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實驗室動物化療性靜脈炎研究進展

馬榮華，惠薏，張琪，劉曉梅

就實驗室動物化療性靜脈炎(CP)研究進行綜述，指出CP研究主要集中于護理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機制研究甚少，缺乏對防護機制的基礎(chǔ)性研究，可通過實驗室基礎(chǔ)研究從細胞分子學水平探索常用化療藥所致CP的形成機制，探尋CP防護新思路。

化療性靜脈炎；動物實驗；化療藥物；干預(yù)機制；誘發(fā)因素

化療性靜脈炎(chemotherapeuticphlebitis，CP)指由于化療藥物強刺激性和細胞毒性作用等因素導(dǎo)致穿刺局部血管壁發(fā)生化學炎性反應(yīng)，嚴重時病人可出現(xiàn)潰瘍、硬結(jié)，甚至壞死、功能障礙，給病人帶來巨大痛苦，影響化療方案的實施，增加醫(yī)療費用。目前有關(guān)CP的護理研究主要集中于各措施臨床防護效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP的形成機制研究甚少，缺乏具體干預(yù)機制的基礎(chǔ)性研究。現(xiàn)就實驗室動物CP研究進展進行綜述，旨在為CP形成機制及防護研究提供可借鑒之處，為改進臨床護理措施提供基礎(chǔ)理論支持。

1 實驗動物

1.1 建立兔耳緣靜脈CP模型 兔子耳大較平坦，皮膚菲薄，耳緣靜脈清晰可見，有利于觀察給藥反應(yīng)，除了疼痛指標無法評估外，CP癥狀均可呈現(xiàn)。且兔耳相對平坦，有利于藥物涂抹、濕敷、貼服等各種臨床常用護理措施的實施，常被作為CP動物模型之首選。國內(nèi)學者[1-6]先后通過兔耳緣靜脈單次推注長春瑞濱注射液，分別于用藥后48 h、72 h、7 d形成穩(wěn)定的CP模型。章飛飛[7]向兔耳緣靜脈單次輸注長春新堿48 h后建立CP模型。各品種兔耳緣靜脈普遍較細，對靜脈穿刺技術(shù)要求較高，一旦穿刺失敗或藥物外滲可致局部組織壞死被迫剔除實驗動物，增加樣本量與實驗費用。兔耳緣靜脈較細，模仿臨床反復(fù)給藥存在一定難度，顯著制約著實驗觀察時限，現(xiàn)有研究觀察時限也僅7 d[4]。如需模擬臨床給藥方案，反復(fù)多次給藥以探索CP形成機制變化及具體干預(yù)機制則存在一定難度。

1.2 小鼠尾靜脈CP模型 小鼠尾靜脈較兔耳緣靜脈粗、長、直、表淺、被毛少，穿刺難度小，適宜反復(fù)多次靜脈給藥，便于實驗觀察。小鼠個體小，易固定，繁殖能力強，可成批獲得，有利于控制體重、年齡等影響因素，且飼養(yǎng)方便,便于擴大樣本量。國內(nèi)學者利用小鼠尾靜脈先后建立5-氟尿嘧啶、長春瑞濱、吡柔比星致CP動物模型[8-11]。馬麗娟等[12]進一步優(yōu)化實驗條件，模擬臨床反復(fù)多次給藥方案成功建立長春瑞濱致小鼠尾靜脈CP動物模型。

目前以小鼠尾靜脈建立CP動物模型的實驗方法較為成熟，其研究領(lǐng)域重點集中于腫瘤學、藥物學等基礎(chǔ)學科。但由于小鼠重量小，給藥劑量少，臨床用微量輸液泵難以實現(xiàn)精準的流速控制，需借助精密的流速控制器控制給藥速度，且小鼠重量小，對化療藥物十分敏感,穿刺等輕微刺激即可致小鼠全身肌肉緊張、尾巴強直、煩躁不安、尖叫亂動致穿刺失敗[13]。此外，小鼠尾巴成圓錐樣，臨床常用CP防護措施如熱敷、冷敷、敷貼外用等護理措施執(zhí)行困難，制約著小鼠尾靜脈CP模型在護理實驗研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。

