夏志貴，楊曼尼，周水森

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

2011年全國(guó)瘧疾疫情分析

夏志貴，楊曼尼，周水森

2011年，全國(guó)27個(gè)省（市、區(qū)）782個(gè)縣（市、區(qū)）共報(bào)告瘧疾病例4479例，較2010年（7855例）下降 43.0%，年發(fā)病率降至 0.0334/萬(wàn)。死亡病例從2010年的19例增至30例。以縣（市、區(qū)）為單位統(tǒng)計(jì)，年發(fā)病率在10/萬(wàn)以上的縣有2個(gè)，分別為西藏墨脫縣（16.4660/萬(wàn)）和云南瑞麗市（12.2352/萬(wàn)）；年發(fā)病率在1/萬(wàn)～10/萬(wàn)的縣有11個(gè)，分別為云南省10個(gè)縣和貴州省1個(gè)縣；其余各縣年發(fā)病率均在1/萬(wàn)以下。與2010年相比，瘧疾流行范圍進(jìn)一步縮小。在報(bào)告病例中，本地感染病例占29.3%，主要分布在安徽（40.0%）、云南（25.8%）、河南（12.6%）、貴州（10.4%）和湖北（6.1%）；境外輸入病例占66.4%，主要分布在云南（36.5%）、江蘇（12.0%）、河南（6.2%）、四川（5.8%）和湖南（4.8%）；境內(nèi)輸入病例占4.3%。確診病例占81.7%，臨床診斷病例占18.3%。在確診病例中，間日瘧占56.7%，由25個(gè)?。ㄊ?、區(qū)）報(bào)告；惡性瘧占40.2%，由22個(gè)?。ㄊ?、區(qū)）報(bào)告；間日瘧和惡性瘧混合感染占1.1%，由10個(gè)?。ㄊ小^(qū)）報(bào)告；三日瘧或卵形瘧占1.9%，由14個(gè)?。ㄊ?、區(qū)）報(bào)告。32個(gè)本地感染惡性瘧僅在云南省。云南省仍是主要的瘧疾流行省區(qū)，報(bào)告瘧疾病例1522例，居全國(guó)第一，年發(fā)病率為0.3314/萬(wàn)，較2010年下降42.2%。其中，惡性瘧301例，占全國(guó)惡性瘧病例總數(shù)的20.3%。作為以前的主要瘧疾流行省區(qū)，海南省僅報(bào)告瘧疾病例9例，年發(fā)病率為0.0104/萬(wàn)，較2010年下降88.5%，排名降至第25位。作為另外一個(gè)瘧疾流行區(qū)域的中部地區(qū)，病例數(shù)大幅下降。然而，安徽省仍報(bào)告644例瘧疾病例，較2010年下降65.5%，排名第二位，占全國(guó)報(bào)告病例總數(shù)的14.4%，年發(fā)病率為0.1000/萬(wàn)。江蘇省報(bào)告瘧疾病例374例，年發(fā)病率為0.0508/萬(wàn)，較2010年下降3.1%。河南省報(bào)告瘧疾病例358例，年發(fā)病率為0.0387/萬(wàn)，較2010年下降59.9%。湖北省報(bào)告瘧疾病例167例，年發(fā)病率為0.0277/萬(wàn)，較2010年下降 61.1%。其他省份累計(jì)報(bào)告瘧疾病例占病例總數(shù)的31.4%。報(bào)告病例數(shù)在100～200例的省份分別為貴州、四川、廣西、廣東、浙江、湖南和山東。病例數(shù)少于100例的省份分別為福建、重慶、上海、河北、北京、天津、新疆、寧夏、江西、遼寧、山西、陜西、甘肅和西藏。雖然，我國(guó)消除瘧疾取得了較大成就，但仍面臨著一些問(wèn)題和挑戰(zhàn)。一是仍有近千個(gè)縣有病例報(bào)告，近200個(gè)縣有本地瘧疾流行，局部地區(qū)瘧疾傳播條件復(fù)雜，特別是安徽、云南、河南、貴州、湖北和西藏等?。▍^(qū)）仍有本地瘧疾傳播。二是境外輸入性瘧疾疫情突出，輸入性間日瘧、惡性瘧、卵形瘧和三日瘧在我國(guó)均有分布，對(duì)疫情相對(duì)穩(wěn)定地區(qū)帶來(lái)了潛在的風(fēng)險(xiǎn)，尤其輸入惡性瘧引起死亡，因此需要進(jìn)一步加強(qiáng)流動(dòng)人口管理和輸入性病例。三是臨床診斷病例仍是我國(guó)消除瘧疾階段存在的問(wèn)題，因此需要進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)室診斷能力。

