周 瑩 張敏紅* 馮京海 張少帥 彭騫騫,2 李 萌,3 李 香,2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100193；2.河北工程大學(xué)農(nóng)學(xué)院，邯鄲056021；3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，哈爾濱150030)

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相對(duì)濕度對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞體熱調(diào)節(jié)及下丘腦熱休克蛋白70含量的影響

周 瑩1張敏紅1*馮京海1張少帥1彭騫騫1,2李 萌1,3李 香1,2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100193；2.河北工程大學(xué)農(nóng)學(xué)院，邯鄲056021；3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，哈爾濱150030)

本試驗(yàn)旨在研究相對(duì)濕度(RH)對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞體熱調(diào)節(jié)及下丘腦熱休克蛋白70(HSP70)含量的影響。選取21日齡愛(ài)拔益加(AA)肉雞180只轉(zhuǎn)入環(huán)境控制艙，隨機(jī)分成3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞(公母各占1/2)。預(yù)試期7 d，溫度20 ℃，RH 60%。正試期15 d，28日齡開(kāi)始試驗(yàn)，將3組的RH分別調(diào)整到35%、60%和85%，溫度仍為20 ℃；3 d為1周期，共分5個(gè)周期，從第2周期開(kāi)始每周期的第1天將3組的溫度均在10:00開(kāi)始升高3 ℃并在0.5 h內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定；5個(gè)周期的溫度分別為20、23、26、29和32 ℃。結(jié)果表明：1)85% RH組肉雞的呼吸頻率極顯著高于60% RH和35% RH組(P<0.01)，60% RH組的呼吸頻率極顯著高于35% RH組(P<0.01)；85% RH組肉雞的體核溫度顯著高于60% RH組(P<0.05)；35% RH組肉雞小腿和腳蹼的皮膚溫度極顯著高于60% RH和85% RH組(P<0.01)，35% RH和60% RH組肉雞雞冠、耳垂和眼瞼的皮膚溫度極顯著高于85% RH組(P<0.01)。2)85% RH組肉雞的血清堿性磷酸酶(AKP)活性顯著高于35% RH和60% RH組(P<0.05)；35% RH和85% RH組肉雞的血清肌酸激酶(CK)活性顯著高于60% RH組(P<0.05)。RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和乳酸脫氫酶(LDH)活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。3)85% RH組肉雞的血清三碘甲腺原氨酸(T3)含量顯著高于35% RH組(P<0.05)；35% RH和85% RH組肉雞的血清甲狀腺素(T4)含量顯著高于60% RH組(P<0.05)；60% RH和85% RH組肉雞的血清皮質(zhì)酮(CORT)含量極顯著高于35% RH組(P<0.01)。4)35% RH組肉雞下丘腦HSP70含量顯著低于60% RH和85% RH組(P<0.05)。綜上所述，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，高濕(85%)和低濕(35%)調(diào)節(jié)28～42日齡肉雞體熱平衡的途徑和程度不同。

遞增性偏熱環(huán)境；肉仔雞；相對(duì)濕度；體熱調(diào)節(jié)；熱休克蛋白70

目前，關(guān)于溫度對(duì)肉雞影響的研究多集中在32 ℃以上的熱應(yīng)激環(huán)境[1-6]。由于濕簾縱向通風(fēng)技術(shù)的成熟應(yīng)用，高溫?zé)釕?yīng)激的情況實(shí)屬少見(jiàn)，而實(shí)際生產(chǎn)中低于32 ℃的偏熱環(huán)境卻經(jīng)常出現(xiàn)，這同樣對(duì)肉雞的各項(xiàng)性能有不利的影響，如生長(zhǎng)性能[7]、解偶聯(lián)蛋白的表達(dá)和糖脂代謝[7-8]、腸道微生物菌群的多樣性[9]、腸道免疫功能[10]以及不同休息行為時(shí)間占比[11]。

