李日嬋，楊潔（南方醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣州 510515）

miRNA在開發(fā)抗流感病毒藥物中的研究進(jìn)展Δ

李日嬋＊，楊潔#（南方醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣州 510515）

目的：為開發(fā)新型抗流感病毒藥物提供參考。方法：以“流感”“抗病毒”“microRNA（miRNA）”“Influenza”“Anti-virus”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2001年1月－2016年3月在PubMed、中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中有關(guān)miRNA在抗流感病毒方面的文獻(xiàn)，對(duì)內(nèi)源性miRNA和外源性植物miRNA的抗流感病毒作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述。結(jié)果與結(jié)論：共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)265篇，其中有效文獻(xiàn)37篇?？沽鞲胁《镜膬?nèi)源性miRNA和外源性植物miRNA對(duì)病毒基因的表達(dá)具有調(diào)控作用。這些miRNA能靶向流感病毒的基因，如PB1、PB2、NP、M1、NS1等，抑制相應(yīng)蛋白的表達(dá)，影響病毒的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮抗病毒作用。miRNA在抗流感病毒中發(fā)揮著重要作用，但存在很多未知領(lǐng)域，更多的抗病毒miRNA有待發(fā)現(xiàn)。為進(jìn)一步了解miRNA在病毒與宿主間所充當(dāng)?shù)慕巧约伴_發(fā)新型抗流感病毒藥物，還需深入研究miRNA的作用機(jī)制、調(diào)控途徑以及生物學(xué)功能。

miRNA；流感病毒；抗病毒藥物

MicroRNA（miRNA）是一類長(zhǎng)度約為19～25個(gè)核苷酸的非編碼RNA小分子，參與后轉(zhuǎn)錄水平基因表達(dá)的調(diào)控，介導(dǎo)靶基因的降解或抑制靶基因的表達(dá)，是大多數(shù)真核生物生命進(jìn)程中必不可少的調(diào)節(jié)因子[1-2]。甲型流感病毒是人類呼吸道疾病的主要病原體，容易造成季節(jié)性流感和周期性大流行[3]。迄今為止，抗流感病毒的策略主要是研究開發(fā)新的疫苗和抗流感病毒藥物。miRNA在抗流感病毒中發(fā)揮著重要作用，除了宿主中的miRNA能靶向病毒的基因、調(diào)控病毒的復(fù)制之外[4]，植物miRNA還可作為外源性miRNA，被人體通過日常飲食攝取，在體內(nèi)積累[5]；且這些植物miRNA與宿主細(xì)胞基因表達(dá)有關(guān)，參與疾病的治療[6-9]。筆者以“流感”“抗病毒”“microRNA（miRNA）”“Influenza”“Anti-virus”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2001年1月－2016年3月在PubMed、中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普等數(shù)據(jù)庫(kù)中有關(guān)miRNA在抗流感病毒方面的文獻(xiàn)。結(jié)果，共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)265篇，其中有效文獻(xiàn)37篇?，F(xiàn)就內(nèi)源性miRNA和外源性植物miRNA的抗流感病毒作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述，以期為開發(fā)新型抗流感病毒藥物提供參考。

1 流感病毒及抗流感病毒藥物

流感病毒屬于正黏病毒科的單股負(fù)鏈RNA病毒，分為甲、乙、丙3種亞型。甲型流感病毒容易發(fā)生抗原變異、適應(yīng)和重組，會(huì)形成新的高致命性毒株而引起世界性大流行。而流感暴發(fā)波及范圍廣，發(fā)病率和病死率高，如1918－1919年的流感大流行造成了全球5 000萬(wàn)到1億人口的死亡[10]；2009年新型的甲型流感病毒席卷了全球214個(gè)國(guó)家，引起的死亡病例至少有1.8萬(wàn)[11]。2012年的兩項(xiàng)研究表明，H5N1禽流感病毒的血凝素蛋白僅需發(fā)生4個(gè)位點(diǎn)的突變（N1581D/N2241K/Q2261L/ T3181I），就能在雪貂間進(jìn)行空氣傳播[12-13]。雪貂是常用的預(yù)測(cè)流感人與人傳播的動(dòng)物模型，若這種具有高致死率的H5N1禽流感發(fā)生突變后導(dǎo)致人傳人，后果將不堪設(shè)想。

