付強強，高振珅，劉林，井光芳，趙春霞，魯玲，王守箐，3（.臨沂大學(xué)藥學(xué)院，山東 臨沂 276005；2.廣東藥科大學(xué)藥科學(xué)院，廣州 5400；3.臨沂大學(xué)現(xiàn)代中藥研究所，山東 臨沂 276005）

銀杏酚酸的提取分離方法、檢測方法、藥理作用及制劑研究進展Δ

付強強1，2＊，高振珅1，3#，劉林1，井光芳1，趙春霞1，魯玲1，王守箐1，3（1.臨沂大學(xué)藥學(xué)院，山東 臨沂 276005；2.廣東藥科大學(xué)藥科學(xué)院，廣州 511400；3.臨沂大學(xué)現(xiàn)代中藥研究所，山東 臨沂 276005）

目的：為銀杏的綜合利用和銀杏酚酸的進一步研究提供參考。方法：以“銀杏酚酸”“提取”“藥理”“檢測”“Ginkgo phenol acid”“Ginkgolic acids”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2000年1月－2016年6月在PubMed、Springer、ScienceDirect、中國知網(wǎng)、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫中的相關(guān)文獻，對銀杏酚酸的提取分離方法、檢測方法、藥理作用和制劑研究等進行綜述。結(jié)果與結(jié)論：共檢索到相關(guān)文獻321篇，其中有效文獻54篇。銀杏酚酸的提取分離方法有回流法、微波法、層析法、樹脂吸附法和超臨界CO2萃取法等；檢測方法主要有常規(guī)的薄層色譜法、氣相色譜法、熒光分光光度法、高效液相色譜（HPLC）法、紫外分光光度法以及聯(lián)合應(yīng)用的固相萃取-HPLC法、HPLC串聯(lián)大氣壓化學(xué)電離源質(zhì)譜法、HPLC-二極管陣列檢測法和HPLC-電噴霧質(zhì)譜等。銀杏酚酸主要有抗腫瘤、抑菌和殺菌、抗病毒、殺蟲等藥理作用和抗氧化活性。銀杏酚酸提取分離及分析檢測方法成熟，但是現(xiàn)有劑型品種匱乏，大多數(shù)研究仍停留在基礎(chǔ)研究階段，局限在殺蟲等農(nóng)藥領(lǐng)域或是簡單的功能性食品方面。開發(fā)銀杏酚酸的新劑型，如納米混懸劑、微乳、微囊、微球、包合物、固體分散體、脂質(zhì)體等，將其用于生物農(nóng)藥、功能性食品、抗腫瘤或是抗病毒制劑，具有很好的前景。

銀杏酚酸；提?。环蛛x；藥理作用；制劑

銀杏酚酸屬漆酚類物質(zhì)[1]，其為6-烷基或6-烯基水楊酸的衍生物，廣泛存在于銀杏葉、外種皮和種仁中，主要存在于銀杏的外種皮內(nèi)，可分為銀杏酸（白果酸、氫化白果酸、氫化白果亞酸）、銀杏酚、銀杏二酚等[2-3]。銀杏酚酸具有免疫毒性、細(xì)胞毒性和致敏性，是銀杏提取物及其制劑中引起中毒的主要物質(zhì)[4-5]。潘紅梅等[6]采用高效液相色譜（HPLC）法檢測銀杏酚酸粗提物時發(fā)現(xiàn)，銀杏酚酸主要由C13∶0、C15∶1、C17∶2、C15∶0、C17∶1等5種酚酸組分組成，銀杏外種皮、葉以及種仁中的銀杏酚酸種類一致，但是色譜圖中還有未知的小峰，有待于進一步分析確定其成分。筆者以“銀杏酚酸””“提取”“藥理”“檢測”“Ginkgo phenol acid”“Ginkgolic acids”等為關(guān)鍵詞，組合查詢2000年1月－2016年6月在PubMed、Springer、ScienceDirect、中國知網(wǎng)、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫中的相關(guān)文獻。結(jié)果，共檢索到相關(guān)文獻321篇，其中有效文獻54篇?，F(xiàn)對銀杏酚酸的提取分離方法、檢測方法、藥理作用及其制劑研究等進行綜述，以期為銀杏的綜合利用和銀杏酚酸的進一步研究提供參考。

