李雪玲 柴建民 張乃鋒 張 蓉 王 杰 王世琴 陶大勇 刁其玉*

(1．塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，阿拉爾843300；2．中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京100081)

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斷奶羔羊4種必需氨基酸限制性順序和需要量模型探索

李雪玲1,2柴建民2張乃鋒2張 蓉2王 杰2王世琴2陶大勇1*刁其玉2*

(1．塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，阿拉爾843300；2．中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京100081)

本試驗(yàn)旨在采用氨基酸部分扣除法研究斷奶羔羊的4種必需氨基酸的限制性順序和需要模型。選取50日齡斷奶湖羊公羊100只隨機(jī)分為5組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只羊。對(duì)照組為氨基酸平衡(PC)組，飼喂氨基酸平衡的開(kāi)食料，4個(gè)試驗(yàn)組開(kāi)食料在PC組的基礎(chǔ)上分別扣除賴氨酸(PD-Lys組)、蛋氨酸(PD-Met組)、蘇氨酸(PD-Thr組)和色氨酸(PD-Trp組)，其余氨基酸含量保持一致。預(yù)試期為10 d，正試期為60 d。于羔羊60、90和120日齡稱量體重，在120日齡每組隨機(jī)選取6只羔羊進(jìn)行屠宰。結(jié)果表明：1)60～120日齡和90～120日齡，PD-Met組羔羊平均日增重(ADG)顯著低于其他各組(P<0.05)，飼料轉(zhuǎn)化率(F/G)顯著高于其他各組(P<0.05)；120日齡時(shí)，PD-Met組宰前活重、空體重、胴體重、眼肌面積、頭重、蹄重及皮毛重均顯著低于PC、PD-Thr和PD-Trp組(P<0.05)，但是5組間屠宰率(DP)、GR值和血液重差異不顯著(P>0.05)。2)以最佳ADG和F/G為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡氨基酸限制性順序?yàn)镸et、Lys、Thr和Trp；而以最佳DP為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，120日齡氨基酸的限制性順序?yàn)門rp、Thr、Lys、Met。3)以最佳ADG作為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶44∶44∶8和100∶42∶38∶12；以最佳F/G作為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶54∶45∶7和100∶47∶39∶12；以最佳DP為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例為100∶34∶38∶8?？傊暭Z必需氨基酸(Lys、Met、Thr和Trp)缺乏嚴(yán)重影響湖羊斷奶羔羊的生長(zhǎng)性能、屠宰性能和器官指數(shù)，特別是Met影響最為明顯，其次是Lys，Thr和Trp影響較弱；不同評(píng)價(jià)指標(biāo)(ADG、F/G和DP)和不同生長(zhǎng)階段得出的Lys、Met、Thr和Trp的限制性順序和需要模型是不同的。

湖羊；斷奶羔羊；開(kāi)食料；氨基酸模型；賴氨酸；蛋氨酸；色氨酸

必需氨基酸(essential amino acids，EAA)是動(dòng)物自身不能合成，構(gòu)成動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)骨架所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1]。氨基酸平衡有利于動(dòng)物生長(zhǎng)相關(guān)生物活性物質(zhì)的合成，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)和發(fā)育具有重要意義[2]。目前，對(duì)于斷奶后羔羊氨基酸平衡模式的研究處于空白階段，通過(guò)確立此階段羔羊氨基酸平衡模式對(duì)提高生產(chǎn)性能、機(jī)體免疫機(jī)能、飼料利用效率和減輕養(yǎng)殖廢棄物對(duì)環(huán)境造成的污染都有重要意義[3]。張乃鋒等[4]和王建紅等[5]通過(guò)氨基酸部分扣除法獲得了不同生長(zhǎng)階段犢牛賴氨酸、蛋氨酸和蘇氨酸平衡模式，獲得了較好的結(jié)果。Kerr等[6]和Zhang等[7]研究表明，適宜的飼糧賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和色氨酸含量可提高生長(zhǎng)豬的生長(zhǎng)性能。早在20世紀(jì)50年代，限制性氨基酸順序已在豬、禽配合飼糧中得到廣泛的研究。王建紅等[5]發(fā)現(xiàn)在犢牛上賴氨酸、蛋氨酸和蘇氨酸分別為第一、第二和第三限制性氨基酸[8]，但NRC(2012)和研究者們并未給出羔羊限制性氨基酸順序[9]。隨著氨基酸營(yíng)養(yǎng)研究的不斷深入，限制性氨基酸的研究可揭示不同生理階段氨基酸的順序，及進(jìn)一步確定氨基酸對(duì)羔羊生長(zhǎng)的限制性程度。目前，有關(guān)于斷奶羔羊需要量的研究鮮見(jiàn)報(bào)道，飼糧氨基酸組成及比例，即理想氨基酸模式的研究還處于空白，有必要對(duì)氨基酸需要量及其理想氨基酸模式開(kāi)展研究，制定適合羔羊生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)，用來(lái)指導(dǎo)羔羊的生產(chǎn)，提高養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益和改善生態(tài)環(huán)境[10]。為此，本試驗(yàn)主要目標(biāo)是采用氨基酸部分扣除法對(duì)60～120日齡湖羊羔羊開(kāi)食料中必需氨基酸限制性順序和適宜的氨基酸模式進(jìn)行研究，利用飼養(yǎng)試驗(yàn)和屠宰試驗(yàn)，確立斷奶后羔羊獲得最佳平均日增重(ADG)、飼料轉(zhuǎn)化率(F/G)和屠宰率(dressing percentage,DP)時(shí)開(kāi)食料中適宜的氨基酸模型，為科學(xué)飼養(yǎng)提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