目前流感的防治形勢(shì)不容樂觀。甲型流感病毒的抗原容易發(fā)生變異，從而難以在流感暴發(fā)期間研發(fā)并生產(chǎn)及時(shí)、有效的疫苗。因此，抗流感病毒藥物仍然是應(yīng)對(duì)流感大暴發(fā)、治療流感的重要手段[14-16]。目前，美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的抗流感病毒藥物主要有兩類，一類是M2離子通道抑制劑，包括金剛烷胺和金剛烷乙胺；另一類為神經(jīng)氨酸酶抑制劑，主要有扎那米韋和奧司他韋，此外還有一個(gè)靜脈注射劑型的神經(jīng)氨酸酶抑制劑帕拉米韋于2010年1月和2013年4月分別在日本和中國(guó)獲批。奧司他韋仍然是目前抗流感病毒的首選藥。然而，甲型流感病毒的不斷演變和極速產(chǎn)生的耐藥性，尤其是對(duì)金剛烷胺和奧司他韋的耐藥，限制了這兩類藥物的使用[17-19]。因此，研究新型的抗流感病毒藥物和尋找有效的預(yù)防措施控制禽流感或人類大流行的甲型流感成為了當(dāng)今社會(huì)亟待解決的問題。

2 抗流感病毒的內(nèi)源性miRNA

人體內(nèi)存在著大量的miRNA，這些miRNA能在機(jī)體被病毒入侵時(shí)調(diào)節(jié)病毒生命周期和宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制轉(zhuǎn)錄過程，在病毒和宿主相互作用中發(fā)揮著重要作用。miRNA介導(dǎo)的RNA干擾（RNAi）提供了一種新型的抗病毒策略，已應(yīng)用到非典病毒[20]、人類免疫缺陷病毒[21]、丙型肝炎病毒[22]等多種病毒的臨床試驗(yàn)。隨著RNAi研究的深入，已逐漸發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)存在著抗流感病毒的miRNA。

流感病毒感染引起機(jī)體免疫損傷的同時(shí)還可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，這一系列免疫應(yīng)答的形成包括多種分子及細(xì)胞的參與，涉及多種信號(hào)通路。Li Y等[23]通過比較感染致命性重組1918流感病毒與感染非致命性季節(jié)流感病毒A/Texas/36/91的兩組小鼠肺細(xì)胞中miRNA的表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)130多種miRNA的表達(dá)模式有差異，其中許多miRNA參與調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、中性粒細(xì)胞活化及其介導(dǎo)的殺傷作用和核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）信號(hào)通路，首次提出了miRNA可能調(diào)控流感病毒感染小鼠的基因表達(dá)。

2.1 靶向流感病毒RNA聚合酶的miRNA

流感病毒RNA聚合酶是由PB1、PB2、PA 3個(gè)亞基組成，因其是病毒轉(zhuǎn)錄與翻譯的關(guān)鍵性酶，且具有高保守性及低突變率，已成為抗流感病毒藥物研究和開發(fā)的新靶標(biāo)。其中，PB1亞基是RNA聚合酶的核心部分，可與病毒RNA（vRNA）的啟動(dòng)子和互補(bǔ)RNA（cRNA）結(jié)合，幫助RNA聚合酶完成病毒基因組的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制[24]。PB1-PB2復(fù)合物連接區(qū)的渦輪狀結(jié)構(gòu)對(duì)RNA聚合酶的活性較為重要，相應(yīng)堿基的突變會(huì)大大降低酶的轉(zhuǎn)錄活性[25]。因靶向PB1既能影響病毒的轉(zhuǎn)錄又能影響病毒的復(fù)制，故PB1亞基已成為研究抗流感病毒藥物的新方向。