相對(duì)濕度(RH)作為溫?zé)岘h(huán)境的主要因素之一，對(duì)肉雞的影響建立在溫度的基礎(chǔ)上[12]；不同的溫度模式，RH會(huì)對(duì)肉雞產(chǎn)生不同的影響。有關(guān)溫度和RH對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能影響的研究表明，在適溫和低溫范圍內(nèi)，RH對(duì)肉雞的日增重?zé)o顯著影響[13-14]；在恒定溫度32或29 ℃，與低濕(40%)相比，高濕(80%～90%)顯著降低了肉雞的生長(zhǎng)率[15-17]；當(dāng)溫度突然增加到35、28或30 ℃，RH為60%～65%時(shí)，肉雞的生長(zhǎng)率和采食量最高[18-19]。

在應(yīng)對(duì)不利的環(huán)境條件時(shí)，家禽會(huì)進(jìn)行一系列的調(diào)節(jié)來(lái)維持體熱的動(dòng)態(tài)平衡[20]，其中涉及體溫、呼吸和內(nèi)分泌等一系列與體熱調(diào)節(jié)相關(guān)的生理生化反應(yīng)[21-25]。熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)是機(jī)體受到應(yīng)激原刺激后產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，是生物熱休克反應(yīng)的主要標(biāo)志；在其家族中，熱休克蛋白70(HSP70)是最重要的一種蛋白質(zhì)，其廣泛的生物學(xué)功能使其成為當(dāng)今生命科學(xué)研究中的熱點(diǎn)之一[26-27]。

在我國(guó)大部分地區(qū)，春夏交接時(shí)都會(huì)出現(xiàn)溫度逐日遞增的現(xiàn)象，而RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞體熱調(diào)節(jié)及下丘腦HSP70含量的影響還未見(jiàn)報(bào)道。鑒此，本試驗(yàn)就RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞體熱調(diào)節(jié)及下丘腦HSP70含量的影響進(jìn)行研究，以期為家禽養(yǎng)殖中適宜RH的確定提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取同一批出雛、飼養(yǎng)管理一致、體質(zhì)健壯的21日齡愛(ài)拔益加(AA)肉雞180只轉(zhuǎn)入人工環(huán)境控制艙，隨機(jī)分成3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞(公母各占1/2)。預(yù)試期7 d，溫度20 ℃，RH 60%。正試期15 d，28日齡開(kāi)始試驗(yàn)，將3組的RH分別調(diào)整到35%、60%和85%，溫度仍為20 ℃；3 d為1周期，共分5個(gè)周期，從第2周期開(kāi)始每周期的第1天將3組的溫度均在10:00開(kāi)始升高3 ℃并在0.5 h內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定。5個(gè)周期的溫度分別為20、23、26、29和32 ℃。

1.2 試驗(yàn)飼糧

采用玉米-豆粕型飼糧，試驗(yàn)所用飼糧為參照NRC(1994)營(yíng)養(yǎng)需要配制的粉狀配合飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞均采用平養(yǎng)，所選用的籠具為本實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的單層平養(yǎng)籠具[28]，每8只試驗(yàn)雞飼養(yǎng)面積0.64 m2。試驗(yàn)期間自由采食飲水，24 h光照，常規(guī)免疫。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 Premix provided the following per kg of the diet：VA 10 000 IU，VD33 400 IU，VE 16 IU，VK32.0 mg，VB12.0 mg，VB26.4 mg，VB62.0 mg，VB120.012 mg，泛酸鈣 pantothenic acid calcium 10 mg，煙酸 nicotinic acid 26 mg，葉酸 folic acid 1 mg，生物素biotin 0.1 mg，膽堿 choline 500 mg，Zn(ZnSO4·7H2O) 40 mg，F(xiàn)e(FeSO4·7H2O) 80 mg，Cu(CuSO4·5H2O) 8 mg，Mn(MnSO4·H2O) 80 mg，I(KI) 0.35 mg，Se(Na2SeO3) 0.15 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平均為計(jì)算值。 Nutrient levels were all calculated values.