2 建模藥物

基于化療藥物的強刺激性與血管毒性作用，大多數(shù)化療藥物均可導(dǎo)致CP形成，CP建模藥物選取主要取決于具體研究目的。目前關(guān)于長春瑞濱致CP研究最為多見，其次有長春新堿、紫杉醇、吡柔比星、5-氟尿嘧啶等所致CP。所有研究均可獲取良好CP模型。由于長春瑞濱具有強烈的細胞毒性作用與發(fā)皰性能，CP發(fā)生率高達10%～30%[14]，是臨床常用化療藥，用途廣、效果好、價格低廉，因此常被作為CP研究的代表性藥物。目前關(guān)于各類化療藥致CP的形成及干預(yù)機制研究甚少，長春瑞濱致CP與其他化療藥致CP作用機制是否一致尚不明確，長春瑞濱致CP的防護措施對其他類化療藥致CP是否具有防護作用，仍有待探索。

3 給藥方式

現(xiàn)有研究中偶見反復(fù)多次靜脈用藥，多采用單次靜脈給藥建立CP模型，且給藥速度、濃度、劑量及持續(xù)時間尚無定論。姚遠兵等[3]以濃度10 mg/mL、速度12 mL/h向小鼠尾靜脈輸注長春瑞濱24 h后形成良好CP模型。王紅等[1]依據(jù)人體給藥劑量25 mg/m2于48 h后建立長春瑞濱致家兔耳緣靜脈CP模型。楊文琴等[15]以給藥劑量12 mg/(kg·d)、給藥容量12 mL/(kg·d)向兔耳緣靜脈輸注5-氟尿嘧啶72 h可100%形成CP。張蕻等[16]以15 mg/mL給藥濃度建立了5-氟尿嘧啶致小鼠尾靜脈CP模型，建模成功率100%，當濃度增至17.5 mg/mL時出現(xiàn)動物死亡現(xiàn)象。高文等[9]以20 mg/kg向兔耳緣靜脈輸注長春新堿48 h后建立CP模型，且無動物死亡。Emiko等[17]研究顯示：快速輸注、稀釋濃度可有效緩解長春瑞濱致CP的嚴重程度，降低發(fā)生率。Yoh等[14]臨床研究認為快速輸注及給藥后生理鹽水沖管可有效降低長春瑞濱致CP的發(fā)生率。

4 研究指標

4.1 局部組織病理觀察 組織病理觀察方法成熟，操作簡單、經(jīng)濟直觀，常被作為CP實驗研究的基礎(chǔ)性觀察指標?？蓮难軆?nèi)皮細胞損傷、血管周圍水腫、炎細胞浸潤、靜脈管壁損傷、纖維組織增生、周圍組織出血、血栓形成7個方面評估靜脈炎損傷程度[8]。長春瑞濱可致炎細胞浸潤、組織水腫、表皮組織變性，未見明顯的血管內(nèi)皮細胞脫落，阿霉素可致明顯的血管內(nèi)皮細胞脫落、壞死，地塞米松預(yù)處理可有效降低長春瑞濱致CP的發(fā)生率，而且快速靜脈輸注長春瑞濱可有效減輕穿刺導(dǎo)管遠端組織水腫程度，稀釋給藥濃度可明顯減輕穿刺導(dǎo)管近端上皮組織退行性變[17]。

