任麗麗 耿建

老年結腸癌病人循環(huán)與腫瘤組織中Galectin-3水平及臨床意義

任麗麗 耿建

目的 分析老年結腸癌病人循環(huán)和腫瘤組織中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)表達情況，以及與病人一般情況、腫瘤分期及預后的關系。 方法 收集自1999年3月至2010年12月在我科住院明確診斷的老年結腸癌病人68例,另收集50例健康體檢者為對照組,測定其循環(huán)中Galectin-3水平。收集病人臨床信息與實驗室檢查結果,采用雙抗體夾心法測定循環(huán)Galectin-3水平,切除的腫瘤組織行抗Galectin-3免疫組化染色。將循環(huán)Galectin-3水平和腫瘤組織Galectin-3表達情況與病人相關資料行相關分析。 結果 68例老年結腸癌病人循環(huán)Galectin-3水平顯著高于對照組(P<0.001);循環(huán)Galectin-3水平與腫瘤長徑、腫瘤轉移、TNM分期及預后無相關性(P>0.05);腫瘤組織Galectin-3表達陽性病例與陰性病例在血清CEA水平、腫瘤長徑、Duke 分期、TNM分期、淋巴結轉移、遠處轉移、生存時間方面差異均有統計學意義(P均<0.01)。 結論 老年結腸癌病人循環(huán)Galectin-3水平顯著升高,腫瘤組織Galectin-3表達情況可預示病情和預后。

老年人; 結腸癌; 半乳糖凝集素-3; 預后

結腸癌是臨床常見的惡性腫瘤,居全球惡性腫瘤發(fā)病率第3位,每年新增惡性腫瘤病人中,結腸癌約占10%[1-2]。腫瘤細胞播散和轉移直接影響著結腸癌的預后,而腫瘤細胞與血管內皮細胞之間的黏附又是腫瘤浸潤的關鍵環(huán)節(jié)。近年來,一類與細胞黏附過程有關的凝集素(Lectin)家族成員半乳糖凝集素-3(Galectin-3)引起臨床關注。Galectin-3是一種對含β-半乳糖苷殘基的糖化合物具有很高親和力的凝集素,在激活的巨噬細胞中高表達,通過一種類似細胞胞吐的機制轉移至細胞外并進入全身循環(huán)[3]。研究發(fā)現,多種惡性腫瘤組織中可檢測出Galectin-3高表達,其中包括結腸癌[4-5]。Galectin-3在細胞增殖和分化、細胞與間質間黏附、炎癥反應、血管生成、細胞凋亡、免疫調節(jié)及腫瘤浸潤等方面具有廣泛的生理和病理意義[6-7]。目前,以老年結腸癌病人為研究對象,同步分析循環(huán)中Galectin-3水平和腫瘤組織Galectin-3表達情況的臨床研究仍有限。本研究旨在研究循環(huán)與腫瘤組織中Galectin-3表達水平在老年結腸癌病人中的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 病例選自1999年3月至2010年12月在我科住院明確診斷的結腸癌病人68例,年齡≥60歲。排除標準:腎功能不全、嚴重心功能不全(NYHA分級Ⅲ～Ⅳ級)、合并惡性腫瘤、嚴重肥胖或消瘦(體質量指數>30或<18)。68例病人中,男43例(63%),女25例(37%),年齡60～73歲,平均(62.4±3.2)歲,Duke分期:A期18例(26.4%)、B期22例(32.3%)、C期19例(27.9%)和D期9例(13.4%);TNM分期1期23例(34.0%)、2期25例(36.7%)、3期14例(20.5%)、4期6例(8.8%)。另收集50例健康體檢者作為對照組,測定其循環(huán)中Galectin-3水平。所有研究對象均簽署書面知情同意書,本研究通過所在機構醫(yī)學倫理審查。