目前，已有研究發(fā)現(xiàn)宿主細(xì)胞內(nèi)的miRNA能靶向流感病毒的PB1基因，抑制流感病毒的復(fù)制。如miR323、miR491和miR654均包含相同的核苷酸序列，能結(jié)合到甲型流感病毒H1N1（A/WSN/33）PB1基因的保守區(qū)域[26]。當(dāng)miRNA與靶基因完全匹配時(shí)，能降解mRNA；不完全匹配時(shí)，則可抑制mRNA的翻譯。然而，這3個(gè)miRNA與PB1基因之間是不完全配對(duì)關(guān)系，不是抑制PB1基因mRNA翻譯，而是通過降解mRNA來(lái)下調(diào)PB1基因的表達(dá)，從而抑制病毒在細(xì)胞中的復(fù)制。因?yàn)椴粩嘤行卵葑兞鞲胁《镜某霈F(xiàn)，因此急需尋找新型的可針對(duì)多種亞型流感病毒的抗病毒藥物。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)了另一種miRNA——miR3145，其能抑制H1N1、H5N1、H3N2這3種亞型的甲型流感病毒的復(fù)制，其作用機(jī)制是引起病毒PB1基因的沉默、降低基因的表達(dá)，從而影響病毒的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制[27]。但是，該研究亦發(fā)現(xiàn)，miR3145在非感染或者感染病毒的人肺癌細(xì)胞A549中表達(dá)量均較低，說(shuō)明miR3145在正常的呼吸道上皮細(xì)胞或者感染病毒的細(xì)胞中不能持續(xù)表達(dá)。因此，不管是miR3145還是其他的miRNA，了解其在機(jī)體中產(chǎn)生的機(jī)制，將有助于研究和開發(fā)新型抗流感病毒藥物。

2.2 靶向流感病毒M1基因的miRNA

流感病毒的基質(zhì)蛋白（M）是由病毒基因組片段7編碼的，該片段可轉(zhuǎn)錄出2個(gè)mRNA，分別翻譯成M1蛋白和M2蛋白。M1蛋白是流感病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白之一，具有多種功能，除了維持病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)和完整性之外，還參與病毒轉(zhuǎn)錄復(fù)制的多個(gè)環(huán)節(jié)，協(xié)助被感染細(xì)胞的細(xì)胞漿與細(xì)胞核之間的物質(zhì)運(yùn)輸，以及在子代病毒的裝配出芽過程中發(fā)揮重要作用[28]。因此，阻斷M1蛋白基因的表達(dá)可有效地抑制病毒的復(fù)制。

Ma YJ等[29]在感染流感病毒的A549細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了miR-let-7的表達(dá)明顯上調(diào)。生物信息學(xué)研究以及熒光報(bào)告發(fā)現(xiàn)，miR-let-7的靶基因是病毒M1基因，可直接靶向M1基因cRNA的3′非翻譯區(qū)（3′-UTR），抑制M1基因vRNA的合成，下調(diào)M1蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)，進(jìn)而發(fā)揮抗病毒作用。此外，Nadiminty N等[30-31]研究發(fā)現(xiàn)，抑制前列腺癌細(xì)胞中miR-let-7的表達(dá)可增強(qiáng)雄激素敏感性癌細(xì)胞生長(zhǎng)的能力，即miR-let-7相當(dāng)于一個(gè)腫瘤抑制因子，可抑制前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此，miR-let-7在宿主細(xì)胞內(nèi)可能存在著多種生理作用，深入了解miR-let-7在宿主細(xì)胞中的作用，有助于充分挖掘其抗流感病毒的作用。

2.3 靶向流感病毒NP基因的miRNA

流感病毒的基因組為單股負(fù)鏈RNA，這些RNA與核蛋白（NP）、RNA聚合酶共同構(gòu)成了核糖核蛋白復(fù)合體（vRNP）。病毒感染細(xì)胞后，vRNP被釋放進(jìn)細(xì)胞質(zhì)中，隨后進(jìn)入細(xì)胞核，在核內(nèi)進(jìn)行復(fù)制與轉(zhuǎn)錄后，出核，與基質(zhì)蛋白一起組裝成子代病毒釋放到胞外。在這個(gè)過程中，NP蛋白是vRNP核運(yùn)輸?shù)臎Q定因素，因其高度保守已成為抗流感病毒藥物研究和開發(fā)的新靶點(diǎn)。