試驗(yàn)于2015年10月7日至2015年12月7日在江蘇省泰州市海倫羊業(yè)有限公司進(jìn)行，營(yíng)養(yǎng)水平分析在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所家畜營(yíng)養(yǎng)與飼料研究室進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)參照Wang等[11]的氨基酸部分扣除法，采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取100只50日齡斷奶體重11 kg左右湖羊公羔羊，按體重相近、日齡相同原則分為5組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只。并根據(jù)部分扣除法，將羔羊分為氨基酸平衡(PC)組、30%扣除Lys(PD-Lys)組、30%扣除Met(PD-Met)組、30%扣除Thr(PD-Thr)組和30%扣除Trp(PD-Trp)組。

1.3 試驗(yàn)飼糧

根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室研究成果[12]，設(shè)計(jì)PC組開(kāi)食料的蛋白質(zhì)水平為15.0%。羔羊氨基酸平衡模式的Met需要量為0.38%(Met為CP的6.4%)[13]，根據(jù)Storm等[14]提出的Lys∶Met為3.1∶1.0，計(jì)算Lys需要量，再應(yīng)用刁其玉[1]提出羔羊的氨基酸平衡模型(Lys∶Thr∶Trp為100.0∶50.5∶14.3)計(jì)算Thr、Trp需要量。PC組開(kāi)食料Lys、Met、Thr和Trp含量分別為1.16%、0.38%、0.58%和0.16%。各組開(kāi)食料通過(guò)調(diào)整過(guò)瘤胃保護(hù)氨基酸添加量而形成。試驗(yàn)用過(guò)瘤胃保護(hù)賴氨酸由德固賽有限公司提供，過(guò)瘤胃保護(hù)蛋氨酸由希杰有限公司提供，過(guò)瘤胃保護(hù)蘇氨酸和過(guò)瘤胃保護(hù)色氨酸由康德權(quán)科技有限公司提供，其中各含賴氨酸鹽酸鹽、蛋氨酸鹽酸鹽、蘇氨酸鹽酸鹽和色氨酸鹽酸鹽65%左右，過(guò)瘤胃率≥80%。開(kāi)食料氨基酸設(shè)定含量、開(kāi)食料組成及營(yíng)養(yǎng)水平分別見(jiàn)表1和表2。

表1 開(kāi)食料氨基酸設(shè)定含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))

計(jì)算值 Calculated values。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羔羊每圈(200 cm×375 cm)5只，50日齡開(kāi)始訓(xùn)練采食開(kāi)食料，60～120日齡開(kāi)食料日飼喂量根據(jù)McMillan[16]提出的按羔羊體重的4%進(jìn)行飼喂。開(kāi)食料每日飼喂2次(08:00和16:00)，自由飲水。每只羊活動(dòng)空間約為1.50 m2，每半個(gè)月對(duì)所有欄位進(jìn)行消毒1次(輪流使用2.0%火堿溶液、0.5%聚維酮碘溶液、0.2%氯異氰脲酸溶液)。所有試驗(yàn)羔羊均按羊場(chǎng)正常的免疫程序進(jìn)行免疫。

表2 開(kāi)食料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克開(kāi)食料提供Premix provided the following per kg of starters:VA 15 000 IU,VD 5 000 IU,VE 90 IU,Cu 12 mg,Fe 90 mg,Mn 56 mg,Zn 100 mg,I 0.8 mg,Se 0.3 mg,Co 0.5 mg。

2)除代謝能為計(jì)算值外，其余均為實(shí)測(cè)值。營(yíng)養(yǎng)水平測(cè)定參考《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[15]。ME was a calculated value, while the rest nutrient levels were measured values. Nutrient levels were determined in reference toFeedAnalysisandFeedQualityAnalysisTechnics[15].