1 銀杏酚酸的提取分離方法

銀杏酚酸的提取分離方法有回流法、微波法、層析法、樹脂吸附法和超臨界CO2萃取法等。

1.1 回流法和微波法

張衡等[7]采用回流法提取銀杏酚酸，將銀杏外種皮預(yù)處理，稱取一定量的銀杏外種皮粉末于燒瓶中，按照一定的料液比加入萃取溶劑，恒溫水浴回流提取，得到銀杏酚酸粗提物。研究中發(fā)現(xiàn)，銀杏酚酸的得率隨乙醇濃度的增大而升高，提高溫度有利于銀杏酚酸的提取，提取的最佳時間為1 h，而料液比對得率的影響不大。采用微波法提取銀杏酚酸，與回流法不同的是將恒溫水浴回流換成在微波催化合成/萃取儀中進行萃取，從而得到銀杏酚酸粗提物。研究中發(fā)現(xiàn)，提取溶劑乙醇的濃度對得率的影響最大。在確保得率的情況下，微波法具有節(jié)省時間和能源、易于工業(yè)化操作的優(yōu)點。

1.2 層析法

1.2.1 柱層析分離 藏麗等[8]先使用皂化反應(yīng)，將銀杏外種皮中的酸性成分分離出來，再對總酸部分進行酯化反應(yīng)，使總酸轉(zhuǎn)變成銀杏酸與脂肪酸酯的混合物，接著柱層析分離。在進行柱層析分離時，第一步是用展開劑淋洗層析柱，收集的餾分加入另一層析柱中，用另一種展開劑進行洗脫，多次洗脫后，得到產(chǎn)品。經(jīng)過檢測，得到的銀杏酸產(chǎn)品是由3種銀杏酸及2種二羥基銀杏酸組成的混合物。

1.2.2 薄層層析分離 倪學(xué)文等[9]在分離銀杏酚酸時采用了薄層層析法。將銀杏酚酸混合物溶于有機溶劑中，點樣、展開、顯色，收集各個主要譜帶，經(jīng)甲醇洗脫、過濾，取濾液。將濾液濃縮，再加入稀硝酸溶解，用醇類萃取，冷凍干燥后得到單體化合物。

1.3 樹脂吸附法

尹秀蓮等[10]采用樹脂吸附法分離銀杏酚酸。將銀杏酚酸石油醚溶液通過裝有D290樹脂的離子交換柱，大孔樹脂吸附完全后進行洗脫，洗脫劑為1%的乙酸/石油醚溶液。除去洗脫液中的溶劑和乙酸，得到純度為85.59%的銀杏酚酸。倪學(xué)文等[11]做了樹脂的靜態(tài)吸附試驗，將預(yù)處理的6種濕樹脂（NAK-9、X-5、AB-8、ADS-17、D3520、D4020）放入燒瓶中，加入吸附原液，振蕩，吸附完全后，過濾，用HPLC法測定濾液。結(jié)果，在6種吸附樹脂中樹脂AB-8的吸附效果最好。當(dāng)采用兩種大孔吸附樹脂吸附、不同濃度乙醇梯度洗脫時，產(chǎn)物純度可達95%[12]。利用樹脂精制銀杏酚酸成本低、效率高，是一種有效的分離方法。

1.4 超臨界CO2萃取法

金黨琴[13]對超臨界CO2萃取法萃取銀杏外種皮中銀杏酚酸的工藝進行了研究。將銀杏外種皮粉末裝于萃取設(shè)備中，在設(shè)定的條件下分別進行靜態(tài)萃取和動態(tài)萃取，在分離器中收集銀杏酚酸。在萃取壓力為25 MPa、萃取溫度為40℃、萃取時間為5 h、CO2流量為20 g/min、夾帶劑為乙醇的條件下，銀杏酚酸得率為0.9%[13]。尹秀蓮等[14]在萃取壓力為30 MPa、萃取溫度為45℃、萃取時間為6 h、CO2流量為2 L/min的條件下，制得銀杏酚酸的純度達80%。Tian L等[15]采用響應(yīng)面法優(yōu)化設(shè)計超臨界CO2萃取法，在萃取壓力為31.3 MPa、萃取溫度為46.1℃、CO2流量為11.1 g/min、乙醇夾帶劑為30 mL、靜態(tài)時間為1 h、動態(tài)時間為2 h的條件下，提取量達74 mg/g。超臨界CO2萃取法具有操作方法簡便、有機溶劑使用量少、得率高、純度高、環(huán)境污染小等優(yōu)點。

