王宏琴

(獲嘉縣人民醫(yī)院藥事管理科，河南 新鄉(xiāng) 453800)

姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901的影響

王宏琴

(獲嘉縣人民醫(yī)院藥事管理科，河南 新鄉(xiāng) 453800)

目的 探討姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901的影響。方法 人胃癌細(xì)胞SGC-7901接受不同濃度姜黃素處理，然后采用MTT法測(cè)定人胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖，Boyden chamber侵襲小室測(cè)定細(xì)胞侵襲能力，劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移能力。結(jié)果 姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖，且作用與藥物濃度有關(guān)(P<0.05)，濃度越大，抑制能力越強(qiáng)；姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲、遷移，且作用與藥物濃度有關(guān)(P<0.05)，濃度越大，抑制能力越強(qiáng)。結(jié)論 姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖、侵襲、遷移，且這種作用具有劑量依賴性。

人胃癌細(xì)胞SGC-7901；姜黃素；細(xì)胞增殖；侵襲；遷移

姜黃素提取自姜黃科植物的根莖，屬于植物多酚，已被證實(shí)具有抗氧化、抗凝、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗感染、抗腫瘤等作用[1-2]。已被證實(shí)在體外能夠誘導(dǎo)鼻咽癌、結(jié)腸癌、胃腺癌、肝癌等細(xì)胞株的凋亡[3-5]。姜黃素的抗腫瘤主要通過(guò)阻滯細(xì)胞周期和促進(jìn)細(xì)胞凋亡等途徑。本研究中作者采用不同濃度的姜黃素作用于人胃癌細(xì)胞SGC7901，以期探討其在胃癌中應(yīng)用的可能性。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞、試劑及儀器 人胃癌細(xì)胞SGC7901購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命研究所；HyQ改良型RPMI-1640培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；胎牛血清購(gòu)自德國(guó)PAA公司；姜黃素購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；MTT購(gòu)自美國(guó) Sigma 公司。HERA Cell型細(xì)胞培養(yǎng)箱為德國(guó)Heraeus公司產(chǎn)品。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)基：含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清、100 u·mL-1青霉素、100 mg·mL-1鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)基。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中經(jīng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%胰酶消化傳代培養(yǎng)，以便用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.3 姜黃素處理細(xì)胞情況 取經(jīng)傳代培養(yǎng)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液，按0.4×104·mL-1的細(xì)胞濃度接種于96孔板，每孔總液體200 μL。并于體積分?jǐn)?shù)5% CO2培養(yǎng)箱孵育24 h后，進(jìn)行干預(yù)，各組干預(yù)因素：空白對(duì)照組不含細(xì)胞的RPMI-1640培養(yǎng)基200 μL；陰性對(duì)照組單細(xì)胞懸液200 μL；不同濃度的姜黃素組姜黃素濃度分別為10、20、40、80 μmol·L-1，各組均設(shè)6個(gè)平行孔，質(zhì)量分?jǐn)?shù)5% CO2培養(yǎng)箱孵育48 h后，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.4 MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖情況 加入20 μL MTT(5 mg·mL-1)、37 ℃、體積分?jǐn)?shù)5% CO2培養(yǎng)箱孵育4 h后，棄上清，每孔加入200 μL DMSO，放入酶標(biāo)儀，經(jīng)振蕩溶解，于570 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(A)值。用IC50計(jì)算軟件計(jì)算IC50，并計(jì)算生長(zhǎng)抑制率：生長(zhǎng)抑制率(%)=(1-實(shí)驗(yàn)組平均A值/空白對(duì)照組平均A值)×100%。

1.5 Boyden chamber侵襲小室測(cè)定細(xì)胞侵襲能力 將Matrigel膠鋪于培養(yǎng)小室濾膜上，每室120 μL。下室加入200 μL趨化因子，上室加入所收集的經(jīng)過(guò)不同濃度姜黃素處理的細(xì)胞濃度5×105·mL-1的單細(xì)胞懸液400 μL，37 ℃、體積分?jǐn)?shù)5% CO2條件下孵育24 h。取出小室，甲醛固定膜下室內(nèi)細(xì)胞，常規(guī)HE染色，400倍條件下計(jì)數(shù)5個(gè)視野穿膜細(xì)胞數(shù)，取其平均數(shù)。

1.6 劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移能力 將經(jīng)過(guò)處理的細(xì)胞按每孔5×105·mL-1細(xì)胞濃度接種于6孔板。用記號(hào)筆在6孔板背后大約每隔0.5～1 cm劃一條橫穿過(guò)孔的直線。每孔5條線。第2天用槍頭比著直尺劃痕，直尺盡量垂直于背后的橫線。PBS沖洗，加入無(wú)血清培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)24 h，拍照并計(jì)算相對(duì)遷移距離：相對(duì)遷移距離=l-(即時(shí)劃痕的寬度/原始劃痕的寬度)。