郭振東等[32]研究發(fā)現(xiàn)了靶向流感病毒NP基因的miRNA，即miR-769-3p。該研究通過構(gòu)建NP基因螢光素酶報(bào)告基因與miR-769-3p真核表達(dá)載體，采用雙螢光素酶報(bào)告基因與Western blot法檢測(cè)miR-769-3p對(duì)NP蛋白表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)miR-769-3p可靶向結(jié)合在NP基因mRNA上，抑制NP蛋白的表達(dá)，從而抑制病毒的復(fù)制。盡管尚未報(bào)道m(xù)iR-769-3p抑制甲型流感病毒的作用效果與機(jī)制，但是這為研究和開發(fā)抗流感病毒的miRNA藥物提供了依據(jù)以及潛在的藥物作用靶點(diǎn)。

Hu Y等[33]研究發(fā)現(xiàn)，miR33a是流感病毒復(fù)制的抑制因子，能靶向外殼蛋白Ⅰ（COPI）復(fù)合物亞基ARCN1基因的3′-UTR，降低ARCN1基因表達(dá)，抑制vRNP的活性，進(jìn)而影響病毒的復(fù)制。綜上所述，內(nèi)源性的miRNA具有直接或者間接的抗流感病毒作用。因此，從miRNA出發(fā)，研究和開發(fā)新型抗流感病毒藥物將會(huì)成為抗病毒的新策略。

3 抗流感病毒的外源性植物miRNA

當(dāng)流感病毒感染宿主細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生miRNA來(lái)抵抗病毒的侵染，這是內(nèi)源性miRNA發(fā)揮的抗病毒作用。Zhou Z等[34]從金銀花中提取出來(lái)的miR2911能直接靶向多種甲型流感病毒，能有效抑制病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染。

3.1 植物miRNA的吸收代謝途徑

Zhou Z等[34]在闡明miR2911具有抗流感病毒的作用時(shí)，亦研究了小鼠體內(nèi)miR2911的分布狀況。miR2911在金銀花煎劑中穩(wěn)定存在，小鼠連續(xù)飲用或者灌胃給予煎劑后，小鼠外周血和肺中miR2911的濃度顯著上升。由此提示，金銀花中的miR2911也許是通過消化道系統(tǒng)，重新包裝進(jìn)入腸道上皮細(xì)胞的微泡，最后進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)。而這種植物miRNA被哺乳動(dòng)物（包括人類）從食物中攝取，通過胃腸道進(jìn)入血液循環(huán)和器官，從而在動(dòng)物體內(nèi)積累的現(xiàn)象并不是首次被報(bào)道。

Zhang L等[5]研究發(fā)現(xiàn)，人的血清中積累了富含于大米中的miR168a，體內(nèi)外研究均顯示miR168a能結(jié)合表達(dá)低密度脂蛋白受體銜接蛋白1（LDLRAP1）的mRNA，抑制LDLRAP1在肝中的表達(dá)，減少低密度脂蛋白在血漿中的清除，而低密度脂蛋白過量能引起動(dòng)脈粥樣硬化。Wang K等[35]也在人血漿中發(fā)現(xiàn)了大量外源miRNA，這些miRNA大多數(shù)來(lái)源于膳食植物，包括玉米、大米、大豆、番茄和葡萄。這些都表明了植物miRNA能夠在動(dòng)物體內(nèi)積累。假如植物miRNA在發(fā)揮活性時(shí)能在動(dòng)物體內(nèi)積累，從植物食品轉(zhuǎn)移到動(dòng)物，并調(diào)控動(dòng)物基因的表達(dá)，即miRNA在植物界和動(dòng)物界之間可以實(shí)現(xiàn)“跨界基因調(diào)控”，是否可用此途徑來(lái)研制口服抗流感病毒新藥值得進(jìn)一步深入研究。

3.2 miR2911的作用機(jī)制

生物信息學(xué)的預(yù)測(cè)和熒光報(bào)告結(jié)果顯示，miR2911能靶向多種甲型流感病毒，包括H1N1、H5N1、H7N9，其靶點(diǎn)是PB2和NS1基因。體內(nèi)外研究均證實(shí)，miR2911能抑制甲型流感病毒H1N1、H5N1、H7N9的復(fù)制，能抑制H1N1 PB2和NS1蛋白的表達(dá)，降低病毒侵染引起的小鼠體質(zhì)量減少，從而降低感染小鼠的病死率。