來(lái)源出版物：中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志,2012,30(6):419-422

入選年份：2014

中國(guó)血吸蟲(chóng)病潛在流行區(qū)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

許靜，陳年高，馮婷，等

摘要：目的：評(píng)估幾種常用血吸蟲(chóng)病診斷方法，改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法，3張涂片）、尼龍絹集卵孵化法、膠體染料試紙條法（DDIA）、快速酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（F-ELISA）及2種間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（IHA-A和IHA-B）現(xiàn)場(chǎng)查病的效果。方法：2005年11月，選取江西省鄱陽(yáng)湖沿岸3個(gè)血吸蟲(chóng)病流行村的 6～65歲居民為調(diào)查對(duì)象，用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法，3張涂片）和尼龍絹集卵孵化法進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)的同時(shí)，分別用膠體染料試紙條法（DDIA）、快速酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（F-ELISA）及2種間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（IHAA和IHA-B）進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，以評(píng)價(jià)該幾種檢測(cè)方法的效果。結(jié)果：3村共檢測(cè)居民1864人，平均糞檢陽(yáng)性率為9.7%。改良加藤法在血吸蟲(chóng)病中度、重度流行區(qū)的漏檢率相對(duì)穩(wěn)定，為20.0%～27.8%；尼龍絹集卵孵化法的漏檢率在每克糞便蟲(chóng)卵數(shù)（EPG）＞100時(shí)相對(duì)穩(wěn)定（約25%）。DDIA、F-ELISA、IHA-A和IHA-B的平均陽(yáng)性率分別為47.8%、50.0%、66.3%和40.1%。以病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，DDIA、F-ELISA、IHA-A和IHA-B的敏感性分別為75.3%、65.8%、85.6%和76.0%；特異性為55.1%、51.7%、35.7%和63.6%。與其他幾種免疫血清學(xué)診斷方法相比，IHA-B試劑的特異性、Youden指數(shù)、陽(yáng)性似然比及糞檢符合率最高。DDIA法與IHA-B法的符合率最高（77.3%），而F-ELISA和IHA-A的符合率最低（61.5%）。結(jié)論：在血吸蟲(chóng)病中、重度流行區(qū)，改良加藤法蟲(chóng)卵檢出率和穩(wěn)定性均優(yōu)于尼龍絹集卵孵化法；IHA-A的敏感性最高，IHA-B的4個(gè)指標(biāo)最高，具有較高的現(xiàn)場(chǎng)使用價(jià)值，但需進(jìn)一步提高其敏感性。

來(lái)源出版物：中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志,2012,30(6): 428-433，437