1.5 樣品采集及測(cè)定指標(biāo)和方法

1.5.1 開(kāi)食料營(yíng)養(yǎng)水平

總能使用Parr-6400氧彈量熱儀測(cè)定；粗蛋白質(zhì)含量采用KDY-9830全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定；干物質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、鈣、磷含量參考《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[15]測(cè)定。開(kāi)食料氨基酸含量采用氨基酸自動(dòng)分析儀(L-8800，日本日立公司)進(jìn)行測(cè)定，具體方法如下：樣品粉碎過(guò)60目，在水解管內(nèi)加6 mol/L HCl 10 mL，真空泵抽真空，(110±1) ℃恒溫干燥箱內(nèi)水解24 h，冷卻、過(guò)濾，干燥器中蒸干，再加入1 mL的0.02 mol/L HCl溶解，在空氣中放置30 min測(cè)定氨基酸含量；測(cè)定色氨酸含量時(shí)用5 mol/L的NaOH溶液水解，測(cè)定其含量[17]。

1.5.2 生長(zhǎng)性能

ADG：準(zhǔn)確稱量并記錄60、90及120日齡晨飼前羔羊體重，計(jì)算出60～90日齡和90～120日齡ADG。

采食量：每天準(zhǔn)確記錄每圈開(kāi)食料的飼喂量及剩料量，開(kāi)食料的飼喂量根據(jù)體重在60日齡及之后的每30 d進(jìn)行1次調(diào)整。

F/G：根據(jù)ADG及采食量計(jì)算各階段的F/G。

1.5.3 屠宰性能及器官指數(shù)

于120日齡時(shí)每組選取健康、接近平均體重的6只羔羊，禁食、禁水16 h后進(jìn)行屠宰，并在屠宰當(dāng)天08：00稱量宰前活重(live weight before slaughter,LWBS)。羔羊進(jìn)行放血屠宰，之后剝皮，去頭、蹄、內(nèi)臟后稱量胴體重。按照《家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)》進(jìn)行解剖，分離羔羊內(nèi)臟，稱量心臟、肝臟、肺臟、脾臟、腎臟各內(nèi)臟器官鮮重，并計(jì)算各器官占宰前活重比例；消化道清除內(nèi)容物并清洗干凈，分別稱取瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃以及大腸和小腸的重量，計(jì)算每個(gè)胃占宰前活重比例及占復(fù)胃總重(total stomachus compositus weight,TCSW)比例[18]，準(zhǔn)確記錄相關(guān)的數(shù)據(jù)。

空體重(empty body weight,EBW,kg)=
宰前活重-胃腸道內(nèi)容物總重；
胴體重(carcass weight,CW,kg)=宰前活重-
皮毛、頭、蹄、生殖器官及
周圍脂肪、內(nèi)臟(保留腎臟及
周圍脂肪)的重量；
DP(%)=100×胴體重/宰前活重；
器官重占宰前活重比例(%)=100×
器官重/宰前活重；
單個(gè)胃室重占復(fù)胃總重比例(%)=100×
單個(gè)胃室重/4個(gè)胃室總重。

屠宰后，使用硫酸紙描繪倒數(shù)第1和第2根肋骨之間背最長(zhǎng)肌的輪廓，并用求積儀(CS-Ⅰ，江蘇省無(wú)錫測(cè)繪儀器廠)求出輪廓面積，即眼肌面積。使用游標(biāo)卡尺測(cè)量第12和13根肋骨之間距離背脊中線11 cm處組織的厚度，每只羊重復(fù)測(cè)量3次，取其平均值即為GR值。

眼肌面積(ribeye area,RA,cm2)=
讀數(shù)差值×20/100。

1.5.4 氨基酸順序和比例計(jì)算

氨基酸限制性順序和最優(yōu)比例的計(jì)算參考王建紅等[5]和Wang等[11]的方法。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Excel 2013初步整理后，使用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，以P<0.05作為判斷差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，在60～90日齡期間PD-Lys和PD-Met組ADG顯著低于PD-Trp組(P<0.05)；90～120日齡PD-Met組羔羊ADG顯著低于PC、PD-Lys、PD-Thr和PD-Trp組(P<0.05)；在60～120日齡試驗(yàn)全期PD-Met組羔羊ADG最低，顯著低于PC、PD-Lys、PD-Thr和PD-Trp組(P<0.05)，PD-Lys組顯著低于PC和PD-Trp組(P<0.05)。對(duì)于羔羊ADG氨基酸重要性的順序?yàn)椋篗et>Lys>Thr>Trp。60～90日齡、90～120日齡和60～120日齡各組采食量差異不顯著(P>0.05)。60～90日齡各組的F/G差異不顯著(P>0.05)；90～120日齡PD-Met組羔羊F/G顯著高于PC、PD-Thr、PD-Trp組(P<0.05)；60～120日齡PD-Met組F/G顯著高于其他各組(P<0.05)。對(duì)于F/G的氨基酸重要性順序?yàn)椋篗et>Lys>Thr>Trp。

