韓 瑾，張 蒙，許遵鵬，潘 敏，李東至，廖 燦

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東 廣州 510623)

孕早期血清胎盤生長因子在妊娠期高血壓疾病篩查中的應用

韓 瑾，張 蒙，許遵鵬，潘 敏，李東至，廖 燦

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東 廣州 510623)

目的 探討孕早期母體血清胎盤生長因子(PLGF)與妊娠期高血壓疾病的關系。方法采用熒光免疫分析法檢測妊娠早期590例正常孕婦及118例妊娠期高血壓病孕婦PLGF血清濃度，其中重度子癇前期組45例，輕度子癇前期組37例，妊娠期高血壓組36例，應用Logistic回歸分析和受試者工作特征(ROC)曲線評價PLGF應用對妊娠期高血壓疾病的診斷價值。結果研究顯示正常孕婦血清PLGF濃度隨孕周增加而上升(b=0.40，P<0.0001)。經孕周校正后的對數(shù)(Log)10PLGF中位數(shù)倍數(shù)(MoM)值分別是：正常對照組1.02(0.96～1.09)，重度子癇前期組0.86(0.77～0.93)，輕度子癇前期組0.97(0.89～1.03)，妊娠期高血壓組0.98(0.90～1.05)。重度子癇前期組PLGF濃度顯著降低，與正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組相比均有顯著性差異(H=18.5，P<0.0001)；輕度子癇前期組與對照組PLGF濃度也明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(H=14.6，P=0.001)，其余各組間無統(tǒng)計學差異。當妊娠早期孕婦血清PLGF≤31.40pg/mL時，預測重度子癇前期敏感度為82.20%，特異度79.30%。結論妊娠高血壓疾病孕婦孕早期血清PLGF濃度明顯降低，妊娠早期檢測PLGF對該病有重要預測價值。

妊娠期高血壓疾??；胎盤生長因子；孕早期；產前篩查

胎盤生長因子(maternal serum placental growth factor，PLGF)是血管生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中成員，表達于胎盤滋養(yǎng)細胞，通過特異結合受體VEGFR-1/Flt-1(fms-like tyrosine kinase-1)激活其生物學功效，對滋養(yǎng)層細胞及內皮細胞功能有重要調節(jié)作用，從而對血管生成有產生作用。妊娠期高血壓疾病是妊娠特有疾病，其發(fā)病機制及病因不十分清楚，發(fā)病率約5%～12%，嚴重影響母嬰健康。近年來PLGF與妊娠期高血壓病關系受到廣泛關注，Chappell等[1]研究發(fā)現(xiàn)低濃度PLGF對在2周內發(fā)展為子癇前期(pre-eclampsia，PE)的孕婦有很好預測作用，Boucoiran等[2]通過對妊娠11～14周、18～22周PLGF預測子癇前期分析發(fā)現(xiàn)，選擇早孕期篩查先兆子癇效果會明顯優(yōu)于孕中期篩查。但PLGF是否在我國妊娠高血壓病孕婦有預測作用并未見研究報道，作為唐氏篩查的早期標記物PLGF已在國外開展臨床應用，為早期篩查妊娠期高血壓疾病提供了適當?shù)呐R床檢測時機。本研究旨在探討早孕期PLGF濃度對中國人群先兆子癇發(fā)生、嚴重程度的預測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月至2014年1月在廣州市婦女兒童醫(yī)療中心產科住院分娩的妊娠高血壓疾病孕婦118例為研究研究對象，其診斷和分類標準參照《婦產科學》[3]，依據病情嚴重程度分為3組，其中輕度子癇組30例，孕周(37.50±2.20)周，年齡(30.30±4.30)歲；重度子癇前期組32例，孕周(32.60±4.30)周，年齡(30.50±4.20)歲；妊娠期高血壓組36例。選取符合條件的正常孕婦590例為對照組，平均孕周(39.20 ±2.10)周，平均年齡(29.50±3.50)歲。3個研究組和對照組均在孕期常規(guī)參加早期唐氏篩查，經知情同意后，孕婦血清樣本貯存于-20℃的冰箱，各組孕婦均為單胎，孕前均無原發(fā)性高血壓、糖尿病、慢性腎炎、甲狀腺功能亢進、肝炎及結核等急慢性疾病史，無煙酒不良嗜好，孕期隨訪如胎兒患有染色體異常、結構畸形的孕婦均排除出組。所有患者均為漢族，自然受孕，各組孕婦年齡、孕周比較差異無顯著性差異(均P>0.05)。