1.2 研究方法 所有病人均接受手術切除病灶或探查。收集病人臨床資料，包括年齡、性別、Duke分期、TNM 分期、腫瘤體積、腫瘤分化程度、轉移情況,檢測血清癌胚抗原(CEA)水平。病人術前當日抽取空腹肘靜脈血3 ml,分離血清后-80 ℃保存。循環(huán)中Galectin-3水平采用雙抗體夾心法進行測定[8]。腫瘤組織Galectin-3表達采用免疫組織化學鼠抗人Galectin-3抗體染色。根據腫瘤組織表達Galectin-3染色情況將病人分為Galectin-3表達陽性組與陰性組。

1.3 統計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行統計學分析。正態(tài)分布計量資料以均數±標準差表示,偏態(tài)分布資料以中位數(四分位數) (Median,IQR) 表示,計數資料或等級資料采用含有頻數和頻率的列聯表表示。計量資料組間比較采用t檢驗或方差分析,計數資料組間比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法,相關關系分析采用Spearman方法,預后采用Kaplan-Meier 生存分析,P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組循環(huán)中Galectin-3水平比較 結腸癌病人循環(huán)中Galectin-3水平顯著高于對照組[(51.48±8.76) ng/ml比(10.29±4.91) ng/ml,P<0.001]。結腸癌病人血清CEA濃度為(153.10±124.56) ng/ml,腫瘤長徑為(47.3±8.9) mm,隨訪5年中位生存時間為4.6年。循環(huán)Galectin-3水平與血清CEA濃度、腫瘤長徑、Duke分期、TNM分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移和生存時間均無相關性(P均>0.05)。

2.2 腫瘤組織表達Galectin-3情況 結腸癌病人腫瘤組織Galectin-3表達陽性52例(76.4%),Galectin-3表達陰性16例(23.6%),2組間循環(huán)Galectin-3水平差異無統計學意義。Galectin-3表達陽性病例較Galectin-3表達陰性病例在血清CEA濃度、腫瘤長徑、分化程度、Duke分期、TNM分期、淋巴結轉移和遠處轉移差異均具有統計學意義(P均<0.01),見表1,且2組生存時間比較差異亦有統計學意義(P=0.02),見圖1。

3 討論

結腸癌嚴重威脅人類健康,據估計每年新增結腸癌病人120萬例,大約70%的結腸癌是散發(fā)的,無明確家族史和遺傳史[9-10]。尋找結腸癌診斷與判斷預后的血清學標記物是近年來臨床重要研究方向之一。

表1 結腸癌病人Galectin-3表達陽性組與陰性組臨床與病理資料比較

項目Galectin-3表達陽性組(n=52)Galectin-3表達陰性組(n=16)P男性(n,%)33(63.4)9(56.3)0.66年齡( x±s,歲)61.3±2.064.3±3.90.01CEA( x±s,ng/ml)221.8±118.237.2±18.5<0.01腫瘤長徑( x±s,mm)49.6±9.043.3±7.30.03分化程度(n,%) 高分化22(42.3)12(75.0)0.01 中分化19(36.5)3(18.7) 低分化11(21.2)1(6.3)淋巴結轉移(n,%)22(42.3)4(25.0)<0.01遠處轉移(n,%)13(25.0)2(12.5)<0.01Duke分期(n,%) A期15(28.8)4(25.0)<0.01 B期20(38.5)10(62.5) C期11(21.1)1(6.2) D期6(11.7)1(6.4)TNM分期(n,%) 1期12(23.0)5(31.2)0.01 2期22(42.3)9(56.2) 3期12(23.0)2(12.6) 4期6(11.7)0

