凌洪權(quán)，黎朝燕，黃 恒，李 泰，陳忠瓊，董春霞，姚 璐

（1.重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 渝北 401120；2.重慶市璧山區(qū)來鳳畜牧獸醫(yī)站，重慶 璧山 402763）

小反芻獸疫熒光PCR 診斷

凌洪權(quán)1，黎朝燕2，黃 恒1，李 泰1，陳忠瓊1，董春霞1，姚 璐1

（1.重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶 渝北 401120；2.重慶市璧山區(qū)來鳳畜牧獸醫(yī)站，重慶 璧山 402763）

小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒引起的發(fā)生于小反芻動(dòng)物的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病，主要在綿羊和山羊中流行，其對(duì)幼齡動(dòng)物的致死率可達(dá)50%～80%。

一步法熒光定量RT-PCR方法已用于對(duì)本病的檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 樣品 4份樣品 S1、S2、S3、S4均為病羊鼻腔拭子。在裝有病羊鼻腔拭子的離心管中加入1mL PBS液后，離心管在混勻器上振蕩混勻2 min，5000r/min離心2min，然后取上清液0.2mL備用。

1.2 檢測(cè)儀器 全自動(dòng)核酸提取純化儀；熒光PCR儀，BIO-RAD。

1.3 試劑 核酸提取試劑盒（磁珠法），小反芻獸疫通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒。

1.4 檢測(cè)方法 參照核酸提取試劑盒說明書進(jìn)行小反芻獸疫病毒RNA提取。

反應(yīng)條件：42℃5min，95℃ 10s，循環(huán)95℃5s，60℃ 35s，共40次，在循環(huán)第二步（60℃ 35s）收集熒光信號(hào)。

2 檢測(cè)結(jié)果

按照小反芻獸疫通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒使用說明進(jìn)行結(jié)果判定。結(jié)果樣品S1、S2、S3和S4均測(cè)出小反芻獸疫病毒核酸特異性熒光曲線，其檢測(cè)結(jié)果呈陽性。

3 小結(jié)

小反芻獸疫是一種傳染性極強(qiáng)的病毒性疾病，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織規(guī)定必須上報(bào)的疾病之一。

山羊和綿羊是該病毒的自然宿主，山羊比綿羊更易感，尤其是3～8月齡的山羊，而哺乳期的動(dòng)物抵抗力較強(qiáng)。

當(dāng)前小反芻獸疫主要分布在撒哈拉和赤道之間的非洲地區(qū)，中東（阿拉伯半島、以色列、敘利亞和約旦）、南亞次大陸（印度、尼泊爾、孟加拉國、巴基斯坦和阿富汗）。小反芻獸疫在這些地區(qū)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，成為這些地區(qū)影響小反芻獸類家畜生產(chǎn)的重要疾病。

目前對(duì)小反芻獸疫沒有有效的治療手段，接種疫苗是一種有效的控制小反芻獸疫的方法。在免疫接種的同時(shí)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)引進(jìn)羊只的檢疫并做好隔離、消毒工作，以防病原引入。

S854.4

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：1001-8964（2017）02-0048-01

2016-12-23