2 銀杏酚酸的檢測方法

銀杏酚酸的檢測方法主要有常規(guī)的薄層色譜（TLC）法、氣相色譜（GC）法、熒光分光光度法、HPLC法、紫外分光光度（UV）法以及聯(lián)合應(yīng)用的固相萃取-HPLC法、HPLC串聯(lián)大氣壓化學(xué)電離源質(zhì)譜法、HPLC-二極管陣列檢測法和HPLC-電噴霧質(zhì)譜等。

2.1 熒光分光光度法

熒光分光光度法具有靈敏度高、操作方便、檢測成本低等優(yōu)點。田亞平等[16]建立了檢測銀杏酚酸的熒光分光光度法，與HPLC法比較，兩種方法的測定結(jié)果基本一致，但是前者具有精密度偏低的缺點。目前，該法已很少采用。

2.2 HPLC法

HPLC法作為最常用的一種含量測定方法，具有方法簡便、準(zhǔn)確性好、重現(xiàn)性好、精密度高等優(yōu)點，但是儀器價格相對昂貴[16-17]。王蕎薇等[17]采用HPLC法測定銀杏葉中銀杏酚酸的含量，結(jié)果表明，該法的精密度、準(zhǔn)確度均十分理想，可用于銀杏葉的質(zhì)量控制。

反相HPLC（RP-HPLC）法作為HPLC法的一部分，具有分離效果好、準(zhǔn)確性高、分析速度快及儀器自動化程度高等優(yōu)點，尤其適合于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子質(zhì)量大及離子型化合物的分析。所以，銀杏酸的RPHPLC法分析發(fā)展特別迅速。孔玉霞等[18]采用RP-HPLC法測定銀杏酸，結(jié)果表明該法的準(zhǔn)確度高、精密度好、分析速度快，適合銀杏酸的測定。

2.3 UV法

仰榴青、趙東亞等[19-20]研究了UV法測定銀杏酸的含量。銀杏酸屬弱極性物質(zhì)，銀杏外種皮提取物溶液中弱極性的黃酮類化合物，由于吸收峰靠近銀杏酸檢測波長且含量相對較高，會干擾銀杏酸測定。預(yù)凈化樣品采用正己烷萃取法，避免了多次濃縮過程。UV法檢測結(jié)果與HPLC法相似，但前者操作簡單、分析速度快、投入成本低，是一種更容易推廣的銀杏酸定量分析方法。

2.4 其他方法

《美國藥典》（35版）[21]和《歐洲藥典》（6.1版）[22]規(guī)定，銀杏制劑中銀杏酚酸的含量應(yīng)低于5 μg/g[21-23]；2015年版《中國藥典》（一部）[24]規(guī)定，銀杏制劑中銀杏酚酸的含量應(yīng)低于10 μg/g。羅曼等[25]采用固相萃取-HPLC法測定毒性成分總銀杏酸含量，采用C18柱，用75%甲醇洗脫去脂溶性雜質(zhì)，有效除去了雜質(zhì)的干擾，保證了測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。Fuzzati N等[23]采用HPLC串聯(lián)大氣壓化學(xué)電離源質(zhì)譜法和HPLC-二極管陣列檢測法用于分析銀杏酸和其相關(guān)的酚類，樣品在室溫下48 h內(nèi)穩(wěn)定。該法不需要濃縮步驟，可用于銀杏提取物中銀杏酚酸的定量分析，但是儀器價格昂貴。Ndjoko K等[26]采用HPLC-電噴霧質(zhì)譜法對銀杏葉提取物通過電噴霧電離進行了快速定性和定量測定，該法比LC-UV法具有更強的選擇性和較高的靈敏度，可量化測定銀杏酚酸的含量低至1.5 μg/g。該法可廣泛用于各種商業(yè)化的銀杏制劑的研究，以考察有關(guān)植物藥的安全性。Xia H等[27]使用HPLC-電噴霧質(zhì)譜法檢測大鼠血漿中銀杏酚酸，用于其藥動學(xué)的研究，獲得了滿意結(jié)果。該法可用于生物樣品中銀杏酚酸的含量測定。