表3 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊屠宰性能的影響

由表4可知，120日齡時(shí)，各組的DP、背膘厚、GR值及血液重差異不顯著(P>0.05)。PD-Met組宰前活重、空體重、胴體重、眼肌面積、頭重、蹄重及皮毛重均顯著低于PC、PD-Thr和PD-Trp組(P<0.05)，但PD-Met組與PD-Lys組差異不顯著(P>0.05)，PC組與PD-Thr、PD-Trp組差異不顯著(P>0.05)。DP的氨基酸重要性順序趨勢(shì)為：Trp>Thr>Lys>Met。

表4 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊屠宰性能的影響

2.3 開(kāi)食料氨基酸扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊內(nèi)臟器官指數(shù)的影響

由表5可知，120日齡PD-Lys、PD-Met、PD-Thr及PD-Trp組心臟和肝臟重量均顯著低于PC組(P<0.05)，PD-Met、PD-Thr及PD-Trp組肝臟重量占宰前活重比例顯著低于PC組(P<0.05)。PD-Lys、PD-Met組的腎臟重量顯著低于PC組(P<0.05)。試驗(yàn)組與PC組脾臟和肺臟重量、脾臟和肺臟重量占宰前活重比例、腎臟重量占宰前活重比例無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表5 開(kāi)食料氨基酸扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊內(nèi)臟器官指數(shù)的影響

2.4 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊胃腸道發(fā)育的影響

由表6可知，120日齡PD-Lys和PD-Trp組皺胃重量占復(fù)胃總重比例顯著低于PC、PD-Met和PD-Thr組(P<0.05)，PC、PD-Lys、PD-Met、PD-Thr和PD-Trp組瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃和小腸重量差異不顯著(P>0.05)，瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃重量占復(fù)胃總重比例和占宰前活重比例差異均不顯著(P>0.05)，小腸重量占占宰前活重比例差異均不顯著(P>0.05)。

表6 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊胃腸道發(fā)育的影響

Table 6 Effects of amino acids partial deduction on gastrointestinal tract development ofHuweaned lambs

項(xiàng)目Items組別GroupsPCPD-LysPD-MetPD-ThrPD-TrpSEMP值P-value瘤胃Rumen重量Weight/g478.37487.8478.95446.63477.0010.420.7925占復(fù)胃總重比例PercentageofTCSW/%8.387.708.277.117.100.190.0707占宰前活重比例PercentageofLWBS/%1.812.122.031.731.910.050.1526網(wǎng)胃Reticulum重量Weight/g65.1269.1274.3272.1373.651.950.5838占復(fù)胃總重比例PercentageofTCSW/%1.141.081.291.151.090.030.2170占宰前活重比例PercentageofLWBS/%0.250.300.310.280.290.010.1417瓣胃Omasum重量Weight/g56.2558.9256.1054.1055.531.280.8479占復(fù)胃總重比例PercentageofTCSW/%0.990.930.970.860.820.020.1023占宰前活重比例PercentageofLWBS/%0.210.260.240.210.220.010.1458皺胃Abomasum重量Weight/g98.2591.5297.0894.4891.952.400.8871占復(fù)胃總重比例PercentageofTCSW/%1.71a1.44b1.68a1.50a1.37b0.040.0117占宰前活重比例PercentageofLWBS/%0.370.400.410.370.370.010.5926小腸Smallintestine重量Weight/g360.18349.90321.27334.20332.808.010.5969占宰前活重比例PercentageofLWBS/%1.361.521.351.291.330.030.2869大腸Largeintestine重量Weight/g522.73a449.60b439.93b434.67b408.85b9.650.0005占宰前活重比例PercentageofLWBS/%1.98a1.95a1.86ab1.68bc1.63c0.040.0020

2.5 不同階段羔羊獲得最佳ADG、F/G和DP的氨基酸順序和比例

不同階段羔羊獲得的最佳ADG和F/G時(shí)Lys、Met、Thr、Trp順序和比例計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表7。以最佳ADG作為評(píng)定指標(biāo)時(shí)，60～90日齡PD-Lys、PD-Met、PD-Thr和PD-Trp組的斜率(S)分別為0.230、0.490、0.128和0.220，90～120日齡分別為0.498、0.958、0.098和0.745。這2階段Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶44∶44∶8和100∶42∶38∶12。以最佳大F/G作為評(píng)定指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡PD-Lys、PD-Met、PD-Thr、PD-Trp組的斜率分別為-0.185、-0.584、-0.120、-0.177和-0.510、-1.263、-0.125、-0.764，這2階段羔羊達(dá)到最佳F/G時(shí)Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶54∶45∶7和100∶47∶39∶12。