從這一研究結(jié)果來(lái)看，體外引入的miRNA具有抗流感病毒的作用，那么感染病毒之后，機(jī)體產(chǎn)生的內(nèi)源性miRNA與外源性miRNA是如何達(dá)到平衡，共同抵抗流感病毒的侵染的呢？此外，既然在機(jī)體感染流感病毒時(shí)，內(nèi)源性的多個(gè)miRNA共同調(diào)節(jié)病毒基因的表達(dá)，那么從食物中攝取的miRNA是否也存在著多個(gè)外源性miRNA共同發(fā)揮抗病毒作用的情況呢？?jī)蓚€(gè)或者兩個(gè)以上的miRNA之間的作用是協(xié)同還是拮抗呢？這些miRNA在發(fā)揮作用時(shí)的攝取量是如何調(diào)節(jié)的呢？過多的這些miRNA是否會(huì)對(duì)機(jī)體造成損害？顯然，從miRNA出發(fā)研究新型的抗流感病毒藥物還需要解決許多問題。但是，隨著生物信息學(xué)的發(fā)展和測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，從傳統(tǒng)中藥發(fā)現(xiàn)的miRNA將會(huì)持續(xù)快速地增加，這使得開發(fā)出類似于miR2911這種能在動(dòng)物體內(nèi)穩(wěn)定存在且積累的新型抗流感病毒藥物成為了可能。

4 結(jié)語(yǔ)

流感病毒引起的流行性感冒是一種傳染性強(qiáng)、傳播速度快的疾病，極易發(fā)生大范圍流行。開發(fā)出新型的抗流感病毒藥物解決病毒變異耐藥的問題成為人們最為關(guān)心的事情之一。miRNA通過結(jié)合靶基因，導(dǎo)致靶基因的降解或阻斷靶基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而特異性地影響相應(yīng)基因的表達(dá)，從而在許多細(xì)胞生命歷程中發(fā)揮著重要作用，其中包括細(xì)胞增殖、凋亡、體內(nèi)平衡和腫瘤形成[36]。在宿主抵抗病毒感染過程中，細(xì)胞miRNA能調(diào)節(jié)細(xì)胞的免疫應(yīng)答，參與細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，還可直接介導(dǎo)病毒基因的表達(dá)[37]。植物miRNA只靶向病毒基因，而對(duì)人類的基因組無(wú)影響，并且一個(gè)miRNA能抑制多個(gè)基因的表達(dá)，這樣的特點(diǎn)使得植物miRNA可能成為副作用小、無(wú)耐藥性的抗流感病毒藥物，且比M2離子通道抑制劑和神經(jīng)氨酸酶抑制劑更有優(yōu)勢(shì)。然而，將miRNA開發(fā)成為抗病毒藥物還存在著很多問題。流感病毒的8個(gè)單股負(fù)鏈RNA片段共編碼10種蛋白，除了文章涉及的基因之外，靶向其他病毒基因的miRNA還有待發(fā)現(xiàn)。此外，內(nèi)源性miRNA和外源性植物miRNA的產(chǎn)生與代謝機(jī)制、多種生物學(xué)功能還有待研究，內(nèi)源性miRNA和外源性植物miRNA之間是否存在著協(xié)同抵抗病毒入侵的研究未見報(bào)道，植物miRNA的功能是否受到內(nèi)源性miRNA的影響也未得知。因此，miRNA的研究還存在著許多未知的領(lǐng)域，這需要深入研究miRNA的作用機(jī)制、調(diào)控途徑以及生物學(xué)功能，為進(jìn)一步了解miRNA在病毒與宿主相互作用間所充當(dāng)?shù)慕巧约伴_發(fā)新型抗流感病毒藥物提供參考。充分開發(fā)miRNA的使用價(jià)值將有望成為基因藥物和減毒活疫苗研發(fā)的重要突破口。

[1] Mallory AC，Vaucheret H.Functions of microRNAs and related small RNAs in plants[J].Nat Genet，2006，38（Suppl）：31-36.