4.2 細胞間黏附分子1和血管內(nèi)皮生長因子 細胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1，ICAM-1) 是介導(dǎo)細胞間或細胞外基質(zhì)相互作用的一類糖蛋白，主要存在于血管內(nèi)皮細胞中，正常情況下呈低表達或不表達，當刺激、感染等因素導(dǎo)致內(nèi)皮細胞受損時呈高表達，參與血小板聚集、白細胞粘附、穿越和血栓形成，其表達量與內(nèi)皮細胞損傷程度、炎癥程度和血栓形成[18]密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種多功能細胞因子，既可特異性作用于血管內(nèi)皮細胞[19]，促進細胞外基質(zhì)降解，誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞移行、遷移,促進血管內(nèi)皮細胞分裂增殖，利于血管修復(fù)[20]，又是一種血管通透性因子，增加血管通透性，增加滲出[21]。國外學者發(fā)現(xiàn)ICAM-1在抗生素致輸液性靜脈炎的形成中發(fā)揮重要作用[22-23]。國內(nèi)研究認為馬鈴薯汁聯(lián)合地塞米松外涂可有效抑制血管損傷早期局部ICAM-1與VEGF表達，防護5-氟尿嘧啶、長春瑞濱致CP[4,15,17]。水膠體透明貼外敷可通過抑制損傷血管局部ICAM-1和VEGF表達，抑制白細胞與血管內(nèi)皮細胞黏附，減輕血管通透性，減輕甘露醇致輸液性靜脈炎的癥狀[24]。 延胡索合劑可抑制血管損傷局部ICAM-1表達，上調(diào)VEGF表達，減輕炎癥反應(yīng)，促進血管內(nèi)皮細胞增生修復(fù)，防治CP的發(fā)生[25]。

4.3 E-選擇素 E-選擇素是一種特異性表達在活化內(nèi)皮細胞膜上的粘附分子，在白細胞與內(nèi)皮細胞黏附、向炎癥部位游走和腫瘤細胞轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。炎癥時內(nèi)皮細胞表面E-選擇素可介導(dǎo)中性粒細胞沿血管壁滾動[26]。腫瘤壞死因子α(TNF-α)，白介素、熱刺激等均可誘導(dǎo)E-選擇素高表達[27]。Edelstein等[28]發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞受刺激后，E-選擇素呈現(xiàn)快速而短暫的高表達，4 h達高峰，24 h后從胞膜上開始脫落進入血液，成為可溶性E-選擇素。日本學者Kobayshi等[29]動物研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可通過下調(diào)E-選擇素表達抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。Vassilomanolakis等[30]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)西咪替丁可有效預(yù)防長春瑞濱致CP。國內(nèi)學者柴琴等[31]也再次驗證了這一臨床效果。研究證實長春瑞濱輸注5 h后E-選擇素顯著升高，而E-選擇素基因敲除小鼠則表現(xiàn)出明顯的炎癥反應(yīng)缺陷，再次表明E-選擇素與長春瑞濱致CP的形成密切相關(guān)[32]。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)長春瑞濱可通過激活核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)通路，啟動E-選擇素基因表達，啟動炎癥反應(yīng)，西咪替丁預(yù)處理可有效抑制E-選擇素表達，干預(yù)長春瑞濱致CP形成[33]。

4.4 腫瘤壞死因子 腫瘤壞死因子α(tumor necrosisi factor α，TNF-α)是一種由單核巨噬細胞分泌的炎性介質(zhì)，在細菌感染、腫瘤等病理狀態(tài)下呈高表達，可損傷血管內(nèi)皮細胞，改變內(nèi)皮細胞基因表達，激活內(nèi)皮細胞產(chǎn)生多種炎性介質(zhì)，增加內(nèi)皮細胞表面血栓形成能力，促進中性粒細胞聚集，釋放蛋白溶解酶，導(dǎo)致炎癥、細胞壞死、新生血管形成，并可促進內(nèi)皮素-1高表達，損傷血管壁[34]。有研究顯示長春瑞濱輸注后局部組織中腫瘤壞死因子α表達逐漸升高，48 h后其表達呈下降趨勢[1,35]，但相關(guān)研究較少。

5 小結(jié)

目前，關(guān)于CP研究主要集中于各護理措施臨床效果觀察或誘發(fā)因素分析，有關(guān)CP形成機制研究甚少，缺乏對干預(yù)機制的基礎(chǔ)性研究。有關(guān)E-選擇素、腫瘤壞死因子α在CP領(lǐng)域的研究尚處于實驗室探索階段，可通過實驗室基礎(chǔ)研究從細胞分析學水平探索常用化療藥所致CP的形成機制，探尋CP防護新思路，明確各種常見護理措施的干預(yù)機制，為臨床護理措施改進提供實驗室基礎(chǔ)理論支持。

[1] 王紅,吳婷婷,盧慧芳.長春瑞濱化療性靜脈炎動物模型的建立[J].護理學雜志,2014,29(17):19-21.