表7 不同階段羔羊獲得最佳平均日增重、飼料轉(zhuǎn)化率的氨基酸順序和比例

S：斜率，數(shù)值代表限制性氨基酸采食量對(duì)ADG、F/G和DP的影響。P：試驗(yàn)組維持與PC組同樣的ADG、F/G和DP所需的氨基酸含量，與PC組的比例。C：試驗(yàn)組維持與PC組同樣的ADG、F/G和DP所需的氨基酸含量[mg/(kg BW0.75·d)]。R：所有氨基酸相對(duì)于Lys的比例。下表同。

S: slope, the value indicated the effects of limited amino acid intake on ADG, F/G and DP. P: amino acid content in experimental groups required to maintain the same ADG, F/G and DP as PC group, calculated as the proportion of PC group. C: amino acid content [mg/(kg BW0.75·d)] required to maintain the same ADG, F/G and DP as PC group. R: all amino acid proportions of lysine. The same as below.

不同階段羔羊獲得的最佳DP時(shí)Lys、Met、Thr、Trp順序和比例計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表8。以最佳DP作為評(píng)定指標(biāo)時(shí)，60～120日齡PD-Lys、PD-Met、PD-Thr、PD-Trp組斜率分別為-0.087、-0.100、-0.017和-0.106，Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例為100∶34∶38∶8。

表8 不同階段羔羊獲得最佳屠宰率的氨基酸順序和比例

3 討 論

3.1 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊生長(zhǎng)性能的影響

氨基酸是構(gòu)成體蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)，通過(guò)添加氨基酸平衡的開(kāi)食料有助于體蛋白質(zhì)的增加，特別是在斷奶羔羊低蛋白質(zhì)飼糧中添加平衡的必需氨基酸對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能具有顯著的影響。王建紅等[19]的研究結(jié)果表明，2～4周齡Lys扣除對(duì)犢牛ADG具有較大影響，Lys扣除組犢牛的ADG分別比對(duì)照組及Met和Thr扣除組低了65.25%、5.41%和28.19%。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在斷奶羔羊60～90日齡和90～120日齡開(kāi)食料Met扣除顯著影響羔羊ADG，60～120日齡PC-Met分別比PC、PD-Lys、PD-Thr和PD-Trp組的ADG顯著降低了29.54%、14.74%、25.36%和27.07%，這與王建紅等[19]的結(jié)果不一致，可能說(shuō)明在羔羊上Met缺乏會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)減緩、影響發(fā)育，雖然Lys也具有促進(jìn)動(dòng)物發(fā)育作用，但在此階段羔羊上可能不是第一必需的氨基酸。El-Tahawy等[20]在飼喂?jié)饪s混合飼料中加入3.30 g/kg Met，與對(duì)照組(沒(méi)添加Met)相比，對(duì)照組ADG顯著降低了7.80%，明顯影響其生長(zhǎng)性能，這與本試驗(yàn)結(jié)果相同。研究表明，動(dòng)物在不同生長(zhǎng)階段對(duì)氨基酸的缺乏程度不同，我們將動(dòng)物缺乏最嚴(yán)重的稱為第一限制性氨基酸。王建紅等[5]發(fā)現(xiàn)犢牛Lys為第一限制性氨基酸，第二、第三限制性氨基酸分別為Met和Thr。本試驗(yàn)以ADG為指標(biāo)時(shí)，羔羊第一限制性氨基酸為Met，Lys、Thr和Trp分別為第二、第三和第四限制性氨基酸。這與王建紅等[5]研究結(jié)果不一致，說(shuō)明不同種動(dòng)物氨基酸的限制性也不相同。

F/G是衡量動(dòng)物蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率的重要工具，是衡量生產(chǎn)效率的重要指標(biāo)。在保證羔羊生長(zhǎng)的情況下，提高F/G，可相應(yīng)降低糞便的排放，從而對(duì)環(huán)境保護(hù)也具有重要的作用。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，Met扣除對(duì)F/G影響最大，其次為L(zhǎng)ys、Thr和Trp。同樣El-Tahawy等[20]和Nolte等[21]在羔羊上的研究結(jié)果顯示，Met是生長(zhǎng)羔羊的第一限制性氨基酸，與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。但Nolte等[22]認(rèn)為L(zhǎng)ys不是羔羊限制性氨基酸，這可能與其試驗(yàn)方法和瘤胃灌注氨基酸不平衡有關(guān)。本試驗(yàn)在前期60～90日齡時(shí)F/G差異不顯著，隨著日齡的增長(zhǎng)，F(xiàn)/G有了顯著變化。這表明在試驗(yàn)的前期可能是開(kāi)食料適應(yīng)階段，且胃腸道的變化可能使其生長(zhǎng)發(fā)育變化比較慢。王建紅等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在0～2月齡Lys始終是犢牛的第一限制性氨基酸。本試驗(yàn)結(jié)果與王建紅等[5]不一致，羔羊PD-Met組F/G最低，分別比PC、PD-Lys、PD-Thr、PD-Trp低25.05%、17.37%、22.67%和24.68%。因而，添加羔羊第一限制性氨基酸可充分發(fā)揮開(kāi)食料在胃內(nèi)蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的全面吸收，減輕機(jī)體負(fù)擔(dān)，提高其生長(zhǎng)速度，達(dá)到提高飼料的利用效率的目的。

