李文超

【摘 要】飲用水的水質與人體健康密切相關，水質的問題一直是普遍關注的焦點。飲用水水質對人體健康的影響的一個主要方面是微生物風險，微生物風險主要是由飲用水中致病微生物引起的。本次研究采用隨機取樣的方法收集了濟南市相距較遠的集中供水的居民家中供水管網(wǎng)末梢水，通過對細菌總數(shù)的研究，了解濟南市居民生活用水的質量。

【關鍵詞】濟南市；生活用水；細菌總數(shù)；質量

0 引言

（1）飲用水中的微生物

水微生物主要是檢測水中微生物種類，通俗來講也可以說是檢測水中各類菌種，包括菌落總數(shù)、總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、乳酸菌、霉菌、沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、光合細菌等各類細菌、真菌等。

（2）飲用水微生物檢測方法

國家標準中，細菌總數(shù)是指1ml水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，于37℃經(jīng)24h培養(yǎng)后，所生長的細菌菌落的總數(shù)。

對生活飲用水，直接吸取1ml水樣于平皿中，加入營養(yǎng)瓊脂后混勻，37℃培養(yǎng)24h，進行計數(shù)。

按照規(guī)定格式報告每毫升水中細菌總數(shù)。

1 實驗條件與方法

1.1 實驗材料

營養(yǎng)瓊脂、蒸餾水

1.2 實驗儀器與設備

培養(yǎng)皿、燒杯、玻璃棒、量筒、滴管、試管、試管冒、試管架、錐形瓶、酒精燈、電爐、溶解鍋、托盤天平、藥匙、平板、接種環(huán)、高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、紗布、牛皮紙、細繩、細口瓶、移液管、橡膠塞、記號筆、標簽、吸水棉

1.3 實驗方案

1.3.1 培養(yǎng)基的配置

1.3.1.1 稱取和配制

根據(jù)要倒平板的數(shù)量計算各種需要的原材料的量，用托盤天平分別稱取蛋白胨、瓊脂、氯化鈉，用量筒量取蒸餾水，放入溶解鍋中，用電爐加熱溶解，加熱過程中不斷用玻璃棒攪拌。防止其焦化或溢出容器。

1.3.1.2 澄清、過濾

用兩層紗布，中間夾有薄層吸水棉，趁熱進行過濾，直至透明無沉淀。

1.3.1.3 滅菌

將配制好的培養(yǎng)基倒入錐形瓶中，用紗布將錐形瓶口塞全，然后用牛皮紙包好細繩將瓶口封緊放入高壓蒸汽滅菌鍋中，103.43kPa（121.3℃）壓力滅菌30分鐘。

1.3.1.4 倒平板

滅菌后，待固體培養(yǎng)基冷卻至60℃左右時在超凈工作臺上操作進行。

1..3.1.5 檢定

一般性狀的檢定；

無菌檢查：將配制好的培養(yǎng)基放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時，取出觀察，若無細菌生長則為合格。

1.3.2 取樣

1.3.2.1 采樣點分布與采樣時間

采樣點：隨機選擇濟南市相距較遠的集中供水的小區(qū)，在居民家中選取供水管網(wǎng)末梢水。

采樣時間：統(tǒng)一時間在不同地點取水，分工進行。

1.3.2.2 采樣方法

采樣時應先打開水龍頭放水兩分鐘，排除沉積物。

采樣前先對水龍頭進行消毒。

采集水樣不用過滿，細口瓶的2/3即可，蓋好試管帽，送回實驗室。

貼標簽，注意標記好取樣地點、時間、數(shù)值，并且記錄好原始記錄表。

取樣時直接采集，避免用水樣刷洗已滅菌的取樣瓶，并避免雙手或其他物品對取樣瓶口的污染

此水樣僅限于本實驗使用，禁止帶回實驗室供其他指標測定使用。

1.3.3 培養(yǎng)