[2] Perez JT，Pham AM，Lorini MH，et al.MicroRNA-mediated species-specific attenuation of influenza A virus[J].Nat Biotechnol，2009，27（6）：572-576.

[3] Taubenberger JK，Morens DM.The pathology of influenza virus infections[J].Annu Rev Pathol，2008，doi：10. 1146/annurev.pathmechdis.3.121806.154316.

[4] 劉鶴，宋麗萍，黃文林.miR26a和miR939調(diào)控H1N1型流感病毒在MDCK細(xì)胞中的復(fù)制[J].微生物學(xué)報(bào)，2010，50（10）：1399-1405.

[5] Zhang L，Hou D，Chen X，et al.Exogenous plant MIR168a specifically targets mammalian LDLRAP1：evidence of cross-kingdom regulation by microRNA[J].Cell Res，2012，22（1）：107-126.

[6] 張星星，李楊，周見至，等.3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中miRNAs基因的表達(dá)變化[J].中國(guó)藥房，2013，24（5）：401-404.

[7] Rameshwari R，Singhal D，Narang R，et al.In silico prediction of mirna in Curcuma longa and their role in human metabolomics[J].Int J Adv Biotechnol Res，2013，4（2）：253-259.

[8] Dubey A，Kalra SS，Trivedi N.Computational prediction of miRNA in Gmelina arborea and their role in human metabolomics[J].Amer J Biosci Bioeng，2013，1（5）：62-74.

[9] Ju S，Mu J，Dokland T，et al.Grape exosome-like nanoparticles induce intestinal stem cells and protect mice from DSS-induced colitis[J].Mol Ther，2013，21（7）：1345-1357.

[10] Morens DM，F(xiàn)auci AS.The 1918 influenza pandemic：insights for the 21st century[J].J Infect Dis，2007，195（7）：1018-1028.

[11] Cheng VC，To KK，Tse H，et al.Two years after pandemic influenza A/2009/H1N1：what have we learned?[J].Clin Microbiol Rev，2012，25（2）：223-263.

[12] Imai M，Watanabe T，Hatta M，et al.Experimental adaptation of an influenza H5 HA confers respiratory droplet transmission to a reassortant H5 HA/H1N1 virus in ferrets [J].Nature，2012，doi：10.1038/nature10831.

[13] Russell CA，F(xiàn)onville JM，Brown AE，et al.The potential for respiratory droplet transmissible A/H5N1 influenza virus to evolve in a mammalian host[J].Science，2012，doi：10.1126/science.1222526.

[14] De Clercq E.Antiviral agents active against influenza A viruses[J].Nat Rev Drug Discov，2006，5（12）：1015-1025.

[15] Hurt AC，Selleck P，Komadina N，et al.Susceptibility of highly pathogenic A（H5N1）avian influenza viruses to the neuraminidase inhibitors and adamantanes[J].Antiviral Res，2007，73（3）：228-231.

[16] Moscona A.Neuraminidase inhibitors for influenza[J].N Engl J Med，2005，353（13）：1363-1373.

[17] Bright RA，Medina MJ，Xu X，et al.Incidence of adamantane resistance among influenza A（H3N2）viruses isolated worldwide from 1994 to 2005：a cause for concern[J].Lancet，2005，doi：10.1016/s0140-6736（05）67338-2.

[18] de Jong MD，Thanh TT，Khanh TH，et al.Oseltamivir resistance during treatment of influenza A（H5N1）infection [J].N Engl J Med，2005，353（25）：2667-2672.

[19] Leang SK，Deng YM，Shaw R，et al.Influenza antiviral resistance in the Asia-Pacific region during 2011[J].Antiviral Res，2013，97（2）：206-210.

[20] Zhang Y，Li T，F(xiàn)u L，et al.Silencing SARS-CoV spike protein expression in cultured cells by RNA interference [J].FEBS Lett，2004，560（1/2/3）：141-146.