3.2 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊屠宰性能的影響

屠宰性能測(cè)定便于檢驗(yàn)羔羊不同階段的生長(zhǎng)發(fā)育狀況，深入研究羔羊生長(zhǎng)性能，對(duì)改善羔羊肉品質(zhì)具有重要意義。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)氨基酸扣除組除了DP、背膘厚、GR值和血液重差異不顯著外，其余的屠宰性能指標(biāo)都低于PC組。Storm等[14]研究發(fā)現(xiàn)2月齡羔羊灌注Lys、Met、Thr和Trp為9.0%、4.1%、5.6%和2.0%時(shí)，充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)則可以較快地達(dá)到屠宰體重要求。同樣，F(xiàn)erreira等[23]對(duì)30～45 kg美利奴羊必需氨基酸組成研究發(fā)現(xiàn)，隨著動(dòng)物的生長(zhǎng)，血液重不會(huì)發(fā)生顯著變化，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。本試驗(yàn)部分扣除Lys和Met對(duì)血液重?zé)o顯著影響，但對(duì)胴體重、頭重、蹄重和皮毛重有顯著影響。這可能因?yàn)镸et為羊毛角質(zhì)蛋白合成的第一限制性氨基酸，在綿羊飼糧中添加Met對(duì)羊毛生長(zhǎng)具有很好的促進(jìn)作用，進(jìn)而影響羔羊發(fā)育狀況[24]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，Trp是羔羊獲得最佳DP的第一限制性氨基酸，這與本試驗(yàn)獲得最佳ADG和F/G所發(fā)現(xiàn)的氨基酸順序也不相同，前人也沒(méi)對(duì)這方面進(jìn)行研究，這可能是因?yàn)闆](méi)有利用氮平衡試驗(yàn)進(jìn)行深入探討，導(dǎo)致氨基酸限制性的研究不夠準(zhǔn)確。因此，對(duì)于斷代乳粉后降低湖羊羔羊飼糧蛋白質(zhì)同時(shí)，添加過(guò)瘤胃保護(hù)氨基酸并使之添加量與利用量比例達(dá)到平衡，不僅對(duì)胴體重和皮毛生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，還能加快湖羊達(dá)到屠宰體重的時(shí)間。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，對(duì)斷奶羔羊屠宰性能等還要通過(guò)結(jié)合氮平衡試驗(yàn)進(jìn)行深入的研究和探討。

3.3 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊器官指數(shù)的影響

羔羊器官的發(fā)育直接影響湖羊后期的生長(zhǎng)和免疫狀況，測(cè)定器官指數(shù)對(duì)羔羊發(fā)育狀況具有重要的意義。Ferreira等[23]通過(guò)屠宰后發(fā)現(xiàn)隨著動(dòng)物的生長(zhǎng)，肺臟、腎臟和脾臟的重量沒(méi)有發(fā)生顯著變化，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似，說(shuō)明部分扣除氨基酸不會(huì)對(duì)組織器官產(chǎn)生較大影響。Bouyeh[25]同樣發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于NRC(1994)的基礎(chǔ)上添加1.10% Lys和0.50% Met會(huì)使21～42日齡肉仔雞心臟和肝臟重量高于不添加組，且高水平的Lys和Met能夠減少飼糧飼喂量，降低雞脂肪含量，使經(jīng)濟(jì)效益得到顯著增加。張乃鋒等[26]經(jīng)試驗(yàn)分析，Lys、Met和Thr部分扣除對(duì)犢牛免疫器官重量和免疫器官指數(shù)影響均不顯著。但各試驗(yàn)組免疫器官重量均低于PC組，且發(fā)現(xiàn)Thr部分扣除對(duì)犢牛免疫功能存在影響。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，PC組心臟、肝臟和腎臟重量顯著高于氨基酸扣除組，各氨基酸扣除組脾臟重量雖然差異不顯著，但PD-Thr組免疫器官指數(shù)有下降的趨勢(shì)，可能是Thr的扣除量還不足以對(duì)免疫器官產(chǎn)生顯著影響。除了PD-Thr組免疫器官指數(shù)較低以外，其他各試驗(yàn)組的免疫器官指數(shù)則與PC組相近。說(shuō)明Thr在一定水平上可以增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和病原感染抵御能力[27]，在開(kāi)食料中添加適宜的Thr可保障動(dòng)物健康生長(zhǎng)。