3 銀杏酚酸的藥理作用

銀杏酚酸具有致過敏、致突變的作用，被看作是銀杏葉提取物中的有害成分，此毒性成分可抑制大腦里的谷氨酸轉(zhuǎn)變成γ-氨基丁酸，進而使大腦細(xì)胞功能喪失[28-30]。銀杏酚酸對原代大鼠肝細(xì)胞的毒性明顯小于對HepG2細(xì)胞的毒性，細(xì)胞色素P450（CYP）3A和CYP1A介導(dǎo)的反應(yīng)可能會增強銀杏酚酸的毒性[31]。近年來，人們對銀杏酚酸的藥理作用[32]研究逐步深入，尤其是抗腫瘤、抑菌和殺菌、抗病毒、殺蟲和抗氧化等方面。

3.1 抗腫瘤作用

銀杏酚酸能抑制細(xì)胞增殖、遷移和浸染活性，促進細(xì)胞凋亡；能誘導(dǎo)激活腺苷一磷酸激活的蛋白激酶途徑及一些關(guān)鍵酶的合成，例如乙酰輔酶A/脂肪酸合成酶，從而抑制癌細(xì)胞脂肪的從頭合成[33]。銀杏酚酸對體外人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的毒性作用和體內(nèi)荷H22肝癌小鼠腫瘤生長抑制作用的研究結(jié)果表明，其能明顯抑制這兩種細(xì)胞的增長，并抑制肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[34-35]。銀杏酚酸于體外能抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721生長，在0～30 mg/L范圍內(nèi)呈時間和劑量依賴關(guān)系。銀杏酚酸對荷H22肝癌小鼠的免疫系統(tǒng)不僅沒有明顯的不良反應(yīng)，而且還能顯著提高荷瘤小鼠的免疫功能，表現(xiàn)為荷瘤小鼠淋巴細(xì)胞數(shù)的顯著升高。銀杏酚酸于體內(nèi)能顯著抑制荷H22肝癌小鼠腫瘤生長，其抑瘤作用可能與調(diào)節(jié)機體的免疫功能有關(guān)[34]。研究提示，銀杏酚可作為一種小劑量抗腫瘤輔助藥物。

3.2 抑菌和殺菌作用

銀杏酚酸對茄子白絹病菌、茄子立枯病菌、甘藍黑斑病菌、白菜炭疽病菌、黃瓜枯萎病菌等5種蔬菜病原菌的菌絲生長都有抑菌作用[36]，可以抑制一些常見植物致病性真菌的生長[37]。銀杏酚酸對柿角斑病菌、稻瘟病菌、梨銹病菌、玉米炭疽病菌、柑橘瘡痂病菌、甘蔗鳳梨病菌、西瓜枯萎病菌、梨褐斑病菌和香蕉炭疽病菌等9種植物病原真菌均有抑制作用，其中對香蕉炭疽病菌活性最高；對綠膿桿菌、蠟樣芽孢桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、巨大芽孢桿菌、痢疾志賀氏菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、枯草芽孢桿菌、傷寒桿菌等10種動物病原細(xì)菌也有不同程度的抑制作用，其中對巨大芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的抑菌活性最強[38]。銀杏酚酸對2種細(xì)菌（大腸埃希菌和枯草芽孢桿菌）以及4種真菌（青霉、產(chǎn)紫青霉、沙門柏干酪青霉、黑曲霉）均有抑菌作用，其中對大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、青霉的抑菌作用較好[39]。

3.3 抗病毒作用

銀杏提取物對單純皰疹Ⅰ型病毒和水皰性口炎病毒均無作用，但對柯薩奇B3病毒有一定的抗病毒作用[40]。銀杏酚酸在體外能抑制非細(xì)胞體系的人類免疫缺陷病毒（HIV）蛋白酶活性和人體細(xì)胞的HIV感染。與陰性對照組比較，銀杏酸（31.2 μg/mL）抑制HIV蛋白酶活性達60%，呈濃度依賴性；在質(zhì)量濃度為150μg/mL時，僅表現(xiàn)出有限的細(xì)胞毒性[41]。