[2] 宋向陽,李武平,王宇,等.兔耳緣靜脈化療性靜脈炎動物模型建構(gòu)初探[J].護理研究,2006,20(12A)：3123-3125.

[3] 姚遠兵,王卓,金桂蘭,等.長春瑞濱致輸液性靜脈炎動物模型的建立[J].中國藥房,2009,20(4):263-265.

[4] 張小來,葉希平,陳曉蓉,等.熱敷法預(yù)防家兔化療性靜脈炎效果觀察及機制探討[J].山東醫(yī)藥,2013,53(22)：22-25.

[5] 謝麗微,杜樂燕,蘇銀法.馬鈴薯外敷對長春瑞濱輸液性靜脈炎ICAM-1和VEGF表達的影響[J].溫州醫(yī)學院學報,2012,42(5):458-460.

[6] 單珍珠,周留勇,尤建良,等.復(fù)脈膏外敷的安全性及對兔耳緣化療性靜脈炎的影響[J].河北中醫(yī),2015,37(10):1515-1518.

[7] 章飛飛.化療性靜脈炎動物模型的建立及給藥方式對化療性靜脈炎影響的研究[D].南寧:廣西醫(yī)科大學,2010:1.

[8] 楊芳,楊喜花,閻磊,等.丹七散瘀搽劑對化療性靜脈炎動物模型的療效研究[J].中國藥物與臨床,2012,12(9)：1148-1149.

[9] 高文,韋義萍.金黃膏對防治化療性靜脈炎動物模型的效果研究[J].護理研究,2011,25(4C)：1120-1121.

[10] 楊晉田,劉麗坤,王晞星,等.復(fù)方藤芷膏治療小鼠化療性靜脈炎的實驗研究[J].護理研究,2014,28(1C)：286-287.

[11] 孫甜甜,王華慶.延胡索合劑(YHS-1)對吡柔比星外滲性損傷及靜脈炎防治及機制研究[D].天津:天津醫(yī)科大學,2012:1.

[12] 馬麗娟,王卓,胡晉紅.西咪替丁對長春瑞濱所致化療性靜脈炎的防治作用[J].藥物服務(wù)與研究,2009,9(5)：340-343.

[13] 梁月琴,楊波.大鼠、小鼠給藥及采血的幾點體會[J].山西醫(yī)科大學學報,2000,31(1)：92-93.

[14] Yoh K,Niho S,Goto K,etal.Randomized trial of drip infusion versus bolus injection of vinorelbine for the control of local venous toxicity[J].Lung Cancer,2007,55(3):337-341.

[15] 楊文琴,王晉芬,李瑞萍.馬鈴薯汁加地塞米松預(yù)防氟尿嘧啶致靜脈炎的實驗觀察及機制研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展,2010,10(10)：1860-1866.

[16] 張蕻,泰剛,閆磊,等.化療性靜脈炎小鼠模型的建立[J].實驗動物科學,2010,27(5):5-8.

[17] Emiko Kohno,Saori Murase,Mayumi Nishikata,etal.Methods of preventing vinorelbine-induced phlebitis:an experimental study in rabbits[J].International Journal of Medical Sciences,2008,5:218-223.

[18] Zhang ZX,Wang P,Zhang QS,etal.Effects of anisodamine on the expressions of vascular endothelial growth factor and intercellular adhesion molecule 1 in experimental infusion phlebitis[J].Chin Med J (Engl),2012,125(2):300-305.

[19] Ambati J,Ambati BK,Yoo SH,etal.Age-related macular degeneration:etiology,pathogenesis,and therapeutic strategies[J].Surv Ophthalmol,2003,48(3):257-293.

[20] Witmer AN,Blaauwgeers HG,Weich HA,etal.Altered expression patterns of VEGF receptors in human diabetic retina and in experimental VEGF-induced retinopathy in monkey[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,2002,43(3):849-857.