3.4 開(kāi)食料氨基酸部分扣除對(duì)斷奶湖羊羔羊胃腸道發(fā)育的影響

羔羊復(fù)胃的發(fā)育直接影響羔羊后期的消化吸收能力，瘤胃和皺胃的發(fā)育尤為重要，其發(fā)育狀況直接影響湖羊羔羊的消化吸收和生長(zhǎng)性能[1]。隨著羔羊生長(zhǎng)，8周齡時(shí)瘤胃生長(zhǎng)可達(dá)到成年大小。Lv等[28]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼糧蛋白質(zhì)水平為15.01%，Lys/Met為3.1時(shí)，復(fù)胃和瘤胃的增重效果最好，并能有效促進(jìn)胃腸道的生長(zhǎng)發(fā)育。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，PD-Trp和PD-Lys組皺胃重量占復(fù)胃總重顯比例著低于其他各組，但PC組復(fù)胃和瘤胃重量都有高于其他組的趨勢(shì)，小腸重量變化規(guī)律為PC組>PD-Lys組>PD-Met組>PD-Thr組>PD-Trp組。這與李輝[29]研究提高代乳粉Lys含量能提高胃腸道發(fā)育的結(jié)果相一致，可能說(shuō)明Lys含量對(duì)瘤胃等的發(fā)育具有影響。小腸是斷奶羔羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要器官，其正常發(fā)育是保證藏羔羊?qū)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行良好消化吸收的關(guān)鍵。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，各組小腸重量差異不顯著，但PC組小腸增長(zhǎng)效果依次比PD-Lys、PD-Met、PD-Thr和PD-Trp組增加2.85%、10.80%、7.21%和7.60%。本試驗(yàn)中，降低飼糧蛋白質(zhì)添加氨基酸有利于機(jī)體消化器官的發(fā)育，有利于羔羊發(fā)揮生長(zhǎng)潛能。

3.5 不同階段羔羊獲得最佳ADG、F/G和DP的氨基酸順序和比例

研究氨基酸適宜比例源于經(jīng)典的“木桶理論”，要使得動(dòng)物獲得最優(yōu)的生長(zhǎng)發(fā)育條件，必須使每種EAA量達(dá)到動(dòng)物需要，也就是達(dá)到最大生產(chǎn)性能的最適氨基酸量。Goodband等[30]提出20 kg左右仔豬理想氨基酸模式為L(zhǎng)ys∶Met∶Thr∶Trp=100∶(27～28)∶62∶18。同時(shí)，Lv等[28]研究發(fā)現(xiàn)藏羔羊早期斷奶飼糧Lys/Met為3.1時(shí)可獲得最佳ADG，且復(fù)胃的發(fā)育效果最好。Ferreira等[23]通過(guò)屠體氨基酸研究得出，生長(zhǎng)南非美利奴羊屠體Lys、Met和Thr適宜模式為100∶55∶72。從本試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，利用扣除法研究羔羊在60～90日齡和90～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜平均比例分別為100∶44∶44∶8和100∶42∶38∶12時(shí)獲得最佳ADG，且羔羊的Met和Trp添加量小于仔豬添加量，Lys/Met為2.27～2.38時(shí)獲得最佳ADG。在獲得最佳F/G方面尚無(wú)報(bào)道，本試驗(yàn)60～90日齡和90～120日齡羔羊Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶54∶45∶7和100∶47∶39∶12。羔羊獲得最佳DP所需Lys、Met、Thr和Trp比例為100∶34∶38∶8。雖然沒(méi)有研究者對(duì)DP的氨基酸模型進(jìn)行研究，但從此結(jié)果可以看出當(dāng)獲得最佳DP時(shí)，Met的添加量小于獲得最佳ADG和F/G的添加量。這說(shuō)明反芻動(dòng)物消化系統(tǒng)雖然在初期是與單胃動(dòng)物相似，但在后期生長(zhǎng)階段對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收還是存在較大的不同，這可能與不同品種、試驗(yàn)環(huán)境和飼糧相關(guān)。利用屠體氨基酸組成來(lái)配制飼糧不夠準(zhǔn)確，會(huì)使得氨基酸攝入過(guò)多造成不必要的浪費(fèi)。以上都進(jìn)一步說(shuō)明不同種動(dòng)物遺傳特性不同，氨基酸的比例將存在較大差異。