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1 生理指標(biāo)

正試期第15天，即溫度升高到32 ℃后48 h時(shí)，分別測(cè)定各組肉雞的皮膚溫度、體核溫度和呼吸頻率。皮膚溫度的測(cè)定方法為：使用紅外熱成像儀FLIR E4(熱分辨率0.07 ℃、精度±2%)對(duì)肉雞頭部側(cè)面、小腿(跖)側(cè)面進(jìn)行垂直拍攝，拍攝距離為0.5 m，每隔3 min拍攝1次，連續(xù)拍攝1 h，每只雞拍攝20張紅外照片。通過(guò)FLIR Tools軟件分析，計(jì)量每張照片中雞冠、小腿、腳蹼、眼瞼和耳垂的皮膚溫度，取同1只雞20個(gè)數(shù)據(jù)的平均值作為真實(shí)皮膚溫度。體核溫度的測(cè)定方法為：每組隨機(jī)選取6只肉雞(每個(gè)重復(fù)選取1只，公母各占1/2)，將數(shù)字體溫計(jì)(Model.JM 6200，分辨率0.01 ℃)5 cm長(zhǎng)的探頭幾乎全部插入直腸，待數(shù)值穩(wěn)定后記錄體核溫度值，之后每隔5 s記錄1次體核溫度，共記錄4次，取其平均值。呼吸頻率的測(cè)定方法為：每組隨機(jī)選取6只肉雞(每個(gè)重復(fù)選取1只，公母各占1/2)，每隔10 min測(cè)定1次，每次測(cè)定1 min內(nèi)肉雞的呼吸次數(shù)，共采集6次，呼吸頻率為6次呼吸次數(shù)的平均值。

1.4.2 血清酶活性和內(nèi)分泌指標(biāo)

正試期第15天，即溫度升高到32 ℃后48 h時(shí)，每組隨機(jī)選取6只肉雞(每個(gè)重復(fù)選取1只，公母各占1/2)翅靜脈采血，3 000 r/min離心10 min，取血清于-80 ℃冷凍保存。

血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)和肌酸激酶(creatine kinase，CK)活性以及三碘甲腺原氨酸(3,5,3’-triiodothyronine，T3)、甲狀腺素(又稱四碘甲腺原氨酸，3,5,3’,5’-tetraiodothyronine，T4)和皮質(zhì)酮(cortisol，CORT)含量采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法測(cè)定。所用試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，測(cè)定方法按說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4.3 下丘腦HSP70的含量

正試期第15天，即溫度升高到32 ℃后48 h時(shí)，每組隨機(jī)選取6只肉雞(每個(gè)重復(fù)選取1只，公母各占1/2)，采血后迅速將雞處死，3 min內(nèi)剝離取出下丘腦放入速凍管于-80 ℃保存。采用ELISA雙抗體夾心法測(cè)定下丘腦HSP70的含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件中的單因子方差分析(one-way ANOVA)程序進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞生理指標(biāo)的影響

由表2可知，RH對(duì)為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下肉雞的呼吸頻率和皮膚溫度均有極顯著影響(P<0.01)。其中，85% RH組肉雞的呼吸頻率極顯著高于60% RH和35% RH組(P<0.01)，60% RH組的呼吸頻率極顯著高于35% RH組(P<0.01)；85% RH組肉雞的體核溫度顯著高于60% RH組(P<0.05)，而35% RH組的體核溫度與60% RH和85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)；35% RH組肉雞小腿和腳蹼的皮膚溫度極顯著高于60% RH和85% RH組(P<0.01)；35% RH和60% RH組肉雞雞冠、耳垂和眼瞼的皮膚溫度極顯著高于85% RH組(P<0.01)。

表2 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞生理指標(biāo)的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同小寫字母或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).The same as below.