2 結(jié)果

2.1 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖的影響 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖的抑制與其濃度有關(guān)(P<0.05)，藥物濃度越大，抑制能力越強(qiáng)，IC50為30.6 μmol·L-1。見(jiàn)表1。

表1 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖的影響

組別濃度/(μmol·L-1)增殖率/%空白對(duì)照——陰性對(duì)照—100．0姜黃素1組1078．6±5．2姜黃素2組2060．3±3．7姜黃素3組4042．3±4．5姜黃素4組8022．6±1．9

注：陰性對(duì)照組及4個(gè)濃度的姜黃素組兩兩比較，P均<0.05

2.2 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲、遷移能力的影響 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲、遷移的抑制與其濃度有關(guān)(P<0.05)，藥物濃度越大，抑制能力越強(qiáng)。

表2 姜黃素對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲、遷移能力的影響

組別濃度/(μL·mL-1)boydenchamber結(jié)果劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果空白對(duì)照———陰性對(duì)照—90．2±7．60．38±0．10姜黃素1組1080．7±6．30．30±0．08姜黃素2組2075．6±6．90．24±0．06姜黃素3組4068．7±4．40．21±0．05姜黃素4組8060．3±2．70．18±0．05

注：陰性對(duì)照組及4個(gè)濃度的姜黃素組兩兩比較，P均<0.05

3 討論

姜黃素是一種提取自姜黃科植物的根莖的植物多酚，已被證實(shí)在多種實(shí)體瘤細(xì)胞株的體外實(shí)驗(yàn)中有抗腫瘤作用[3-5]。還有研究[6]證實(shí)姜黃素能夠逆轉(zhuǎn)抗腫瘤藥物的耐藥性。姜黃素抗腫瘤相關(guān)研究證實(shí)，其具有抗腫瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)凋亡、阻斷新生血管形成等作用，為進(jìn)一步探討姜黃素對(duì)胃癌的具體作用，本研究將不同濃度的姜黃素作用于人胃癌細(xì)胞SGC7901，并通過(guò)對(duì)其細(xì)胞增殖、細(xì)胞侵襲及細(xì)胞遷移情況的觀察評(píng)估姜黃素的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果顯示，姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖，且作用與藥物濃度有關(guān)(P<0.05)，濃度越大，抑制能力越強(qiáng)；姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲、遷移，且作用與藥物濃度有關(guān)(P<0.05)，濃度越大，抑制能力越強(qiáng)。這與李玉芳等[7]的研究相近?？傊?，姜黃素能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖、侵襲、遷移，且這種作用具有劑量依賴性。

[1] 狄建彬，顧振綸，趙笑東，等.姜黃素的抗氧化和抗炎作用研究進(jìn)展[J].中草藥,2010,41(5):附18-附21.

[2] 李倩，徐春燕，彭鵬，等.姜黃素對(duì)TNF-α誘導(dǎo)人結(jié)直腸癌細(xì)胞上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、遷移的影響[J].山東醫(yī)藥,2016,56(34):1-3.

[3] 陳馨，肖樂(lè)，吳小雪，等.姜黃素對(duì)胃癌細(xì)胞抑癌基因甲基化的抑制作用[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2015,44(6):674-677.

[4] 常明向，吳梅梅，李瀚旻,等.姜黃素聯(lián)合索拉非尼增強(qiáng)抑制肝癌細(xì)胞HepG-2的作用及其機(jī)制[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2016,26(5):277-280.

[5] 楊堃，鄧武生，李爭(zhēng)爭(zhēng)，等.姜黃素抑制人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞增殖的機(jī)制[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2016,28(10):43-45.

[6] 彭莎，鄭家法.姜黃素逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的機(jī)制及研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2016,32(20):3163-3166.

[7] 李玉芳，仲寧，沈文香，等.姜黃素誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡[J].江蘇醫(yī)藥,2010,36(11):1278-1280.

Effect of Curcumin on Gastric Cancer Cell SGC-7901

Wang Hongqin

(DepartmentofPharmacyAdministration,HuojiaCountyPeople’sHospital,Xinxiang453800,China)

Objective To investigate the effect of curcumin on gastric cancer cell SGC-7901.Methods SGC-7901 cells were treated with different concentration of curcumin,MTT method was used to detect the cell proliferation,boyden chamber was used to detect the invasion ability,and wound healing assay was used to detect the migration ability.Results The inhibition effect on cell proliferation of SGC-7901 cells was related with the concentration of curcumin (P<0.05).The inhibition effect on cell invasion and migration of SGC-7901 cells was related with the concentration of curcumin (P<0.05).Conclusion Curcumin can inhibit the cell proliferation,invasion and migration of SGC7901 cells,and the effect is dose-dependent.

gastric cancer cell SGC7901; curcumin; cell proliferation; invasion; migration

10.3969/j.issn.1673-5412.2016.06.004

R735.2；R730.23

A

1673-5412(2016)06-0471-03

2015-12-29)