4 結(jié) 論

① 在斷奶羔羊飼糧中，以最佳ADG、F/G為評(píng)價(jià)指標(biāo)，羔羊氨基酸的限制性順序?yàn)镸et>Lys>Thr>Trp。以DP為評(píng)價(jià)指標(biāo)，限制性順序?yàn)門rp>Thr>Lys>Met。

② 氨基酸的平衡供給直接影響羔羊的生長(zhǎng)發(fā)育、屠宰性能；氨基酸扣除可以影響內(nèi)臟器官的發(fā)育。

③ 不同評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)斷奶羔羊60～120日齡4種氨基酸的適宜比例不同，以最佳ADG為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶44∶44∶8和100∶42∶38∶12；以最佳F/G為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～90日齡和90～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例分別為100∶54∶45∶7和100∶47∶39∶12；以最佳DP為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，60～120日齡Lys、Met、Thr和Trp的適宜比例為100∶34∶38∶8。

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*Corresponding authors: TAO Dayong, professor, E-mail: tdydky@126.com; DIAO Qiyu, professor, E-mail: diaoqiyu@caas.cn

(責(zé)任編輯 王智航)

Exploration of Requirement Models and Limiting Sequence of Four Kinds of Essential Amino Acids of Weaned Lambs

LI Xueling1,2CHAI Jianmin2ZHANG Naifeng2ZHANG Rong2WANG Jie2WANG Shiqin2TAO Dayong1*DIAO Qiyu2*

(1.CollegeofAnimalScience,TarimUniversity,Alar843300,China; 2.FeedResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,KeyLaboratoryofFeedBiotechnologyofMinistryofAgriculture,Beijing100081,China)

This study was conducted to investigate the requirement models and sequence of 4 kinds of essential amino acids lysine (Lys), methionine (Met), threonine (Thr) and tryptophan (Trp) in weaned lambs by partial deduction method. One hundred maleHulambs weaned at 50 days of age were randomly divided into five groups, and each group had four replicates with five lambs per replicate. Control group was fed a starter with balanced amino acid (PC group), while 4 experimental groups were fed the starter deducting Lys (PD-Lys group), Met (PD-Met group), Thr (PD-Thr group) and Trp (PD-Trp group) on the basis of PC group, respectively. The pretrial lasted for 10 days, and the formal trial lasted for 60 days. All the lambs were weighed at 60, 90 and 120 days of age, and six lambs selected from each group were slaughtered at 120 days of age. The results showed as follows: 1) at 60 to 120 days of age and 90 to 120 days of age, average daily gain (ADG) in PD-Met group was significantly lower than that in the other groups (P<0.05), and feed to gain ratio (F/G) in PD-Met group was significantly higher than that in the other groups (P<0.05); at 120 days of age, PD-Met group had significantly lower live weight before slaughter, empty body weight, carcass weight, ribeye area, head weight, feet weight, and skin and wool weight compared with PC, PD-Thr and PD-Trp groups (P<0.05), however, no significant differences of dressing percentage (DP), GR value and blood weight among five groups at 120 days of age were found (P>0.05). 2) Using optimal ADG and F/G as the evaluation indexes, limited amino acid sequence was Met, Lys, Thr and Trp of lambs at 60 to 90 days of age and 90 to 120 days of age; using optimal DP as the evaluation index， limited amino acid sequence was Trp, Thr, Lys and Met of lambs at 120 days of age. 3) Using optimal ADG as the evaluation index, the proper proportion of Lys, Met, Thr and Trp was 100∶44∶44∶8 at 60 to 90 days of age and 100∶42∶38∶12 at 90 to 120 days of age; using optimal F/G as the evaluation index, the proper proportion of Lys, Met, Thr and Trp was 100∶54∶45∶7 at 60 to 90 days of age and 100∶47∶39∶12 at 90 to 120 days of age; using optimal DP as the evaluation index， the proper proportion of Lys, Met, Thr and Trp was 100∶34∶38∶8 at 60 to 120 days of age. In conclusion, dietary lack of essential amino acids, such as Lys, Met, Thr and Trp, can decrease growth performance, slaughter performance and organ indexes of lambs, the lack of Met is most negative and the next is Lys, however the effects of Thr and Trp were weak; the limited sequences and proper proportions of Lys, Met, Thr and Trp are different when evaluated using different indexes (ADG, F/G and DP) at different growth stages.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(1)：106-117]

Husheep; weaned lamb; starter; amino acid model; lysine; methionine; tryptophan

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.01.013

2016-07-12

農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201303143)；國(guó)家肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS-39)

李雪玲(1991—)，女，新疆阿拉爾人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail： nkylixueling@163.com

*通信作者：陶大勇，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: tdydky@126.com；刁其玉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail: diaoqiyu@caas.cn

S826

A

1006-267X(2017)01-0106-12