2.2 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞血清酶活性的影響

由表3可知，RH對(duì)為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下肉雞的血清AKP和CK活性有顯著影響(P<0.05)。其中，85% RH組肉雞的血清AKP活性顯著高于35% RH和60% RH組(P<0.05)，35% RH組的血清AKP活性與60% RH組

無(wú)顯著差異(P>0.05)；35% RH和85% RH組肉雞的血清CK活性顯著高于60% RH組(P<0.05)，35% RH組的血清CK活性與85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)。RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞的血清AST和LDH活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞血清酶活性的影響

2.3 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞內(nèi)分泌指標(biāo)的影響

由表4可知，RH對(duì)為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下肉雞的血清T3、T4和CORT含量有顯著影響(P<0.05)。其中，85% RH組肉雞的血清T3含量顯著高于35% RH組(P<0.05)，60% RH組的血清T3含量與35% RH和85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)；35% RH和85% RH組肉雞的血清T4含量顯著高于60% RH組(P<0.05)，35% RH組的血清T4含量與85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)；60% RH和85% RH組肉雞的血清CORT含量極顯著高于35% RH組(P<0.01)，60% RH組的血清CORT含量與85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表4 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞內(nèi)分泌指標(biāo)的影響

2.4 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞下丘腦HSP70含量的影響

由圖1可知，RH對(duì)為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下肉雞下丘腦HSP70含量有顯著影響(P<0.05)。其中，35% RH組肉雞下丘腦HSP70含量顯著低于60% RH和85% RH組(P<0.05)，60% RH組的下丘腦HSP70含量與85% RH組無(wú)顯著差異(P>0.05)。

3 討 論

3.1 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞生理指標(biāo)的影響

體核溫度和呼吸頻率是反映肉雞熱平衡調(diào)節(jié)的重要生理指標(biāo)[29]。Yahav[19]用數(shù)字溫度計(jì)測(cè)量肉雞的肛溫和皮膚溫度(翅下無(wú)羽區(qū))，研究表明當(dāng)環(huán)境溫度持續(xù)為28 ℃時(shí)，環(huán)境RH(40%～45%、50%～55%、60%～65%和70%～75%)對(duì)4～8周齡肉雞的體溫?zé)o顯著影響。林海[30]用紅外線點(diǎn)溫儀測(cè)量肉雞皮膚溫度(胸部、背部、趾部、腿部和翅部)和用熱敏電阻測(cè)頭測(cè)量肛溫，研究發(fā)現(xiàn)在環(huán)境溫度低于25 ℃時(shí)，RH對(duì)肉雞的體溫?zé)o顯著影響。紅外熱成像技術(shù)具有精度高、非接觸、非侵入和對(duì)研究對(duì)象無(wú)干擾等諸多優(yōu)點(diǎn)[23,31]，保證了數(shù)據(jù)的客觀可靠性，現(xiàn)已經(jīng)逐步應(yīng)用于禽類皮膚溫度的測(cè)定[32-36]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，低濕(35%)時(shí)肉雞的皮膚溫度較高，而呼吸頻率較低；高濕(85%)時(shí)肉雞的皮膚溫度較低，而呼吸頻率較高。在高濕情況下，環(huán)境中的水分含量較高，肉雞皮膚表面的含水量較高，阻礙了蒸發(fā)散熱，肉雞只能通過(guò)加快呼吸來(lái)蒸發(fā)散熱，但過(guò)度呼吸使肉雞處于高負(fù)荷狀態(tài)，不能維持體熱調(diào)節(jié)，故肉雞的體核溫度升高；而低濕情況下，腿部裸露的皮膚溫度較高，而呼吸頻率較低，這可能是因?yàn)榈蜐裼欣谌怆u裸露部位的皮膚蒸發(fā)，而水分含量過(guò)低，不利于呼吸道蒸發(fā)散熱。這表明，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，低濕時(shí)肉雞可能主要通過(guò)皮膚蒸發(fā)散熱來(lái)維持體熱平衡，而高濕時(shí)肉雞可能主要通過(guò)呼吸蒸發(fā)散熱來(lái)維持體熱平衡，但是過(guò)度呼吸使肉雞處于高負(fù)荷狀態(tài)，會(huì)升高肉雞的體核溫度。