[21] Huang J，Wang F，Argyris E，et al.Cellular microRNAs contribute to HIV-1 latency in resting primary CD4+T lymphocytes[J].Nat Med，2007，13（10）：1241-1247.

[22] Sarasin-Filipowicz M，Krol J，Markiewicz I，et al.Decreased levels of microRNA miR-122 in individuals with hepatitis C responding poorly to interferon therapy[J].Nat Med，2009，15（1）：31-33.

[23] Li Y，Chan EY，Li J，et al.MicroRNA expression and virulence in pandemic influenza virus-infected mice[J].J Virol，2010，84（6）：3023-3032.

[24] Kerry PS，Willsher N，F(xiàn)odor E.Acluster of conserved basic amino acids near the C-terminus of the PB1 subunit of the influenza virus RNA polymerase is involved in the regulation of viral transcription[J].Virology，2008，373（1）：202-210.

[25] Poole EL，Medcalf L，Elton D，et al.Evidence that the C-terminal PB2-binding region of the influenza A virus PB1 protein is a discrete α-helical domain[J].Febs Lett，2007，581（27）：5300-5306.

[26] Song L，Liu H，Gao S，et al.Cellular microRNAs inhibit replication of the H1N1 influenza A virus in infected cells [J].J Virol，2010，84（17）：8849-8860.

[27] Khongnomnan K，Makkoch J，Poomipak W，et al.Human miR-3145 inhibits influenza A viruses replication by targeting and silencing viral PB1 gene[J].Exp Biol Med，2015，240（12）：1630-1639.

[28] Huang X，Liu T，Muller J，et al.Effect of influenza virus matrix protein and viral RNA on ribonucleoprotein formation and nuclear export[J].Virology，2001，287（2）：405-416.

[29] Ma YJ，Yang J，F(xiàn)an XL，et al.Cellular microRNA let-7c inhibits M1 protein expression of the H1N1 influenzaAvirus in infected human lung epithelial cells[J].J Cell Mol Med，2012，16（10）：2539-2546.

[30] Nadiminty N，Tummala R，Lou W，et al.MicroRNA let-7c is downregulated in prostate cancer and suppresses prostate cancer growth[J].PLoS One，2012，7（3）：e32832.

[31] Nadiminty N，Tummala R，Lou W，et al.MicroRNA let-7c suppresses androgen receptor expression and activity via regulation of Myc expression in prostate cancer cells [J].J Biol Chem，2012，287（2）：1527-1537.

[32] 郭振東，侯小強(qiáng)，何濤，等.miR-769-3p對(duì)甲型H1N1流感病毒核蛋白表達(dá)的調(diào)控[J].生物技術(shù)通訊，2013，24（2）：147-152.

[33] Hu Y，Jiang L，Lai W，et al.MicroRNA-33a disturbs influenza A virus replication by targeting ARCN1 and inhibiting viral ribonucleoprotein activity[J].J Gen Virol，2016，97（1）：27-38.

[34] Zhou Z，Li X，Liu J，et al.Honeysuckle-encoded atypical microRNA2911 directly targets influenza A viruses[J].Cell Res，2015，25（1）：39-49.

[35] Wang K，Li H，Yuan Y，et al.The complex exogenous RNA spectra in human plasma：an interface with human gut biota?[J].PLoS One，2012，7（12）：e51009.

[36] Scaria V，Hariharan M，Maiti S，et al.Host-virus interaction：a new role for microRNAs[J].Retrovirology，2006，doi：10.1186/1742-4690-3-68.

[37] Haneklaus M，Gerlic M，O'Neill LA，et al.miR-223：infection，inflammation and cancer[J].J Intern Med，2013，274（3）：215-226.

R966

A

1001-0408（2017）04-0554-04

2016-06-14

2016-09-09）

（編輯：余慶華）

廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（No.2014J2200033）

＊碩士研究生。研究方向：抗病毒藥物與分子病毒學(xué)。電話：020-61648590。E-mail：levine091@163.com

#通信作者：副教授，碩士生導(dǎo)師，博士。研究方向：抗病毒藥物與分子病毒學(xué)。電話：020-61648590。E-mail：yj528@smu.edu.cn

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.04.34