如p38 MAPK)的活性[7]。相對(duì)于外源性LPA來講，內(nèi)源性LPA含有不同的脂肪酸鏈，如18:0，18:2，20:4，從而發(fā)揮不同的作用。LPA還可以通過一些系統(tǒng)的γPPAR受體來傳導(dǎo)信號(hào)通路。在這些受體中，LPA1被認(rèn)為是在整個(gè)LPA信號(hào)通路中最活躍的，它在肺部系統(tǒng)的促炎反應(yīng)和促纖維化反應(yīng)中具有重要的作用[8]。有研究表明[9]，在博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化小鼠模型中，肺泡上皮細(xì)胞凋亡增加，而成纖維細(xì)胞存活率則逐漸升高，并且驅(qū)動(dòng)纖維化表型因子的活化，相似的研究也表明，暴露于博來霉素的小鼠模型中，阻塞LPA信號(hào)通路可以減少炎癥后的纖維化，而在LPA1基因敲除的動(dòng)物模型中，肺血管的損傷以及肺泡表面細(xì)胞凋亡蛋白酶-3的活性均下降，說明LPA1基因敲除動(dòng)物模型的生存優(yōu)勢(shì)[10]。近幾年有學(xué)者發(fā)現(xiàn)一種新型LPA1-3受體阻斷劑：Ki16425。它可以減弱p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的磷酸化以及LPS的暴露，這可能反過來減少下游細(xì)胞的死亡，并激活轉(zhuǎn)錄信號(hào)[11]，這些研究提示LPA受體拮抗劑很可能成為上述疾病治療的潛在方法。有研究證實(shí)[12]細(xì)菌松動(dòng)導(dǎo)致的手術(shù)失敗通常與Sepsis相關(guān)，在有LPA參與的條件下，能夠促進(jìn)鈦表面成骨細(xì)胞的成熟，并有效阻止金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)和在鈦層表面的附著，有效預(yù)防了鈦置入相關(guān)Sepsis 的發(fā)生，大大的擴(kuò)展了LPA在不同原因引起的Sepsis的應(yīng)用。

二、溶血磷脂酰膽堿(Lysophosphatidylcholine，LPC)在Sepsis 中的作用

LPC是由細(xì)胞膜上的卵磷脂被磷脂酶A2(PLA2)水解而產(chǎn)生的的衍生物，?；湹娘柡投燃伴L(zhǎng)度決定分子種類的區(qū)別[13]。PLA2的激活是產(chǎn)生多種促炎脂質(zhì)時(shí)的限速過程，并與細(xì)胞對(duì)多種刺激的反應(yīng)有關(guān)，包括應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。磷脂的氧化修飾與炎癥相關(guān)，其代謝產(chǎn)物越來越多地被認(rèn)為是慢性炎癥性疾病和自身免疫性疾病發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵因素[13]。不同形式的PLA2中，分泌形式的PLA2(sPLA2)是由巨噬細(xì)胞以及炎癥和損傷組織部位的細(xì)胞釋放，促進(jìn)胞外生成的PLC炎癥作用，包括上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子和生長(zhǎng)因子，增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的趨化性，以及巨噬細(xì)胞的活性[14]。安元均等[15]發(fā)現(xiàn)，使用LPC治療性給藥能夠有效降低采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)Sepsis模型小鼠的死亡率。LPC可以產(chǎn)生至少兩種不同的抗炎機(jī)制：促進(jìn)細(xì)菌的清除和抑制脂多糖(LPS)的作用，這種雙重作用機(jī)制使LPC非常適合用于治療Sepsis。中性粒細(xì)胞功能障礙導(dǎo)致入侵體內(nèi)的微生物不能被吞噬和殺滅，導(dǎo)致Sepsis發(fā)生,并與Sepsis的死亡率有關(guān)。中性粒細(xì)胞是介導(dǎo)LPC促進(jìn)體內(nèi)消炎過程的靶細(xì)胞，LPC可以有效地促進(jìn)體內(nèi)細(xì)菌的清除，也可以直接增強(qiáng)體外中性粒細(xì)胞的殺菌活性,而且可以阻斷CLP引起的中性粒細(xì)胞失活[16]。