數(shù)據(jù)柱標(biāo)注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。

Values columns with different small letters mean significant difference (P<0.05)， while with the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

圖1 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞下丘腦HSP70含量的影響

Fig.1 Effects of relative humidity at gradually increasing temperatures on the content of HSP70 in hypothalamus of broiler chickens

3.2 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞血清酶活性的影響

LDH是糖酵解過(guò)程中的關(guān)鍵酶，催化丙酮酸產(chǎn)生乳酸，血清中LDH的活性升高與無(wú)氧酵解加強(qiáng)密切相關(guān)。正常情況下，AST存在于心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞的線粒體內(nèi)，血清中AST活性極低；應(yīng)激時(shí)細(xì)胞線粒體受損，AST逸出細(xì)胞進(jìn)入血液，使得血清中AST活性升高。血清中AST活性升高表明存在肝細(xì)胞損傷。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，RH對(duì)LDH和AST無(wú)顯著影響，這表明在本試驗(yàn)條件下，RH應(yīng)激不會(huì)引起肉雞無(wú)氧糖酵解加強(qiáng)和肝細(xì)胞損傷。

AKP是一組酶類，在堿性條件下有較高的活性，是體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪分解代謝中重要的酶，動(dòng)物受到應(yīng)激時(shí)會(huì)動(dòng)員體貯(肌肉)中的糖原、蛋白質(zhì)和脂肪來(lái)分解供能，因此應(yīng)激時(shí)AKP活性升高。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，RH對(duì)AKP活性有顯著影響，高濕(85%)組肉雞的血清AKP活性顯著高于低濕(35%)和中濕(60%)組。這表明高濕對(duì)肉雞的應(yīng)激較大，需要?jiǎng)訂T體內(nèi)的糖原、蛋白質(zhì)和脂肪來(lái)分解供能，AKP活性較高。CK的主要成分是肌肉同工酶(MM-CK)，是動(dòng)物受到應(yīng)激的重要特征指標(biāo)之一。Sandercock等[37]報(bào)道認(rèn)為，溫度為32 ℃、RH為75%的環(huán)境中應(yīng)激2 h，肉雞血漿中CK活性顯著升高，表明血液中CK活性升高為肉雞受到應(yīng)激的表現(xiàn)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，與中濕(60%)相比，高濕(85%)和低濕(35%)都會(huì)顯著升高肉雞血清中CK活性。這可能是由于低濕和高濕的應(yīng)激使肉雞采食量下降，營(yíng)養(yǎng)攝入不夠，肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，導(dǎo)致肌細(xì)胞膜功能和通透性受到破壞，肌肉中的CK進(jìn)入血液，從而使血清中CK活性升高。

3.3 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞內(nèi)分泌指標(biāo)的影響

甲狀腺是調(diào)節(jié)機(jī)體代謝的重要內(nèi)分泌腺，其分泌的甲狀腺激素T3和T4是參與機(jī)體糖、脂肪等能量代謝和調(diào)節(jié)產(chǎn)熱的重要激素，是動(dòng)物常見(jiàn)的應(yīng)激指標(biāo)。Yahav等[18]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)溫度為28、30或者35 ℃，RH為40%～75%時(shí)，肉雞的血清T3含量與采食量呈正相關(guān)。另有報(bào)道認(rèn)為，在高溫高濕條件下，由于散熱難度加大，要保持雞體熱平衡，必須通過(guò)內(nèi)分泌途徑減少產(chǎn)熱，血漿T3含量的下降正是這種調(diào)節(jié)的體現(xiàn)，也是雞耐熱力增強(qiáng)的標(biāo)志[38]。而本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，高濕(85%)組肉雞的血清T3含量顯著高于低濕(35%)組；高濕(85%)和低濕(35%)組肉雞的血清T4含量顯著高于中濕(60%)組。這一方面可能與試驗(yàn)條件有關(guān)，本試驗(yàn)條件是為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境，屬于慢性長(zhǎng)期遞增偏熱應(yīng)激；另一方面，研究表明熱應(yīng)激過(guò)程中血液的T3和T4含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而出現(xiàn)波動(dòng)，呈現(xiàn)并不一致的趨勢(shì)[39-40]。CORT作為家禽主要的糖皮質(zhì)激素，參與動(dòng)員體內(nèi)儲(chǔ)存的能量，為動(dòng)物抵抗不良應(yīng)激做準(zhǔn)備。一般來(lái)說(shuō)，應(yīng)激狀態(tài)會(huì)刺激下丘腦-垂體-腎上腺軸分泌糖皮質(zhì)激素，升高CORT含量來(lái)抵抗應(yīng)激。而本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，低濕(35%)組肉雞的血清CORT含量極顯著低于中濕(60%)和高濕(85%)組。這可能是因?yàn)?，在低濕情況下主要通過(guò)皮膚蒸發(fā)散熱，為物理散熱方式，不需要消耗體內(nèi)能量，產(chǎn)生的應(yīng)激較少，故可能測(cè)得的血清CORT含量較低，而這一具體分子機(jī)制尚不清楚，需要進(jìn)一步深入研究。

