徐國銀洪偉鳴談為忠楊利慧

（1.江蘇省蘇州市吳中區(qū)金庭動物防疫站，江蘇蘇州 215111；2.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院，江蘇省獸用生物制藥高技術研究重點實驗室，江蘇泰州 225300）

抗豬流行性腹瀉中藥復方制劑的急性毒性試驗

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（1.江蘇省蘇州市吳中區(qū)金庭動物防疫站，江蘇蘇州 215111；2.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院，江蘇省獸用生物制藥高技術研究重點實驗室，江蘇泰州 225300）

為觀察一種抗豬流行性腹瀉的中藥復方制劑對小鼠的安全性。根據(jù)《獸藥試驗技術規(guī)范匯編》的要求選用小白鼠進行了急性毒性試驗研究，采用灌胃法進行了急性毒性試驗，試驗結果表明該復方制劑對小鼠沒有毒性作用。

豬流行性腹瀉 中藥復方制劑 小鼠 急性毒性

豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的急性、接觸性、高度傳染性的一種消化道疾病，是危害養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)最重要的傳染病之一。該病臨床主要癥狀表現(xiàn)為急性腸炎以及嘔吐、水樣腹瀉和脫水。PED的波及范圍甚廣，在全球均有病例報道。并且PED發(fā)病率高，各種年齡的豬都能感染發(fā)病，7日齡以下仔豬感染死亡率可高達80%～100%[1]。PED的頻發(fā)給我國養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失[2]。

由于PEDV具有高度的變異性，給臨床治療帶來了很多困難。目前，市面上預防PED主要是依靠PED弱毒苗和滅活苗。治療PEDV的藥物以西藥為主，雖可緩解病情和降低死亡率，但極易引起致病病毒變異而導致產(chǎn)生耐藥性，并存在動物體內藥物殘留等隱患[3]。因此，開展抗PEDV藥物的研發(fā)對控制豬流行性腹瀉病、促進養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展有著十分重要的意義。隨著人們對綠色畜產(chǎn)品的需求度越來越高，中草藥作為化學藥物的替代品用于防治畜禽疾病愈發(fā)得到大家的重視。本研究所用藥物為江蘇省獸用生物制藥高技術研究重點實驗室研制的一種用于防治豬流行性腹瀉病的純中藥復方制劑，為全面評價其安全性和為臨床安全科學用藥提供依據(jù)，根據(jù)農(nóng)業(yè)部《獸藥試驗技術規(guī)范匯編》的要求，進行了急性毒性試驗研究。同時，也為后續(xù)深入探討該復方制劑的藥理作用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康清潔級昆明系小白鼠50只，雌雄各半，體重20±2g，購自江蘇省揚州大學比較醫(yī)學中心，預飼3d后開展試驗。

1.2 試驗藥物

抗豬流行性腹瀉的中藥復方制劑由黃連、白頭翁等10味中藥精制而成，濃縮至1ml藥液相當于1g藥材。由江蘇省獸用生物制藥高技術研究重點實驗室自行研制。

1.3 試驗方法

將上述50只精神狀態(tài)良好的小白鼠隨機分成5組，每組10只，雌雄各半，其中，第Ⅰ～Ⅳ組為試驗組，第Ⅴ組為空白對照組，正式灌胃給藥前禁食12h，不禁水。根據(jù)預試驗的劑量，分別按0.01、0.02、0.03、0.04ml/g·BW等四個不同劑量對實驗動物進行灌胃。其中，空白對照組按0.04ml/g·BW灌服生理鹽水。采用一次劑量直接灌入，灌胃完成后每天注意觀察小鼠的精神狀況、采食飲水情況和死亡情況，并及時如實記錄。灌胃7d后統(tǒng)一剖檢存活小鼠，觀察主要臟器是否存在病變及其他異常[4-5]。

2 結果與分析

經(jīng)一次劑量直接灌服不同濃度的藥物后，各組實驗動物均未見死亡。低劑量組灌胃后小鼠的采食飲水與精神狀態(tài)均正常；高劑量組灌胃后小鼠經(jīng)短暫休息與調整，均能較快地恢復正?；顒樱稳沼^察采食量和精神狀態(tài)均顯正常，整個試驗周期內未見小鼠出現(xiàn)明顯的中毒癥狀。第7d時剖檢存活小鼠，觀察主要臟器均未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的明顯病變（結果詳見表1）。

3 討論

（1）灌胃劑量達到高劑量時易導致小鼠的胃腸道功能發(fā)生紊亂，故而小鼠易表現(xiàn)出采食量下降和精神狀態(tài)低迷等現(xiàn)象。伴隨著時間推移，上述情況逐漸轉好，并在次日后可恢復正常。

（2）剖檢存活小鼠后未見心、肝、脾、肺等主要臟器出現(xiàn)肉眼可見的病變，由此可證明短期內該復方制劑對小鼠是安全的。

（3）急性毒性試驗是臨床評價藥物安全性的一項重要指標，本試驗通過經(jīng)口灌胃給藥的途徑觀察了該復方制劑的急性毒性。灌胃的最高劑量達到了0.04ml/g·BW，試驗結果表明未發(fā)現(xiàn)對小鼠造成任何可見的毒性反應。

（4）根據(jù)農(nóng)業(yè)部《獸藥試驗技術規(guī)范匯編》中結果評定標準應判定為無毒[4]。因此可認為臨床上使用該復方制劑治療豬流行性腹瀉病是安全的。

[1]高君愷，劉浩飛，楊倩.豬流行性腹瀉病毒的研究進展[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報，2014，37（1）：1-5.

[2]Chen J F，Wang C B，Shi H Y，etal.Molecular epidemiology of porcine epidemic diarrhea virus in China[J].Arch Virol，2010，（155）：1471-1476.

[3]李彬，劉浩飛，孫冰，等.豬流行性腹瀉病毒Taq Man熒光定量PCR方法的建立與應用[J].江蘇農(nóng)業(yè)學報，2014，30（1）：125-129.

[4]洪偉鳴，左偉勇，郁杰，等.雞支康口服液的急性毒性試驗[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2013，41（7）：218.

[5]郁杰，葛竹興，邢曉玲，等.仔豬痢清口服液的急性毒性實驗研究[J].中國獸藥雜志，2009，43（3）：29-30.