和花益

(福貢縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南福貢 673400)

福貢縣豬乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查

和花益

(福貢縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南福貢 673400)

為了解福貢縣豬乙型腦炎流行情況，2014～2015年，我們采用ELISA方法對(duì)全縣7個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）329份農(nóng)村散養(yǎng)戶豬血清進(jìn)行豬乙型腦炎抗體檢測(cè)，并對(duì)全縣豬乙型腦炎流行情況進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示：共檢測(cè)出陽(yáng)性血清191份，平均陽(yáng)性率為58.05 %（191/329），變化范圍為15%～81.13%；2014年度豬乙型腦炎感染率與2015年度差異顯著（P＜0.05）。結(jié)果表明：福貢縣豬乙型腦炎感染較為嚴(yán)重，且呈上升趨勢(shì)，應(yīng)采取有效防治措施。

豬乙型腦炎 血清抗檢測(cè) ELISA 福貢縣

豬乙型腦炎（Swine encePhalitis B）是由流行性乙型腦炎病毒引起的一種以中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變?yōu)橹饕卣鞯娜双F共患的急性傳染病。豬是乙型腦炎病毒的重要儲(chǔ)存宿主和擴(kuò)增宿主，是人乙型腦炎重要的潛在傳染源。臨床表現(xiàn)為母豬流產(chǎn)，死胎或弱產(chǎn)，公豬發(fā)生睪丸炎為特征。為了解福貢縣散養(yǎng)戶生豬乙型腦炎感染情況，2012～2015年，我們采用ELISA檢測(cè)方法對(duì)全縣7個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）329份農(nóng)村散養(yǎng)戶豬血清進(jìn)行豬乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查?，F(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 為2012～2015年度7個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）送檢的散養(yǎng)戶豬血清。無(wú)菌采集豬耳靜脈或前腔靜脈血液樣品，離心或靜置分離血清，待血清析出后，收集血清，編號(hào)-15℃保存?zhèn)錂z。

1.1.2 豬乙型腦炎抗體檢測(cè) ELISA試劑盒由武漢科前生物股份有限公司提供，批號(hào)：110803、130201、141209、140303、150101。

1.1.3 主要儀器設(shè)備 安圖酶標(biāo)儀、單道移液器、八道/十二道移液器、吸頭等。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 操作步驟

（1）取抗原包被板，先加入稀釋好的洗滌液200ul，靜置3min后棄去，再在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌1次，然后將稀釋好的待檢血清和對(duì)照血清各取100ul加入到抗原包被板孔中，待檢樣品各一孔，陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各2孔。輕輕振勻孔中樣品，置37℃溫育30min。

（2）棄去板孔中的溶液，在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌5次。

（3）每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl，置37℃溫育30min。

（4）洗滌方法同2。

（5）每孔加入底物A50ul，再加底物B50ul，混勻，室溫（20℃～25℃）避光顯色10min。

（6）待顯色完成后，每孔加終止液50min，10min內(nèi)測(cè)定結(jié)果。

1.2.2 結(jié)果判定

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD630nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm值≥1.0，陰性對(duì)照平均OD630nm值＜0.2。

若樣品S/P值≥0.21，判為豬乙型腦炎病毒抗體陽(yáng)性；樣品S/P值＜0.21，判為豬乙型腦炎病毒抗體陽(yáng)陰性。

1.3 生物統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)方法

t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

（1）2014～2015年，對(duì)福貢縣7個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)送檢的329份農(nóng)村散養(yǎng)戶豬血清采用ELISA方法進(jìn)行豬乙型腦炎抗體檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1顯示福貢縣7個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)散養(yǎng)戶豬群中均有不同程度豬乙型腦炎感染。在檢測(cè)的329份豬血清中有191份豬乙型腦炎抗體，平均陽(yáng)性率為58.05%，陽(yáng)性鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢出率為100%。從陽(yáng)性分布的區(qū)域看，7個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)平均陽(yáng)性率存在很大差異，其中鹿馬登、架科底、石月亮、子里甲、上帕5個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）平均陽(yáng)性率大于58.05%，由高到低分別為：81.13%、77.63%、69.57%、60%、59.52%，平均陽(yáng)性率低的為馬吉鄉(xiāng)28%、匹河鄉(xiāng)15%。

（2）2014年度豬乙型腦炎感染率較高，平均陽(yáng)性率為86.90%，鹿馬登鄉(xiāng)、上帕鎮(zhèn)、架科底鄉(xiāng)、子里甲鄉(xiāng)為100%，馬吉鄉(xiāng)為52%，匹河鄉(xiāng)為0；2015年度鹿馬登、架科底、子里甲3個(gè)鄉(xiāng)平均陽(yáng)性率大于35.33%，由高到低分別為68.75%、57.5%、36%，平均陽(yáng)性率底的為馬吉鄉(xiāng)16%、匹河鄉(xiāng)15%，石月亮鄉(xiāng)、上帕鎮(zhèn)為0。2014年度豬乙型腦炎感染率與2015年度差異顯著（P＜0.05）。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)感染抗體陽(yáng)性率之間沒(méi)有規(guī)律。

表1 2014-2015年豬乙型腦炎檢測(cè)情況統(tǒng)計(jì)表

3 討論

（1）從總體檢測(cè)結(jié)果看，2014～2015年度檢出豬乙型腦炎的7個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)抗體陽(yáng)性率相差較大，有些鄉(xiāng)鎮(zhèn)的抗體陽(yáng)性率很高，為81.13%，而有些鄉(xiāng)鎮(zhèn)的抗體陽(yáng)性率很低，為15%，2014年度豬乙型腦炎感染率與2015年度差異顯著（P＜0.05），各鄉(xiāng)鎮(zhèn)感染抗體陽(yáng)性率之間沒(méi)有規(guī)律。這說(shuō)明我縣各鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）均有豬乙型腦炎感染，且大部分處于隱性感染狀態(tài)，應(yīng)引起廣大養(yǎng)殖戶高度重視，采取綜合防控措施做好豬乙型腦炎防治工作。

（2）豬乙型腦炎主要發(fā)生在夏季蚊蟲(chóng)叮咬的季節(jié)，豬是乙型腦炎病毒的重要儲(chǔ)存宿主和擴(kuò)增宿主，通過(guò)蚊—豬—人循環(huán)使乙腦病毒擴(kuò)散。因此做好飼養(yǎng)場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生，搞好易感動(dòng)物免疫接種，提高免疫密度，加強(qiáng)帶毒豬飼養(yǎng)管理及防蚊滅蚊等對(duì)保護(hù)人畜安全有著重要意義。同時(shí)，嚴(yán)把引種關(guān)，防止病毒傳入，引種要做好疫病檢測(cè)與隔離，禁止引入陽(yáng)性種豬，是控制本病的有效措施之一。

（3）防治豬乙型腦炎是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作，危及公眾的健康安全，防治工作涉及衛(wèi)生防疫和畜牧獸醫(yī)等相關(guān)部門(mén)，只有長(zhǎng)期齊心協(xié)力，加強(qiáng)聯(lián)防，群防群治，搞好畜間檢疫，淘汰病畜禽、消滅傳染源，這樣才能取得更好的防治效果。

[1]高正軍，朱柳燕，蔣鎖俊，等.豬乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2014，（5）：44.

[2]余波，譚詩(shī)文，冉懋韜，等.豬流行性乙型腦炎的血清學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2010，37（4）：222-223.

[3]楊培昌，曹興萍，高自壽，等.云南省楚雄州豬乙型腦炎流行情況血清學(xué)調(diào)查[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（5）：109-112.