1.2 方法

血清中PLGF的濃度水平測定采用時間分辨熒光免疫分析法。測量所用儀器、試劑和質控品均為美國Perkin Elmer公司生產的Auto Delfial235全自動時間分辨熒光免疫分析儀和Delfia試劑，檢測前1天，將樣本移至4℃的冰箱初步復溶，測量當日將樣本置于室溫(25～26℃)進行再次復溶30min，待血清完全溶解，將血清從離心管移至取樣量杯內，將樣本置于AutoDELFIA 1235自動免疫系統(tǒng)進行濃度檢測和分析，操作嚴格按照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學方法

將PLGF濃度經對數(shù)(Log)轉換后，獲得測量數(shù)據的正態(tài)分布，所有的濃度測量值均轉換為中位數(shù)倍數(shù)(multiples of the median，MoM)，并用母親體重指數(shù)、孕齡對MoM值進行校正，通過回歸重新獲得中位數(shù)方程，生成MoM值。采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，連續(xù)型變量應用K-S法進行正態(tài)性檢驗；分類變量之間的差異轉換為頻數(shù)和百分比，用Chi-square檢驗進行分析比較；多組定量資料比較時，若變量為正態(tài)分布且方差齊時，應用單因素方差分析法，若為非正態(tài)分布或方差不齊時用Kruskale-Wallis檢驗法；行一元回歸分析評估血清PLGF與孕婦體重或體重指數(shù)、預產年齡、孕周是否相關；利用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic，ROC)對生化指標診斷學價值進行分析，同時計算曲線下面積及95%置信區(qū)間，通過Logistic回歸分析獲得各指標聯(lián)合診斷價值。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 研究病例的一般資料比較

本研究共有708例孕婦作為研究對象，正常孕婦590例，妊娠期高血壓疾病118例，其中重度子癇前期45例，輕度子癇前期37例，妊娠期高血壓36例。4組孕婦預產年齡、孕周、樣本儲存時間、孕產次、孕婦體重比較，顯示4組間差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。體重指數(shù)(body mass index，BMI)在重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組分別為21.0(19.2～23.4)、22.1(19.6～23.8)、21.6(18.9～25.1)、20.3(18.7～22.0)kg/m2，4組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)，見表1。

表1 病例組與對照組母體一般特征的比較

注：*為Kruskale-Wallis法進行比較得出的H值，**為卡方檢驗得出卡方值?！锱c正常對照組相比有統(tǒng)計學差異。

2.2 組間妊娠結局的比較

重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組分娩孕周分別為35.60(33.90～38.00)、39.00(37.90～39.60)、39.4(38.00～40.10)、39.40(38.70～40.10)周。應用Bonferroni法比較，重度子癇前期組分娩時間明顯早于其他3組(P值均為0.00)差異有統(tǒng)計學意義，輕度子癇前期組低于正常對照組(P=0.001)。

重度子癇前期組、輕度子癇前期組、妊娠期高血壓組及正常對照組胎兒體重分別為2.17(1.45～2.83)kg、3.10(2.67～3.45)kg、3.11(2.78～3.38)kg、3.24(3.03～3.48)kg。重度子癇前期組低于正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組(均P=0.000)，余各組間無統(tǒng)計學差異，見表2。

表2 各組間妊娠結局的比較

注：統(tǒng)計值均為Kruskale-Wallis法進行比較得出的H值?！餅榕c正常對照組比較差異有統(tǒng)計學差異，▲為與輕度子癇前期組比較差異有統(tǒng)計學差異，■為與妊娠期高血壓組比較差異有統(tǒng)計學差異。

2.3 正常孕婦血清PLGF濃度的分布

經K-S檢驗對照組PLGF濃度呈非正態(tài)分布，將PLGF進行對數(shù)轉換Log10 PLGF(pg/mL)為正態(tài)分布。采用一元線性回歸探討Log10 PLGF(pg/mL)的影響因素，從而避免混雜因素的存在導致分析數(shù)據的偏倚。孕婦血清PLGF濃度與孕周呈正相關(b=0.40，P<0.0001)，本研究中590例正常孕婦通過最佳擬合加權回歸曲線獲得PLGF中位數(shù)值水平，公式為：Log10 PLGF(pg/mL)=0.11+0.017×孕周，見圖1。