入選年份：2014

浙江省1例輸入性卵形瘧的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析

王曉光，雷永良，蘭進(jìn)權(quán)，等

摘要：目的：利用病原學(xué)和分子生物學(xué)方法對(duì)浙江省1例輸入性卵形瘧原蟲(chóng)感染者（源自赤道幾內(nèi)亞）血樣標(biāo)本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室確診檢測(cè)，分別比較兩種方法的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)并分析傳統(tǒng)方法在操作過(guò)程中存在的技術(shù)問(wèn)題。方法：取患者服用抗瘧藥物前血樣50 μL，涂制薄、厚血片，自然干燥、甲醇固定、吉氏染色，于光學(xué)顯微鏡下查找瘧原蟲(chóng)。提取患者血樣基因組DNA，實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)其是否含有卵形瘧、間日瘧、惡性瘧或三日瘧原蟲(chóng)特異性DNA片段。結(jié)果：鏡檢結(jié)果顯示，患者血樣薄、厚血片均發(fā)現(xiàn)卵形瘧原蟲(chóng)蟲(chóng)體，鏡下可見(jiàn)被寄生的紅細(xì)胞脹大，呈橢圓形，有傘狀或鋸齒狀邊緣；在紅細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)瘧原蟲(chóng)環(huán)狀滋養(yǎng)體，蟲(chóng)體胞漿藍(lán)色。熒光定量PCR結(jié)果顯示，擴(kuò)增瘧原蟲(chóng)總型與4個(gè)型別：間日瘧、惡性瘧、卵形瘧、三日瘧原蟲(chóng)陽(yáng)性對(duì)照及患者血樣特異性DNA片段，均獲得理想的對(duì)數(shù)增長(zhǎng)曲線，患者血樣為卵形瘧原蟲(chóng)特異性 DNA片段陽(yáng)性，其他瘧原蟲(chóng)特異性DNA片段陰性。結(jié)論依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果與流行病學(xué)資料和臨床表現(xiàn)，確診該患者為輸入性卵形瘧原蟲(chóng)感染病例。病原學(xué)檢查薄血膜容易識(shí)別和鑒別蟲(chóng)種，但由于卵形瘧原蟲(chóng)感染者血中蟲(chóng)體數(shù)量較少，僅有尾部的單層紅細(xì)胞可用于形態(tài)學(xué)診斷，易出現(xiàn)漏檢；厚血膜中瘧原蟲(chóng)比較集中，易檢獲，但染色過(guò)程中紅細(xì)胞溶解，原蟲(chóng)形態(tài)有所改變，當(dāng)發(fā)生卵形瘧原蟲(chóng)和其他型瘧原蟲(chóng)混合感染時(shí)，蟲(chóng)種鑒別較為困難，不易識(shí)別，易出現(xiàn)混淆。分子生物學(xué)檢測(cè)耗時(shí)短、特異性好、適合大樣本操作的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)，對(duì)于傳統(tǒng)方法耗時(shí)較長(zhǎng)、對(duì)操作人員專業(yè)性及熟練程度要求高、不適用于大量人群的篩查等問(wèn)題是有效的補(bǔ)充。卵形瘧臨床表現(xiàn)頗似普通感冒，易發(fā)生混淆導(dǎo)致誤診，結(jié)合流行病學(xué)資料和臨床表現(xiàn)，利用二種實(shí)驗(yàn)室方法平行檢測(cè)，可明顯提高瘧原蟲(chóng)的檢出率，當(dāng)出現(xiàn)瘧原蟲(chóng)核酸陽(yáng)性的血樣與血涂片不相吻合的情況，回顧性查找或者重新涂片復(fù)核，都會(huì)識(shí)別到瘧原蟲(chóng)并不典型的細(xì)胞學(xué)形態(tài)。

卵形瘧；輸入病例；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)；實(shí)時(shí)熒光PCR

來(lái)源出版物：中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志,2013,31(1):78-79

入選年份：2014

阿托伐他汀通過(guò)RXRα介導(dǎo)的抗氧化應(yīng)激效應(yīng)抑制高脂喂養(yǎng)糖尿病ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的形成