3.4 殺蟲作用

銀杏酚酸具有殺蟲作用。石啟田等[42-45]研究表明，銀杏外種皮中的銀杏酸、銀杏酚、白果酚是殺蟲、驅(qū)蟲的活性物質(zhì)[42]，對多種蚜蟲及薊馬、菜青蟲等農(nóng)業(yè)害蟲具有防治作用[43]。銀杏酚對菜青蟲的防治作用是以拒食作用和驅(qū)蟲作用為主[44]，作用機制是由于銀杏酚抑制了酶的合成，影響了菜青蟲的蛻皮和生長發(fā)育，使其表現(xiàn)為拒食和發(fā)育為超齡幼蟲，多數(shù)不能形成蛹而致死[45]。金黨琴[46]研究表明，銀杏酚酸對甜菜夜蛾的作用方式有多種，包括胃毒、觸殺、拒食、內(nèi)吸等，其中以拒食作用最為顯著。

銀杏酚酸作為新型滅螺藥，其活性作用機制不同于氯硝柳胺，而是靶向于釘螺線粒體，抑制包括細(xì)胞色素C氧化酶、三磷酸腺苷合成酶、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶等線粒體酶的基因表達[47]。Wu L等[48]利用實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)研究銀杏酚酸、硝唑尼特、大蒜素與蒿甲醚在體外培養(yǎng)體系抗隱孢子蟲活性的影響研究表明，銀杏酚酸可以抗隱孢子蟲的活性。

Maleeva G等[49]采用膜片鉗技術(shù)，研究銀杏酚酸對激活在中國倉鼠卵巢細(xì)胞和神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中表達的受體通道引起的離子電流的影響，結(jié)果顯示，銀杏酸可使α1甘氨酸受體亞基介導(dǎo)的電流增強，而對α2、α3甘氨酸受體或γ-氨基丁酸A型受體無此作用。這表明銀杏酚酸是一種新型的α1甘氨酸受體的選擇性增強劑。

此外，銀杏酚酸還具有抗氧化活性。銀杏外種皮多酚粗提物對1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和羥自由基的清除能力隨濃度升高而增強[50]。

4 銀杏酚酸的制劑研究

張小利等[51-52]制備了銀杏酸凝膠劑。楊小明等[53]，研制了銀杏酸微乳劑，應(yīng)用于農(nóng)藥。程華平等[54]進行了銀杏酸豆奶的研制，擴展了其在食品領(lǐng)域的應(yīng)用。

5 結(jié)語

綜上所述，銀杏酚酸提取分離及分析檢測方法成熟，但是現(xiàn)有劑型品種匱乏，大多數(shù)研究仍停留在基礎(chǔ)研究階段，局限在殺蟲等農(nóng)藥領(lǐng)域或是簡單的功能性食品方面。開發(fā)銀杏酚酸的新劑型，如納米混懸劑、微乳、微囊、微球、包合物、固體分散體、脂質(zhì)體等，將其用于生物農(nóng)藥、功能性食品、抗腫瘤或是抗病毒制劑，具有很好的前景。另外，對銀杏酚酸的毒性及其治療作用的研究有待進一步拓展，尤其是其生物利用度、藥動學(xué)和毒理研究。對其進行結(jié)構(gòu)修飾以尋找低毒高效的化合物也是今后研究的一個方向。

[1] 成亮，樓鳳昌.銀杏外種皮中銀杏酚酸的研究概況[J].藥學(xué)進展，2004，28（5）：209-214.

[2] 耿敬章.銀杏種皮的銀杏酸提取工藝優(yōu)化研究[J].北方園藝，2012（13）：42-44.

[3] 唐于平，樓鳳昌，王歡，等.銀杏外種皮的化學(xué)成分和藥理作用[J].藥學(xué)進展，2000，24（3）：152-155.

[4] 田紫平，喻微，何貴州，等.HPLC測定銀杏葉中總銀杏酸的含量[J].微量元素與健康研究，2015，32（2）：36-47.

[5] 倪學(xué)文，吳謀成.銀杏外種皮中銀杏酚酸的提取及應(yīng)用研究[J].湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2001，3（4）：22-24.

[6] 潘紅梅，吳彩娥，曹福亮，等.銀杏種仁中銀杏酚酸的提取及組分研究[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2011，35（6）：29-33.

[7] 張衡，劉曉杰，姚文紅，等.銀杏外種皮中銀杏酚酸的提取方法研究[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2012，29（2）：147-151.

[8] 藏麗，鄭榮，倪力軍，等.銀杏外種皮中銀杏酸的分離方法[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2000，12（2）：32-35.

[9] 倪學(xué)文，楊志堅，吳謀成.銀杏外種皮中銀杏酚酸的分離和抑菌試驗[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2001，13（6）：30-32.