圖1 正常妊娠孕婦血清Log10 PLGF(pg/mL)在不同孕周(天)的分布

2.4 胎盤生長因子濃度在病例組與對照組的比較

正常孕婦血清PLGF濃度水平隨孕周而升高(b=0.40，P<0.0001)，經孕周校正后的Log10PLGFMoM值在正常對照組為1.02(0.96～1.09)，重度子癇前期組為0.86(0.77～0.93)，輕度子癇前期組0.97(0.89～1.03)及妊娠期高血壓組0.98(0.90～1.05)，重度子癇前期孕婦血清PLGF濃度與正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組相比顯著降低(H=18.5,P<0.0001)；輕度子癇前期組較對照組顯著，差異有統(tǒng)計學意義(H=14.6,P=0.001)，其余各組無顯著性差異，見圖2。

圖2 PLGF濃度4組孕婦之間的比較

2.5 胎盤生長因子對重度的預測

重度子癇前期孕婦血清PLGF濃度顯著低于其他3組，PLGF在診斷重度子癇前期ROC曲線下面積為0.83，95%可信區(qū)間下限大于70.00%，其Log10PLGFMoM陽性判斷值為0.94，對應的PLGF(pg/mL)為31.40 pg/mL。當孕早期PLGF≤31.4pg/ml時，預測重度子癇前期的敏感度為82.20%，特異度79.30%，見圖3。

圖3 PLGF對重度子癇前期的診斷價值

3 討論

妊娠期高血壓疾病是全世界孕產婦和圍產兒死亡的重要原因之一，對母胎危害性較大，早孕期篩查高危人群可以應用阿司匹林預防PE及降低并發(fā)癥發(fā)生，選擇合適的篩查指標預測高血壓孕婦將對臨床結局改善有重大作用[4]。PLGF為同型二聚體糖蛋白，屬VEGF家族成員，通過特異性結合VEGFR-1/Flt-1受體來激活其生物學功能，對母體胎盤血管重鑄有重要作用，PLGF也是胎盤血管形成的重要條件，因此PLGF濃度的變化可間接反應胎盤功能。

3.1 胎盤生長因子在正常孕婦與妊娠高血壓疾病的孕婦血液中濃度

PLGF在正常孕婦血清中濃度較高，而未孕女性及男性體內PLGF極低甚至檢測不到，正常孕婦中早期血清PLGF濃度較低，15周后明顯上升，28～30周達到高峰后下降，而在妊娠小于30周PE孕婦，PLGF水平均呈較低水平。國外研究認為通過比較孕早期子癇前期孕婦和正常對照組母體血清中妊娠相關蛋白-A、PLGF及母體相關指標，如平均動脈壓(mean arterial pressure, MAP)、子宮動脈PI值等，發(fā)現(xiàn)PLGF濃度在子癇前期孕婦中明顯下降，尤其在早發(fā)型子癇前期孕婦，聯(lián)合應用這些指標可篩查出93.10%的早發(fā)型子癇前期、35.70%晚發(fā)型子癇前期及18.30%妊娠期高血壓孕婦，認為妊娠早期PLGF濃度變化可預測子癇前期的發(fā)生[5]。

本研究顯示妊娠11～13+6周外周血PLGF濃度隨孕周上升，與國外研究相似，因此在進行PLGF計算時需考慮進行相關孕周矯正，本研究為避免混雜因素對實驗結果產生偏倚，對病例組和對照組進行嚴格匹配，3組病例組和對照組孕婦的采樣孕周、預產年齡、樣本貯存時間、孕產次及體重因素間均無顯著性差異，但發(fā)現(xiàn)體重指數(shù)(BMI)在各組間有統(tǒng)計學差異，通過一元線性回歸分析混雜因素對PLGF的影響，發(fā)現(xiàn)PLGF與體重指數(shù)無顯著相關，這一結論同Gullai等[6]學者研究結果相一致。重度子癇前期組分娩孕周顯著早于其他3組，胎兒的出生體重也低于正常對照組、輕度子癇前期組及妊娠期高血壓組。

3.2 PLGF在妊娠期高血壓疾病的診斷價值

本研究顯示重度PE孕婦外周血PLGF濃度較其他3組顯著降低，輕度PE與妊娠期高血壓組比較也低于正常孕婦組，提示妊娠早期PLGF對妊娠期高血壓疾病有一定預測作用，這與我國張琳的研究結果類似[7]，尤其是對重度子癇前期預測意義較高，ROC面積為0.83，診斷靈敏度和特異度分別為82.20%和79.30%，結果顯示PLGF濃度切割值為31.40pg/mL。由于重度子癇前期與圍產兒病死率和母體并發(fā)癥關系更為密切，因此應用PLGF預測重度子癇前期將有良好的臨床應用前景。國外研究還發(fā)現(xiàn)低濃度PLGF對2周內發(fā)展為PE的孕婦也有很好預測作用，而且較現(xiàn)行的常規(guī)檢查如血壓、尿蛋白定量等效果更好，因此妊娠中晚期檢測PLGF同樣可預測PE發(fā)生，當假陽性率為5%時，檢出率達93.70%[8]。

綜上所述，妊娠早期孕婦血清PLGF下降對PE有重要預測價值，可以考慮常規(guī)用于臨床PE的孕早期及孕中晚期的人群篩查。

[1]Chappell L C,Duckworth S,Seed P T,etal.Diagnostic accuracy of placental growth factor in women with suspected preeclampsia: a prospective multicenter study[J].Circulation,2013,128 (19):2121-2131.