3.4 RH對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下肉雞下丘腦HSP70含量的影響

HSP是由Ritossa等[41]1962年在暴露于高溫中的果蠅唾液腺染色體中發(fā)現(xiàn)的，是細(xì)胞在應(yīng)激原特別是高溫誘導(dǎo)下所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，其中HSP70家族最為重要和保守[42]。應(yīng)激時(shí)，機(jī)體進(jìn)入氧化應(yīng)激狀態(tài)，機(jī)體活性氧(ROS)含量增加，產(chǎn)生和釋放HSP來(lái)保護(hù)細(xì)胞免受ROS的影響[43]。Xie等[44]研究發(fā)現(xiàn)，急性和慢性熱應(yīng)激下蛋雞心臟、肝臟和肌肉組織中HSP的表達(dá)水平均上調(diào)。許生友[45]在熱應(yīng)激狀態(tài)下肝臟基因表達(dá)譜研究中也發(fā)現(xiàn)雞HSP基因表達(dá)水平上調(diào)。諸多研究結(jié)果表明，HSP的生成與熱耐受力呈正相關(guān)關(guān)系。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，35% RH顯著降低肉雞下丘腦中HSP70含量。這可能是因?yàn)椋蜐袂闆r下肉雞主要通過(guò)皮膚蒸發(fā)散熱，為物理散熱方式，不需要消耗體內(nèi)能量，體內(nèi)產(chǎn)生的ROS含量較低，故HSP70含量可能較低；另外，細(xì)胞內(nèi)游離鈣等因素也與HSP70的轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān)[46]，而這一方面的具體分子機(jī)制尚不清楚，需要進(jìn)一步深入研究。

4 結(jié) 論

在為期15 d的20～32 ℃遞增性偏熱環(huán)境下，與中濕(60%)相比，高濕(85%)顯著升高肉雞的呼吸頻率、體核溫度、血清AKP和CK活性以及T4含量，顯著降低肉雞的皮膚溫度(除腳蹼溫度外)；低濕(35%)顯著升高肉雞的小腿和腳蹼溫度、血清CK活性以及T4含量，顯著降低肉雞的呼吸頻率、血清CORT和下丘腦HSP70含量?？梢?jiàn)，高濕和低濕對(duì)遞增性偏熱環(huán)境下28～42日齡肉雞體熱調(diào)節(jié)的途徑和程度不同。

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*Corresponding author, professor, E-mail: zmh66@126.com

(責(zé)任編輯 李慧英)

Effects of Relative Humidity at Gradually Increasing Temperatures on Body Thermoregulation and Content of Heat Shock Protein 70 in Hypothalamus of Broiler Chickens

ZHOU Ying1ZHANG Minhong1*FENG Jinghai1ZHANG Shaoshuai1PENG Qianqian1,2LI Meng1,3LI Xiang1.2