[21] Kazemi S,Enzel D,Kolossov E,etal.Differential role of bFGF and VEGF for vasculogenesis[J].Cell Physiol Biochem,2002,12(2/3):55-62.

[22] Lanbeck P’Odenholt I,Riesbeck K.Dicloxacillin and erythromycin at high concentration in crease ICAM-1 expression by endotherlial cells:a possible factor in the pathogenesis of infusion phlebitis[J].Antimicrob Chemother,2004,53(2):174-179.

[23] Kilic B,Kruse M,Stahlmann R.The in vitro effects of quinupristin /dalfopristin,erythomycin and levofloxoxacin at low concentration on the expression of different cell adhesion molecules on the surface of endothelial cells[J].Toxicology,2006,218(1):30-38.

[24] 寧寧,楊小春,陳海霞,等.康惠爾增強型透明貼防治靜脈炎的作用機制實驗研究[J].護理研究,2007,21(3A)：592-594.

[25] 馮莉霞,王華慶,賀瑾,延胡索合劑預(yù)防和治療腫瘤化療性靜脈炎的實驗研究[J].中國腫瘤臨床,2012,39(15)：1073-1076.

[26] Bevilacqua MP,Stengelin S,Gimbrone MAJr,etal.Endothelial leukocyte adhesion molecule 1：all inducible receptor for neutrophils related to complement regulatory proteins and loctins[J].Science,1989,243(4895):1160-1165．

[27] Christenson LK,Stouffer RL．Isolation and culture of microvascular endothelial cells from the primate corpus luteum[J].Biol Reprod,1996,55(6):1397-1404．

[28] Edelstein LC,Pan A,Collins T.Chromatin modification and the endothelial -specific activation of the E-selectin gene[J].J Biol Chem,2005,280(12)：1192-1202．

[29] Kobayshi K,Matsumoto S,Morishina T,etal.Chetidine inhibits cancer celladhesion to endotllelial cells and prevents metastasis by blocking E-selectin expression[J].Cancer Res,2000,60(14):3978-3984.

[30] Vassilomanolakis M,Koumakis G,Barbounis V,etal.Prevention of vinorelbine phlebitis with cimetidine.A two-step design study [J].Support Care Cancer,2001,9(2):108-111．

[31] 柴琴,安東建．西咪替丁對長春瑞濱所致靜脈炎的預(yù)防[J].中國誤診學雜志,2004,4(12)：2011-2012．

[32] 馬麗娟.長春瑞濱致小鼠輸液性靜脈炎模型建立及藥物干預(yù)研究[D].上海:第二軍醫(yī)大學,2009:1.

[33] Wang Zhuo,Ma Lijuan,Wang Xuebin,etal.Cimetidine attenuates vinorelbine -induced phlebitis in mice by militating E-selection expression[J].Cancer Chemother Pharmacol,2014,74:239-247.

[34] 楊名,趙揚,陳廣潔.TNF-α調(diào)節(jié)Treg細胞增殖與功能的研究進展[J].現(xiàn)代免疫學,2013,33(6):505-509.

[35] 陳桂園,姜麗萍,黃利全,等.靜脈炎動物模型的建立及TNF-α、ICAM-1的表達[J].護理學雜志,2014,29(8)：6-9.

2016-07-16；

2017-09-05)

(本文編輯 崔曉芳)

Researchprogressonlaboratoryanimalchemotherapyphlebitis

MaRonghua,HuiYi,ZhangQi,etal

(Suzhou Vocational Health College,Jiangsu 215009 China)

R47

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.35.003

1009-6493(2017)35-4459-04

蘇州市科技局指導(dǎo)課題資助項目項目，編號：SYSD2015067；江蘇省高等學校大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目資助，編號：201512688016X；蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院解剖學優(yōu)秀教學團隊。

馬榮華，講師，主管護師，碩士研究生，單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院；惠薏、張琪、劉曉梅(通訊作者)單位：215009，蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院。

信息馬榮華，惠薏，張琪，等.實驗室動物化療性靜脈炎研究進展[J].護理研究，2017，31(35)：4459-4462.