Autotaxin ( ATX)酶最初發(fā)現(xiàn)為人類黑色素瘤A2058細(xì)胞釋放的一種自分泌運(yùn)動(dòng)刺激因子，是一種大小為125×103的泌型糖蛋白，它具有溶血磷脂酶 D (Lysophospholipase D,Lyso PLD)的活性，可以將LPC水 解 成LPA。ATX水解LPC產(chǎn)生的LPA是LPA的主要來源，ATX與LPA 組成 ATX-LPA生物軸發(fā)揮生物學(xué)功能[17]。在CLP小鼠模型中，增加LPC相關(guān)物質(zhì)(即磷脂酰膽堿(PC)和LPA)的血漿濃度，增強(qiáng)參與血漿調(diào)節(jié)LPC濃度限速酶的活性， 均可降低ATX、LPC及SPLA2濃度，減少清蛋白的活性，而PC、LPA及LPCAT濃度均增加，LPC濃度高的小鼠可有效防止膿毒血癥的發(fā)生[18]。表明LPC對(duì)Sepsis具有防御作用，提高LPC水平可能成為Sepsis治療新靶點(diǎn)。

三、鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate，S1P)在Sepsis 中的作用

S1P是原生質(zhì)膜上鞘脂類的代謝物，主要存在于紅細(xì)胞、血小板、淋巴液、血液等細(xì)胞和體液中，參與調(diào)解與Sepsis發(fā)病機(jī)制相關(guān)的多種生理過程,包括調(diào)解抗原呈遞、淋巴細(xì)胞的遷移及維持血管的完整性[19]。Sepsis發(fā)病時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞的改變，包括血管通透性增加、炎癥血栓的增多以及炎癥通路的形成與器官衰竭的病理生理過程有關(guān)，而這些內(nèi)皮細(xì)胞改變均可被S1P調(diào)節(jié)。有研究報(bào)道，在膿毒血癥患者中血清S1P的濃度顯著下降，且下降的程度與膿毒血癥病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。因此，測(cè)定血清中S1P的濃度來檢測(cè)膿毒血癥的嚴(yán)重程度和費(fèi)時(shí)費(fèi)力的SOFA評(píng)分的作用相當(dāng)[20]。血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性、細(xì)胞之間的聯(lián)系程度與Sepsis的嚴(yán)重程度緊密相關(guān)。在微血管中的屏障功能調(diào)節(jié)器是小G蛋白R(shí)ac和Rho,他們都受到SIP的調(diào)控。Rac的活性是由S1P的G蛋白偶聯(lián)受體(S1PR1)通過促進(jìn)皮層肌動(dòng)蛋白的裝配來調(diào)節(jié)，表明S1PR1 在維持內(nèi)皮屏障功能也發(fā)揮了作用[21]。近期學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了磷酸化FTY720(FTY720-p)[22]，也是一種S1PR1的激動(dòng)劑。在S1PR1的介導(dǎo)下，它對(duì)肺屏障的保護(hù)作用比S1P和FTY720更強(qiáng)。研究發(fā)現(xiàn)S1P屏障穩(wěn)定劑可以提高脂多糖誘導(dǎo)的肺損傷等Sepsis動(dòng)物模型的生存率。上述研究表明SIP可作為治療Sepsis的一個(gè)潛在方法[23]。但目前對(duì)控制S1P在血清中濃度平衡的控制技術(shù)并不成熟，最有前途的方法可能是針對(duì)S1P受體調(diào)節(jié)來進(jìn)一步調(diào)控膿毒血癥的治療方向。

綜上所述，溶血磷脂既可以作為第二信使發(fā)揮作用，又可以作為第一信使與其特異性受體結(jié)合參與多種生物學(xué)過程。它們作為胞外信號(hào)分子通過G蛋白偶聯(lián)受體而發(fā)揮廣泛的生物學(xué)功能，包括參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、存活與凋亡等。目前LPA及 LPC、S1P在Sepsis發(fā)病中的作用研究較少，其治療作用的研究還在探索階段。現(xiàn)有的研究表明溶血磷脂酸及其受體在sepsis治療方面展現(xiàn)出良好的效果，可能為探討Sepsis預(yù)防和治療提供新的方向。

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2017-06-06]