[10] 尹秀蓮，楊克迪，仰榴青，等.樹脂吸附法分離銀杏酚酸的研究[J].離子交換與吸附，2002，18（6）：501-507.

[11] 倪學(xué)文，吳謀成.銀杏酚酸的分離鑒定及其抗菌活性研究[J].食品科學(xué)，2004，25（9）：59-63.

[12] 倪學(xué)文，吳謀成.銀杏外種皮銀杏酚酸的提取方法及其體外抗腫瘤活性[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（5）：151-154.

[13] 金黨琴.超臨界CO2萃取-高效液相色譜法測定銀杏外種皮中銀杏酚酸[J].分析試驗室，2013，32（6）：97-100.

[14] 尹秀蓮，楊克迪，仰榴青，等.銀杏外種皮中銀杏酚酸的超臨界CO2萃取[J].中藥材，2003，26（6）：428-429.

[15] Tian L，Zhou M，Pan X，et al.Supercritical CO2extrac-tion and response surface optimization of ginkgolic acids from ginkgo biloba exopleura[J].Korean J Chem Eng，2015，32（8）：1649-1654.

[16] 田亞平，尤文元，李彧娜.熒光分析法測定銀杏酚酸[J].分析化學(xué)，2006，34（U09）：155-157.

[17] 王蕎薇，謝媛媛，王義明，等.銀杏葉中銀杏酚酸類成分含量測定方法研究[J].中國藥學(xué)雜志，2015，50（2）：167-173.

[18] 孔玉霞，李晨愷，王盼盼，等.銀杏酸的定量分析方法研究[J].遼寧大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，37（1）：57-60.

[19] 仰榴青，吳向陽，陳鈞，等.銀杏酸的分光光度法測定[J].分析化學(xué)，2004，32（5）：661-664.

[20] 趙東亞，唐進根，陳利紅，等.銀杏外種皮提取銀杏酸工藝的優(yōu)化試驗[J].林業(yè)科技開發(fā)，2012，26（5）：79-82.

[21] 美國藥典委員會.美國藥典[S].35版.美國藥典委員會，2012：1326-1329.

[22] 歐洲藥典委員會.歐洲藥典[S].6.1版.歐洲藥典委員會，2008：3461-3463.

[23] Fuzzati N，Pace R，Villa F.A simple HPLC-UV method for the assay of ginkgolic acids in Ginkgo biloba extracts [J].Fitoterapia，2003，74（3）：247-256.

[24] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：附錄416、1491-1493.

[25] 羅曼，鮑家科，宋曉寧，等.固相萃取-HPLC法測定白果中總銀杏酸的含量[J].中國藥房，2011，22（27）：2546-2548.

[26] Ndjoko K，Wolfender J，Hostettmann K，et al.Determination of trace amounts of ginkgolic acids in Ginkgo biloba L.leaf extracts and phytopharmaceuticals by liquid chromatography-electrospray mass spectrometry[J].J Chromatogr B，2000，744（2）：249-255.

[27] Xia H，Wang X，Li L，et al.Development of high performanceliquidchromatography/electrosprayionization mass spectrometry for assay of ginkgolic acid（15∶1）in rat plasma and its application to pharmacokinetics study [J].J Chromatogr B，2010，878（28）：2701-2706.

[28] 高華榮.銀杏葉提取物的藥理作用[J].中國實用醫(yī)藥，2010，5（16）：168-169.

[29] 劉花，高卉.銀杏葉提取物藥理作用的研究進展[J].湖北科技學(xué)院學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2015，29（3）：259-262.

[30] Ahlemeyer B，Selke D，Schaper C，et al.Ginkgolic acids induce neuronal death and activate protein phosphatase type-2C[J].Eur J Pharmacol，2001，430（1）：1-7.

[31] Liu ZH，Zeng S.Cytotoxicity of ginkgolic acid in HepG2 cells and primary rat hepatocytes[J].Toxicol Lett，2009，187（3）：131-136.

[32] 劉欣，黨婭，耿敬章.銀杏酸的藥理活性及應(yīng)用研究進展[J].中國西部科技，2012，11（2）：32-33.

[33] Ma J，Duan W，Han S，et al.Ginkgolic acid suppresses the development of pancreatic cancer by inhibiting pathways driving lipogenesis[J].Oncotarget，2015，6（25）：20993-21003.

