明寶鋼，張琳琳

頂空氣相色譜法測定奧扎格雷鈉中殘留溶劑

明寶鋼，張琳琳

目的 建立奧扎格雷鈉中甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷殘留量的測定方法。方法 采用DB-5毛細管色譜柱(30 m×0.532 mm，1.0 μm)，載氣為氮氣，柱溫采取程序升溫，初始溫度40 ℃，保持4 min，然后以25 ℃/min的速率升至150 ℃，保持4 min；頂空進樣，進樣口溫度200 ℃；氫火焰離子化檢測器(FID)，檢測器溫度220 ℃。結果 甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷的線性范圍分別為0.26～0.39、0.41～0.62、0.41～0.62、0.071～0.047、4.75～7.12 μg/mL，平均回收率(n=9)分別為101.3%、98.2%、95.4%、95.8%、95.4%。結論 該方法簡便，靈敏度高，重復性好，結果準確，適合奧扎格雷鈉中有機溶劑殘留量的測定。

奧扎格雷鈉；氣相色譜法；頂空進樣；殘留溶劑

0 引言

奧扎格雷鈉(Sodium ozagrel)為血栓素A2(TXA2)合成酶抑制劑，具有抗血小板凝聚和擴張血管的作用。依據(jù)本品的合成工藝路線，在合成過程中可能使用的有機試劑為甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷。根據(jù)中國藥典2010年版二部附錄ⅤE的要求[1]，參考相關文獻[2-9]，本文采用氣相色譜頂空進樣法對上述溶劑的殘留情況進行了測定。所建方法專屬性強，重復性好，結果可靠，可用于奧扎格雷鈉中甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷的殘留量測定。

1 材料

氣相色譜儀(日本島津公司 GC-2010)；頂空自動進樣器(日本島津公司 AOC-5000)；高純氮(純度>99.9%)；電子分析天平(瑞士sartorius公司，CP225D)。奧扎格雷鈉原料來自A企業(yè)，批號：201201、201202、201203。甲醇為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品儲備液的制備 精密稱取甲醇、無水乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷各約0.3、0.5、0.5、0.06、0.006 g，置 100 mL 量瓶中，加少量二甲基甲酰胺使溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻，即得對照品儲備液。

2.1.2 對照品溶液的制備 精密量取1、2、5、10、15、20、30 mL，分別置100 mL量瓶中，加水溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液各 5 mL，分別置20 mL頂空瓶中密封，即得對照品溶液①、②、③、④、⑤、⑥、⑦。

2.1.3 供試品溶液的制備 精密稱取供試品約0.5 g，置 20 mL 頂空瓶中，精密加入水溶液5 mL使溶解，密封，即得。

2.1.4 空白溶液的制備 精密量取水5 mL，置 20 mL頂空瓶中，密封，即得。

2.2 色譜條件 采用DB-5 毛細管色譜柱(30 m×0.053 mm，1.0 μm)；FID 檢測器；載氣為氮氣，流速為 1.0 mL/min，采取程序升溫，初始溫度 4 ℃，保持4 min，然后以25 ℃/min的速率升至200 ℃，保持4 min；進樣口溫度 200 ℃；檢測器溫度220 ℃；頂空瓶平衡溫度為60 ℃，平衡時間為30 min，定量環(huán)溫度為60 ℃。按上述條件，取空白溶液、對照品溶液、供試品溶液進樣，記錄色譜圖，見圖1。在空白溶液色譜中，甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷主峰的保留時間處沒有干擾峰出現(xiàn)；對照品溶液④色譜中各主峰的理論塔板數(shù)均不低于8 000，分離度均>1.5。

圖1 奧扎格雷鈉色譜圖

2.3 線性關系考察 取“2.1.2”項下的系列對照品溶液，進樣。以峰面積為縱坐標、對照品溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線，計算得甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷的回歸方程見表1。

表1 線性方程與線性范圍

2.4 重復性試驗 按照“2.1.3”項下方法平行制備 6 份供試品溶液，頂空進樣，結果表明，該方法重復性良好，具體結果見表2。

表2 重復性試驗結果(%)