(1.StateKeyLaboratoryofAnimalNutrition,InstituteofAnimalSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193,China; 2.CollegeofAgriculture,HebeiUniversityofEngineering,Handan056021,China; 3.CollegeofAnimalScienceandTechnology,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China)

The present study aimed to investigate the effects of relative humidity (RH) at gradually increasing temperatures on body thermoregulation and the content of heat shock protein 70 (HSP70) in hypothalamus of broiler chickens. One hundred and eighty 21-day-old Arbor Acres (AA) broiler chickens were allotted into environment controlled chambers and randomly assigned to three groups with six replicates per group and ten broilers per replicate (males and females in half). The pre-test period lasted for 7 days and birds were kept at 20 ℃ and 60% RH. The test period lasted for 15 days, when broiler chickens were 28 days of age, RH of three groups was regulated to 35%, 60% and 85%, respectively, and the temperature was 20 ℃ yet. The experiment consisted of 5 consecutive trials with 3 days per consecutive trial, the temperature of three groups was gradually increased by 3 ℃ finishing within half an hour at 10:00 of the first day every consecutive trial and started from the second consecutive trial, and the temperatures of the 5 consecutive trials were 20, 23, 26, 29 and 32 ℃, respectively. The results showed as follows: 1) the respiratory frequency of broiler chickens in the 85% RH group was significantly higher than that in the 60% RH and 35% RH groups (P<0.01), and the respiratory frequency in the 60% RH group was significantly higher than that in the 35% RH group (P<0.01). The core body temperature of broiler chickens in the 85% RH group was significantly higher than that in the 60% RH group (P<0.05). The skin temperatures of leg and flipper of broiler chickens in the 35% RH group were significantly higher than those in the 60% RH and 85% RH groups (P<0.01), and the skin temperatures of comb, earlobe and eyelid in the 35% RH and 60% RH groups were significantly higher than those in the 85% RH group (P<0.01). 2) The activity of alkaline phosphatase (AKP) in serum of broiler chickens in the 85% RH group was significantly higher than that in the 60% RH and 35% RH groups (P<0.05), and the activity of creatine kinase (CK) in serum of broiler chickens in the 85% RH and 35% RH groups was significantly higher than that in the 60% RH group (P<0.05). There were no significant effects of RH at gradually increasing temperatures on the activities aspartate transaminase (AST) and lactate dehydrogenase (LDH) in serum of broiler chickens (P>0.05). 3) The content of 3,5,3’-triiodothyronine (T3) in serum of broiler chickens in the 85% RH group was significantly higher than that in the 35% RH group (P<0.05), the content of 3,5,3’,5’-tetraiodothyronine (T4) in serum in the 35% RH and 85% RH groups was significantly higher than that in the 60% RH group (P<0.05), and the content of cortisol (CORT) in serum in the 60% RH and 85% RH groups was significantly higher than that in the 35% RH group (P<0.01). 4) The content of HSP70 in hypothalamus of broiler chickens in the 35% RH group was significantly lower than that in the 60% RH and 85% RH groups (P<0.05). In conclusion, at the 15-day 20 to 32 ℃ gradually increasing temperatures, high humidity (85%) and low humidity (35%) regulate the body heat balance of broiler chickens at 28 to 42 days of age in different ways and extent.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(1)：60-68]

gradually increasing temperatures; broiler chickens; relative humidity; body thermoregulation; heat shock protein 70

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.01.008

2016-07-04

國(guó)家“十二五”科技支撐課題(2012BAD39B02)；國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃課題“肉禽舒適環(huán)境的適宜參數(shù)及限值研究”(2016YFD0500509)；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS07)

周 瑩(1991—)，女，河南南陽(yáng)人，碩士研究生，研究方向?yàn)榧仪轄I(yíng)養(yǎng)與環(huán)境。E-mail: 1361841518@qq.com

*通信作者：張敏紅，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail: zmh66@126.com

S831

A

1006-267X(2017)01-0060-09