林曉燕，林秋平，許昌聲，等

摘要：目的：觀察阿托伐他?。ˋtorv）對(duì)鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖尿病高脂喂養(yǎng)載脂蛋白 E敲除（apolipoprotein E knockout，ApoE-/-）小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的影響，探討阿托伐他汀在糖尿病合并高脂飲食條件下對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制。方法：C57小鼠8只作為對(duì)照，34只高脂喂養(yǎng)的ApoE-/-小鼠隨機(jī)分為3組：ApoE-/-組、STZ-ApoE-/-組和STZ-ApoE-/-+Atorv組。STZ腹腔注射建立糖尿病動(dòng)物模型，測(cè)定小鼠空腹血糖、血脂水平，HE染色圖像分析測(cè)定胸主動(dòng)脈斑塊面積；免疫雜交檢測(cè)主動(dòng)脈及細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶亞基gp91phox蛋白水平；Fenton反應(yīng)Griess顯色法測(cè)定血清及胸主動(dòng)脈勻漿上清液活性氧（ROS）水平。I型膠原酶消化法培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs），流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)ROS的水平，光澤精分析法測(cè)定NADPH氧化酶活性。采用干擾RNA和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方法評(píng)價(jià)類視黃醇X受體α（RXRα）在Atorv抑制氧化應(yīng)激中的作用。結(jié)果：（1）與C57組相比，ApoE-/-組小鼠胸主動(dòng)脈斑塊面積顯著增加［（215.88±34.19）μm2vs 0μm2，P＜0.01］，2 組間空腹血糖水平無(wú)顯著差異，血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、血清及胸主動(dòng)脈 ROS、胸主動(dòng)脈gp91phox表達(dá)水平顯著縮?。≒＜0.05）；（2）與ApoE-/-組相比，STZ-ApoE-/-組胸主動(dòng)脈斑塊面積進(jìn)一步增加［（314.13±35.72）μm2vs（215.88±34.19）μm2，P＜0.05］，血糖水平升高，血清TC、LDL-C、血清及胸主動(dòng)脈ROS、胸主動(dòng)脈gp91phox水平進(jìn)一步增加（P＜0.05）；（3）與 STZ-ApoE-/-組相比，STZ-ApoE-/-+Atorv組胸主動(dòng)脈粥樣斑塊面積顯著降低［（217.47±24.56）μm2vs （314.13±35.72）μm2，P＜0.05］，血糖、血清TG、HDL、TC和 LDL-C無(wú)顯著變化，血清及胸主動(dòng)脈ROS、胸主動(dòng)脈gp91phox水平亦顯著降低（P＜0.05）；（4）高糖（25mmol/L）干預(yù)后，HUVECs內(nèi)ROS含量、gp91phox蛋白水平及NADPH氧化酶活性明顯增加（P＜0.05），阿托伐他汀（10-8～10-6mol/L）顯著降低高糖環(huán)境下HUVECs胞內(nèi)ROS含量、gp91phox表達(dá)及NADPH氧化酶活性，且具有濃度依賴性；（5）將RXRαsiRNA轉(zhuǎn)染至 HUVECs之后，阿托伐他?。?0-6mol/L）對(duì)高糖環(huán)境下ROS生成及NADPH氧化酶活性的抑制效應(yīng)顯著減弱，RXRα質(zhì)粒轉(zhuǎn)染使RXRα過(guò)表達(dá)后，阿托伐他?。?0-6mol/L）抑制 ROS生成及NADPH氧化酶活性的作用明顯增強(qiáng)（P＜0.05）。結(jié)論：阿托伐他汀通過(guò)抑制高糖環(huán)境下機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化；核受體RXRα介導(dǎo)阿托伐他汀的抗氧化應(yīng)激效應(yīng)。

