李玉娟

內(nèi)蒙古包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院乳品與農(nóng)牧學(xué)院

包頭地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎致病葡萄球菌耐藥性研究

李玉娟

內(nèi)蒙古包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院乳品與農(nóng)牧學(xué)院

從包頭市所屬轄區(qū)的奶牛養(yǎng)殖場采集到子宮內(nèi)膜炎患牛的子宮分泌物120份，對其進行了致病葡萄球菌分離及鑒定，分離出50株葡萄球菌，其中金黃色葡萄球菌32株，凝固酶陰性葡萄球菌18株。在凝固酶陰性葡萄球菌中，產(chǎn)色葡萄球菌8株，腐生葡萄球菌5株，表皮葡萄球菌2株，頭葡萄球菌2株，溶血葡萄球菌1株。針對現(xiàn)狀進行葡萄球菌藥敏試驗。

一、藥敏試驗方法

1.藥物濃度的配置

本試驗所選抗生素的配制方法，保存方法、稀釋濃度梯度均依據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會CLSI 2012年版藥敏試驗標(biāo)準(zhǔn)進行。

2.菌液制備

用移液槍精確移取200μL菌液打入事先準(zhǔn)備好的、裝有滅菌肉湯的試管內(nèi)，在36℃±1℃的恒溫?fù)u床振蕩過夜培養(yǎng)。次日，以滅菌的MH肉湯作為稀釋液，對菌液進行稀釋，使菌液達(dá)到0.5麥?zhǔn)媳葷峁艿臐岫?。將稀釋好的菌液再?:100的比例稀釋菌液，配置成含菌量約為1×106CFU/毫升的菌液，備用。

3.MIC值的測定

本試驗采用標(biāo)準(zhǔn)微量肉湯稀釋法測定各受試藥物的MIC值，并在96孔板上完成。試驗設(shè)三種對照，分別是MH肉湯對照、不同抗菌藥物對照、菌液對照試驗所選的每種藥物均重復(fù)三次，并以ATCC 29213作為質(zhì)控菌株。本試驗以MH肉湯對照和抗菌藥物對照不長菌，菌液對照變渾濁以及ATCC的最小抑菌濃度MIC在質(zhì)控范圍內(nèi)為前提下，若在96孔板中不長菌那個空的藥物濃度即為最小抑菌濃度(MIC)。藥物的控制范圍及配置見表1。

表1 試驗藥物控制范圍、判定標(biāo)準(zhǔn)及配置

二、試驗結(jié)果

1.葡萄球菌藥敏試驗結(jié)果

本試驗分別選取了11種獸醫(yī)臨床常用藥和2種聯(lián)合用藥對分離的50株葡萄球菌進行藥物敏感性試驗，實驗結(jié)果顯示：青霉素、阿莫西林、氨芐西林的耐藥率均較高，耐藥率分別是98.0%，80.0%及92.0%；而頭孢吡肟、克拉霉素、多西環(huán)素的耐藥率均較低，耐藥率為28.0%,38.0%,40.0%;其它耐藥率在40.0%～80.0%之間。本試驗選用的兩種聯(lián)合用藥對葡萄球菌均表現(xiàn)出較高的敏感性。

2.葡萄球菌多重耐藥情況

葡萄球菌多重耐藥情況結(jié)果顯示，包頭地區(qū)多重耐藥情況比較嚴(yán)重，耐藥范圍在3～11耐之間。研究顯示，有2株菌同時對11種抗生素耐藥，有1株菌同時對10種抗生素耐藥，有4株菌同時對9種抗生素耐藥，有9株菌同時對8種抗生素耐藥，有7株菌同時對7種抗生素耐藥，有6株菌同時對6種抗生素耐藥，有8株菌同時對5種抗生素耐藥，有11株菌同時對4種抗生素耐藥，有2株菌同時對3種抗生素耐藥。

三、討論

試驗還選擇了臨床上常用的兩種聯(lián)合用藥進行體外藥物敏感性試驗。試驗結(jié)果顯示兩種聯(lián)合用藥均表現(xiàn)出較高的敏感性，耐藥率均在10%～20%之間。因此，在臨床用藥時獸醫(yī)應(yīng)多選用聯(lián)合用藥，這樣既可以減少耐藥菌株的出現(xiàn)，又可以減少多重耐藥菌株的流行，最終達(dá)到更好的治療效果。

四、結(jié)論

分離到的葡萄球菌對青霉素耐藥率最高（98.0%），最低的是頭孢吡肟（28.0%），有多重耐藥菌株檢出，范圍在3～11耐之間；本試驗所選用的兩種聯(lián)合用藥均表現(xiàn)出較高的敏感性，耐藥率均小于20%。