[2]Boucoiran I,Suarthana E,Rey E,etal.Repeated measures of placental growth factor,placental protein 13,and a disintegrin and metalloprotease 12 at first and second trimesters for preeclampsia screening[J].Am J Perinatol,2013,30(8):681-688.

[3]謝幸,茍文麗,林仲秋,等.婦產科學[M].8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:65-66.

[4]Roberge S,Villa P,Nicolaides K,etal.Early administration of low dose aspirin for the prevention of preterm and term preeclampsia:a systematic review and meta-analysis [J].Fetal Diagn Ther,2012,31(3): 141-146.

[5]Crovetto F,Fiqueras F,Triunfo S,etal.Added value of angiogenic factors for the prediction of early and late preeclampsia in the first trimester of pregnancy[J].Fetal Diagn Ther,2014,35 (4):258-266.

[6]Gullai N,Stenczer B,Molvarec A,etal.Evaluation of a rapid and simple placental growth factor test in hypertensive disorders of pregnancy[J].Hypertens Res,2013,36(5):457-462.

[7]張琳,沈樹娜,王輝.HIF-1α和PlGF與子癇前期發(fā)病的關系[J].中國婦幼健康研究,2009,20(5):494-496.

[8]Nicolaides K H.Screening for fetal aneuploidies at 11 to 13 weeks[J].Prenat Diagn,2011,31(1):7-15.

[專業(yè)責任編輯：楊文方]

Application of first-trimester serum placental growth factor in the screening for gestational hypertension

HAN Jin, ZHANG Meng, XU Zun-peng, PAN Min, LI Dong-zhi, LIAO Can

(GuangzhouWomanandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510623,China)

Objective To investigate the correlation between first-trimester serum placental growth factor (PLGF) and gestational hypertension. Methods A total of 590 cases of healthy pregnant women and 118 cases of pregnant women diagnosed with gestational hypertension were chosen as research objects. Their serum concentrations of PLGF were measured by fluorescence immunoassay in their first-trimester pregnancy. The 118 cases of women with gestational hypertension were divided into severe preeclampsia group (n=45), mild preeclampsia group (n=37) and gestational hypertension group (n=36). Logistic regression analysis and receiver operating characteristic curve (ROC) were used to analyze the diagnostic value of PLGF for gestational hypertension. Results Research showed that serum concentration of PLGF grew with gestational weeks in healthy pregnant women (b=0.40,P<0.0001). The value of multiples of the median (MoM) of Log10PLGF after correction for gestational weeks was 1.02 (0.96-1.09) in the control group of healthy pregnant women, 0.86 (0.77-0.93) in severe preeclampsia group, 0.97 (0.89-1.03) in mild preeclampsia group and 0.98 (0.90-1.05) in gestational hypertension group, respectively. Significant decrease was identified in serum concentration of PLGF in severe preeclampsia group and when compared with control group, mild preeclampsia group and gestational hypertension group were significantly different (H=18.5,P<0.0001). Obvious drops in PLGF concentration were also seen in mild preeclampsia group and control group, and the difference was of statistical significance (H=14.6,P=0.001). No statistical difference was noted when other intergroup comparisons were made. When patients' serum concentration of PLGF was lower than or equal to 31.40pg/mL, its sensitivity and specificity for the prediction of severe preeclampsia reached 82.20% and 79.30%, respectively. Conclusion The concentration of PLGF decreases significantly in pregnant women with hypertension at their first trimester. The detection of PLGF at the first trimester can work as a valuable marker for the prediction of gestational hypertension.

gestational hypertension; placental growth factor (PLGF); first trimester; prenatal screening

2016-05-17

廣東省衛(wèi)計委資助項目(A2013515)；廣東省科技廳資助項目(2016A20218003)；廣州市衛(wèi)生局資助項目(201102A213089)

韓 瑾(1978-)，女，副主任醫(yī)師，碩士，主要從事產前診斷研究。

廖 燦，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2016.06.009

R714.2

A

1673-5293(2016)06-0698-04