[34] 王云飛，楊小明，李月英，等.銀杏酚對SMMC-7721肝癌細(xì)胞和荷H22肝癌小鼠的抗癌作用[J].江蘇大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2013，23（3）：233-237.

[35] Yang XM，Wang YF，Li YY，et al.Thermal stability of ginkgolic acids from Ginkgo biloba and the effects of ginkgolC17∶1ontheapoptosisandmigrationof SMMC7721 cells[J].Fitoterapia，2014，doi：10.1016/j.fitote.2014.07.003.

[36] 林清洪，李金雨，陳菲，等.銀杏酚對5種蔬菜病原物的抑菌活性初探[J].亞熱帶植物科學(xué)，2014，43（2）：152-155.

[37] 王國艷，朱晶晶，樓鳳昌.銀杏外種皮的化學(xué)成分及其對植物真菌的抑制作用[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報，2014，45（2）：170-174.

[38] 鄧業(yè)成，駱海玉，張明，等.銀杏外種皮酚酸類物質(zhì)的抑菌活性[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（2）：64-66.

[39] 吳海霞，吳彩娥，劉金達，等.銀杏種仁酚酸的純化、鑒定及其抑菌活性分析[J].中國食品學(xué)報，2015，15（3）：207-215.

[40] 張艷，李京培，明亮，等.銀杏葉提取物的體外抗病毒作用[J].安微中醫(yī)臨床雜志，2000，12（3）：206-207.

[41] Lü JM，Yan S，Jamaluddin S，et al.Ginkgolic acid inhibits HIV protease activity and HIV infection in vitro[J].Med Sci Monit，2012，18（8）：293-298.

[42] 石啟田.銀杏酚酸類物質(zhì)防治農(nóng)業(yè)害蟲的研究[J].林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2004，24（2）：83-86.

[43] 石啟田.銀杏外種皮中銀杏酚酸類物質(zhì)防治農(nóng)業(yè)害蟲試驗初報[J].江蘇林業(yè)科技，2003，30（5）：19-34.

[44] 石啟田.銀杏酚對菜青蟲的拒食活性研究[J].農(nóng)藥研究與應(yīng)用，2008，12（4）：31-34.

[45] 石啟田，劉歡，魯榮彩，等.銀杏酚對菜青蟲拒食活性的研究[J].生物質(zhì)化學(xué)工程，2009，43（1）：13-16.

[46] 金黨琴.銀杏酚酸對甜菜夜蛾的生物活性及控制作用[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，42（9）：79-82.

[47] Li X，Deng F，Shan X，et al.Effects of the molluscicidal agent GA-C13：0，a natural occurring ginkgolic acid，on snail mitochondria[J].Pesticide Biochemistry and Physiology，2012，103（2）：115-120.

[48] Wu L，Jiang X，Shen Y，et al.Efficacy of ginkgolic acids against Cryptosporidium andersoni in cell culture[J].Parasitol Res，2011，109（5）：1475-1479.

[49] Maleeva G，Buldakova S，Bregestovski P.Selective potentiation of alpha 1 glycine receptors by ginkgolic acid[J].Front Mol Neurosci，2015，doi：10.3389/fnmol.2015. 00064.

[50] 涂寶軍，李勇，董玉瑋，等.銀杏外種皮多酚提取工藝及抗氧化性能研究[J].食品工業(yè)科技，2014，35（20）：340-343.

[51] 張小利，歐陽臻，楊小明，等.銀杏酸凝膠劑的制備及抑菌試驗研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2004，15（2）：124-126.

[52] 張小利，歐陽臻，楊克迪，等.銀杏酸凝膠制劑的研制及制劑中銀杏酸的含量測定[J].中成藥，2004，26（6）：507-508.

[53] 楊小明，夏磊，劉偉民，等.1.5%銀杏酸微乳劑的研制[J].農(nóng)藥，2008，47（5）：330-332.

[54] 程華平，萬婭瓊，楊普，等.銀杏酸豆奶的研制[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，31（5）：742-743.

R248.1；R943.1

A

1001-0408（2017）04-0547-04

2016-05-09

2016-12-07）

（編輯：余慶華）

山東省重點研發(fā)計劃項目（No.2015GSF119013）；臨沂大學(xué)2015年大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目（No.43、44）

＊學(xué)士。研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)。E-mail：932291822 @qq.com

#通信作者：講師，碩士。研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)。E-mail：zhenshengao@163.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.04.32