來(lái)源出版物：中國(guó)病理生理雜志,2014,30(9):1537-1545

入選年份：2014

BARF1表達(dá)下調(diào)通過(guò)活化caspase依賴的線粒體通路誘導(dǎo)EBV陽(yáng)性胃癌細(xì)胞凋亡

劉俊，張雪林，任永生，等

摘要：目的：研究EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）編碼的BARF1蛋白表達(dá)下調(diào)對(duì)EBV陽(yáng)性胃癌細(xì)胞凋亡的影響，并探討B(tài)ARF1基因沉默介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。方法：將BARF1小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）和陰性對(duì)照（negative control，NC）siRNA分別轉(zhuǎn)染EBV陽(yáng)性的人胃癌細(xì)胞系NUGC3和SNU719，運(yùn)用Western blot測(cè)定細(xì)胞中BARF1、Bcl-2、Bax、細(xì)胞色素C（cytochrome C，Cyt C）、caspase3和caspase9的蛋白表達(dá)；采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）測(cè)定BARF1、Bcl-2和Bax mRNA的表達(dá)；采用臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue）染色法測(cè)定細(xì)胞存活率；采用Annexin V-FITC/PI染色法和流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡；采用RayBio?細(xì)胞凋亡因子抗體芯片試劑盒分析細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)；采用線粒體膜電位（mitochodrial membrane potential，MMP）檢測(cè)試劑盒測(cè)定MMP；采用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）檢測(cè)細(xì)胞中凋亡蛋白酶活化因子1（apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1）和caspase9的相互作用。結(jié)果：與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組相比，BARF1基因沉默顯著抑制 NUGC3和SNU719細(xì)胞活力，顯著誘導(dǎo)NUGC3和SNU719細(xì)胞凋亡，且顯著降低NUGC3和SNU719細(xì)胞的MMP。BARF1基因沉默能促進(jìn)促凋亡蛋白（Bax、caspase3）p21和 p27）的表達(dá)并抑制抗凋亡蛋白（Bcl-2）cIAP-2和survivin）的表達(dá)，Bcl-2/Bax比例顯著降低；而caspase抑制劑能抑制由BARF1基因沉默介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。在BARF1 siRNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中，caspase3和caspase9蛋白發(fā)生裂解，Cyt C的濃度顯著高于陰性對(duì)照組，Apaf-1蛋白與caspase9蛋白在細(xì)胞質(zhì)中能夠發(fā)生相互作用。結(jié)論：BARF1基因沉默通過(guò)線粒體途徑調(diào)節(jié)Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)進(jìn)而誘導(dǎo)NUGC3和SNU719細(xì)胞凋亡，并呈caspase通路依賴關(guān)系。

來(lái)源出版物：中國(guó)病理生理雜志,2015,31(11):1970-1978

入選年份：2015

脂多糖持續(xù)刺激巨噬細(xì)胞的免疫學(xué)機(jī)制初探

龍?jiān)树耄惙f，余汝媛，等

摘要：目的：探討巨噬細(xì)胞在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）的持續(xù)刺激下產(chǎn)生免疫抑制后的表型變化及對(duì) T細(xì)胞影響的分子機(jī)制。方法：蔗糖密度梯度離心法從全血中分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞，結(jié)合磁珠細(xì)胞分選技術(shù)分選出單核細(xì)胞，體外誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞，以未處理和干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ）處理為對(duì)照，對(duì)LPS處理48 h的巨噬細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞表面分子［人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-DR、HLA-ABC、CC 類趨化因子受體7（chemokine CC-motif receptor7，CCR7）、CD14 及 CD40）］表達(dá)的檢測(cè)和細(xì)胞因子［白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-10、IL-12）IL-6及腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）］分泌水平的檢測(cè)。同時(shí)將LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞與 CD3+T細(xì)胞進(jìn)行異體共培養(yǎng)，進(jìn)一步觀察巨噬細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞增殖能力的影響。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證Toll樣受體4（Toll-like receptor 4，TLR4）信號(hào)通路中的非髓樣分化因子88（myeloid differentiation factor88，MyD88）依賴型途徑相關(guān)分子的表達(dá)水平。結(jié)果：LPS處理48 h的巨噬細(xì)胞，抗原遞呈能力（HLA-DR）下降，免疫抑制細(xì)胞因子IL-10升高；巨噬細(xì)胞在LPS和IFN-γ刺激24 h后無(wú)凋亡發(fā)生；把LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞與異體T細(xì)胞共培養(yǎng)6 d，其促進(jìn)CD8+T細(xì)胞增殖的能力較弱。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，LPS持續(xù)刺激下巨噬細(xì)胞的TRIF（TIR domain-containing adaptor-inducing interferon-βprotein）、干擾素調(diào)節(jié)因子3（interferon regulatory factor3，IRF3）和主要組織相容性復(fù)合體II類反式激活因子（major histocompatibility complex class II transactivator，CIITA）均呈下調(diào)狀態(tài)。結(jié)論：持續(xù)LPS處理巨噬細(xì)胞48 h后，巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)一種免疫抑制的狀態(tài)，且其刺激CD8+T細(xì)胞增殖的能力減弱，這種狀態(tài)與非MyD88依賴型TLR4信號(hào)通路受損有關(guān)。

來(lái)源出版物：中國(guó)病理生理雜志,2015,31(6):1048-1055

入選年份：2015