注：—為未檢出

2.5 檢測限與定量限測定 將對照品溶液④逐步稀釋，精密量取5 mL，置20 mL頂空瓶中，密封，頂空進樣，記錄色譜圖，所得圖譜計算甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷色譜峰信噪比，測得甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷的檢出限分別為2.5、2、10、60、120 ng/mL (信噪比為3∶1)，定量限分別為6、4、50、120、240 ng/mL (信噪比為10∶1)，結果見表3。

2.6 回收率試驗 精密稱取甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷適量，照對照品溶液④的配制方法，分別配制相當于其80%、100%、120%的溶液各3份，置100 mL量瓶中。精密稱取供試品約0.5 g，共9 份，分別置20 mL 頂空瓶中，分別精密加入上述低、中、高3 個濃度的對照品溶液5 mL，密封，搖勻，按上述氣相色譜條件測定，記錄色譜圖。計算得甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷的平均回收率(n=9)分別為101.3%、98.2%、95.4%、95.8%和95.4%；RSD分別為1.4%、1.4%、1.5%、3.4%和1.4%，結果見表4。

2.7 樣品殘留溶劑測定 按照“2.4”項下方法制備供試品溶液，頂空進樣，結果3批樣品均未檢出甲醇、二氯甲烷和三氯甲烷，三批樣品中乙醇和乙醚分別為0.05%和0.001%。

表3 檢出限及定量限試驗結果(μg/mL)

3 討論

3.1 實驗中對頂空溫度及平衡時間進行了篩選，頂空溫度分別考察了50、60、70 ℃；平衡時間考察了15、30、45 min。試驗結果顯示，頂空溫度60 ℃，平衡時間30 min，頂空瓶中氣液兩相中的甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和三氯甲烷可充分平衡，峰面積適宜，故選擇頂空溫度60 ℃，平衡時間30 min。

表4 回收率試驗結果(mg/L)

注：乙醇測得量=[(檢出量-稱樣量)×0.05%]；乙醚測得量=[(檢出量-稱樣量)×0.001%]

3.2 生產工藝中還涉及二甲基甲酰胺和四氯化碳等有機溶劑。試驗中發(fā)現(xiàn)以水為溶劑時，頂空溫度提高至100 ℃，或以水-二甲亞砜(9∶1)為溶劑，頂空溫度提高至120 ℃，二甲基甲酰胺均無法采用頂空法進行測定；四氯化碳采用FID檢測器響應值過低，對照品溶液的響應值剛剛達到檢出限，故上述兩種殘留溶劑不適宜采用該方法同時測定。

3.3 該方法線性良好，回收率在92%～103%之間，重復性良好，結果表明，本文所建立的檢測方法簡便、準確、有效，能夠滿足實際樣品檢測的需要。

[1]衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:化學工業(yè)出版社,2010:31.

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·安全用藥·

Headspace GC determination for residual solutions in sodium ozagrel

MING Bao-gang,ZHANG Lin-lin

(Department of Pharmacy,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004,China)

Objective To establish a headspace GC method for the determination of residual solution in sodium ozagrel.Methods DB-5 column (30 m×0.532 mm,1.0 μm) was adopted,with nitrogen as a carrier gas and FID as a detector.The initial temperature was kept at 40 ℃ for 4 min,and the temperature was raised to 150 ℃ at the rate of 25 ℃/min.The injecting port temperature was 200 ℃,and the detector temperature was 220 ℃.Results The calibration curve of methanol,ether,acetone and carbon dichloride showed a good linearity within the ranges of 0.26～0.39,0.41～0.62,0.41～0.62,0.071～0.047 and 4.75～7.12 μg/mL.The average recovery rates (n=9) were 101.3%,98.2%,95.4%,95.8% and 95.4%,respectively.Conclusion The method is simple,sensitive,reproducible and accurate for the determination of residual solution in sodium ozagrel.

Sodium ozagrel;GC;Headspace sampling;Residual solvent

2016-03-04

中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院藥學部，沈陽 110004

10.14053/j.cnki.ppcr.201702024