1.3.3.1 梯度稀釋

梯度稀釋操作時應執(zhí)行無菌操作，試管口和移液管應在火焰的1-2cm處。從10ml取水中取1ml 置于相應的含有9ml的無菌蒸餾水中得到10-1濃度的稀釋原液再按上述方法分別做成10-2、10-3、10-4的濃度的稀釋溶液，分別貼好標簽作好記錄，放在試管架上待用。

1.3.3.2 接種

點燃酒精燈，將滴管放置于外焰中進行消毒，約3～5秒；

左手持培養(yǎng)基，右手持滴管，分別吸取各個梯度的稀釋溶液1ml，滴在培養(yǎng)基表面，并且用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面涂抹均勻；

接種完畢，培養(yǎng)基倒置放置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24–48小時。

1.3.3.3 菌群計數(shù)

培養(yǎng)后，計數(shù)每個平板上的菌群數(shù)，尤其是大腸桿菌菌群，可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏，在記下各平板菌群總數(shù)后，求出用稀釋后的各平板菌群數(shù)，計算出原始樣品每ml的菌群數(shù)。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理

根據(jù)公式N=∑C/2×d. N——中菌落數(shù)?！艭——平板中菌落數(shù)之和 d——稀釋度，可計算出N（cfu/ml）的值即樣品中菌落數(shù)。

2 實驗結果與分析

2.1 濟南市居民生活用水中的微生物含量

實驗結果顯示，濟南市居民生活用水中微生物的含量有一定差異，菌落含量由多到少為：農機小區(qū)>十里堡2>柿子園1>十里堡1，其他地點經(jīng)過培養(yǎng)并未得到有效的菌落，無法計數(shù)。

2.2 對濟南市居民生活用水中的微生物含量分析

從圖表中的數(shù)據(jù)可以看出農機小區(qū)、十里堡、柿子園這些地區(qū)取的四個水樣培養(yǎng)出了大腸桿菌，其他地區(qū)并未培養(yǎng)出相應的菌落，也沒得到有效的數(shù)據(jù)。根據(jù)已有數(shù)據(jù)個公式關系的推算，其中十里堡、柿子園的三個水樣并未超出國家飲用水標準（中國規(guī)定的衛(wèi)生標準是每毫升飲水中細菌總數(shù)不得超過100個），而農機小區(qū)的第三個稀釋水樣卻出現(xiàn)了超標的問題。

問題分析：

1）十里堡與柿子園由于村鎮(zhèn)原因，并不是24小時供水，居民都是在一天固定時間接水，用水桶儲存，取樣時沒有趕上放水時間，因此選取的是居民的儲存水。在這儲存水中，并不清楚儲存的具體時間，所以，實驗結果尚有一定的不精準性。

2）農機小區(qū)的結果比較令人吃驚，本身小區(qū)位于濟鋼附近，一段時間以來正在修路，并且取水時經(jīng)過詢問并未安裝凈化器，所以居民用水存在一定問題。

3）十里堡1的水樣中在10-1稀釋液為觀察到菌落而在10-2稀釋液中發(fā)現(xiàn)菌落這種情況下應該是操作過程中的問題，分兩個方面看，一是，在操作過程中10-1稀釋液應該有菌落生長但是未長；二是，10-2稀釋液中不應該生長菌落，但是生長，也有可能是實驗過程受到污染。同理，農機小區(qū)的10-3稀釋液也不排除這種可能。

3 結論

通過本實驗，得出了隨機取樣的濟南市居民生活用水中的微生物數(shù)量。其中，協(xié)和學院，冶金技師學院和郭西小區(qū)的飲用水能達到國家標準；通過十里堡和柿子園可以看出對于居民的供水經(jīng)過一段時間的存放，都會產生一定的細菌，所以在飲用前一定要進行滅菌，可以采用最簡單常用的加熱煮沸，就可以殺死絕大多數(shù)水中的細菌；通過農機小區(qū)可以看出，在家中安裝凈水器是有必要的，而且只是通過供水公司的達標并不一定能夠保證到達居民家中時還是與出廠時一致，運輸中也有可能發(fā)生不可預估的狀況。

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[責任編輯：張濤]endprint