圖1 腫瘤組織Galectin-3表達陽性病人與陰性病人生存時間比較

本研究對不同臨床與病理分期的結腸癌病人循環(huán)Galectin-3水平與腫瘤組織表達Galectin-3情況進行分析。結果發(fā)現,結腸癌病人循環(huán)Galectin-3水平遠高于正常對照組,但循環(huán)Galectin-3水平與血清CEA濃度,腫瘤長徑、Duke分期、TNM分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移均無顯著相關性,也與腫瘤組織表達Galectin-3的情況無相關性。該現象提示循環(huán)Galectin-3水平可能作為一種標記物,具有指示病理狀態(tài)的意義,其升高機制不能僅以腫瘤細胞浸潤解釋。已知Galectin-3在激活的巨噬細胞、嗜堿性粒細胞和肥大細胞等細胞中高表達,可溶性的Galectin-3以胞吐機制進入全身循環(huán)。循環(huán)Galectin-3水平可在一定程度上反映腫瘤病人體內炎癥負荷程度。類似研究在動物模型與臨床觀察中都發(fā)現循環(huán)Galectin-3水平與血清粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、白介素(IL)-6和可溶性細胞間黏附分子(sICAM)-1等炎癥因子濃度均相關[11-12]。由于Galectin-3表達與巨噬細胞的替代途徑活化(M2型)密切相關,我們推測腫瘤組織浸潤的單個核細胞可能是循環(huán)Galectin-3的重要來源,至少在腫瘤組織表達Galectin-3陰性病例應是如此。但在組織病理水平,我們未對M2型巨噬細胞進行鑒定，因而上述推測有待進一步研究驗證。

本研究在結腸癌切除組織中對Galectin-3表達情況與病人臨床病理分期及預后的關系進行分析,發(fā)現腫瘤組織表達Galectin-3陽性病例與Galectin-3陰性病例在血清CEA濃度、腫瘤長徑、Duke分期、TNM分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移和生存時間上的差異均有統計學意義。既往研究認為,Galectin-3在細胞黏附、腫瘤細胞浸潤與轉移中具有一定作用,也有促有絲分裂作用[6-7]。本研究進一步肯定了分析組織水平Galectin-3表達情況對于臨床的重要價值。有關腫瘤組織Galectin-3表達與預后關系,可能與黏蛋白(mucin)基因MUC2表達[13]或凋亡[14]有關,但本研究對相關機制未進行探討。

總之,老年結腸癌病人循環(huán)Galectin-3水平顯著升高,腫瘤組織Galectin-3表達情況可預示病情和預后。

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Clinical and prognostic effects of Galectin-3 in elderly patients with colorectal cancer

RENLi-Li,GENGJian.

DepartmentofMedicalOncology,JinlingHospital,SchoolofMedicine,NanjingUniversity,Nanjing210002,China

Objective To evaluate the clinical relevance and prognostic effects of Galectin-3 in elderly patients with colorectal cancer. Methods Sixty-eight old patients with colorectal cancer who received surgical resection were enrolled in this study. The expression of Galectin-3 in tissue sections was evaluated using immunohistochemical staining. Serum level of Galectin-3 was measured using an enzyme-linked immunosorbent assay. In addition, fifty healthy volunteers were chosen as controls. The relationship of Galectin-3 expression in tissue sections and serum level of Galectin-3 with clinicopathological factors and prognosis was analyzed. Results Serum level of Galectin-3 was higher in the patients with colorectal cancer compared to the control group (P<0.001). Serum level of Galectin-3 was not significantly associated with tumor size, distant metastasis, TNM stage and prognosis in the patients with colorectal cancer. Patients with positive expression of Galectin-3 showed higher carcinoembryonic antigen level, tumor size, higher Dukes’ stage and TNM Stage, higher incidence of lymph node and distant metastasis than those with negative expression of Galectin-3 (P<0.01, respectively). However, the survival period in patients with positive expression of Galectin-3 was significantly poorer than those with negative expression of Galectin-3(P<0.01). Conclusions Serum level of Galectin-3 increases in the patients with colorectal cancer. Galectin-3 expression in tissue sections is an independent factor for the severity degree of the disease and prognosis of colorectal cancer.

aged; colorectal cancer; Galectin-3; prognosis

210002江蘇省南京市，南京大學醫(yī)學院附屬金陵醫(yī)院腫瘤內科

耿建，Email: 1046772254@qq.com

R 735.35

A

10.3969/j.issn.1003-9198.2017.02.015

2016-03-07)