摘要：沙棘（Hippophae rhamnoides L.）油富含100多種對(duì)人體有益的生物活性物質(zhì)，但沙棘果肉與種子的含油量均較低，所以提高沙棘含油量的遺傳改良一直是沙棘育種的目標(biāo)。利用微量提取法分別測(cè)定了1個(gè)沙棘半家系和2個(gè)沙棘品種果實(shí)不同成熟期的果肉含油量。結(jié)果表明，BHi727115半家系不同F(xiàn)1代個(gè)體間干果肉含油量存在顯著差異，介于12.64%～26.94%，平均值為20.15%（n=59）；BHi72715和BHi72782品種的干果肉含油量分別介于21.08%～25.09%與20.43%～25.72%；在果實(shí)不同成熟期，果肉含油量變化在不同品種間存在明顯差異。首次分析了沙棘半家系果肉含油量的變異，可為沙棘育種提供科學(xué)依據(jù)；不同成熟期的研究結(jié)果則可為沙棘果實(shí)的采收與加工利用提供參考。

關(guān)鍵詞：沙棘（Hippophae rhamnoides L.）；果肉含油量；半家系；不同成熟期；微量提取法

中圖分類號(hào)：S793.6+5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）16-4187-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.16.029

沙棘（Hippophae rhamnoides L.）為胡頹子科（Elaeagnaceae）沙棘屬（Hippophae L.）灌木或小喬木，是重要的經(jīng)濟(jì)林和水土保持植物。沙棘果富含190多種生物活性物質(zhì)[1，2]，如多種不飽和脂肪酸[3]、黃酮類化合物[4]、甾醇類[5]、糖類[2]、維生素類與氨基酸[2，6]等，有高原“圣果”之美譽(yù)。被稱為21世紀(jì)人類食用油的沙棘油富含胡蘿卜素、生育酚、葉綠醌、甾醇、多不飽和脂肪酸（棕櫚油酸、棕櫚酸、油酸、亞油酸和亞麻酸[7]等）以及維生素E、維生素K等生物活性物質(zhì)[8]，在治療癌癥[9]、腫瘤、心腦血管病[10]、消化系統(tǒng)病[11]、燒傷、潰瘍等疾病中有良好療效。沙棘種子含油量為9.8%～19.5%、干果肉含油量為2.02%～34.26%，而鮮果肉含油量則僅為1%～5%。目前全球沙棘油年缺口超過(guò)1 200 t，改良與提高其含油量是解決這一巨大缺口的惟一方法。曾有研究者報(bào)道沙棘不同品種干果肉含油量的差異，但對(duì)干果肉含油量隨果實(shí)不同成熟期的變化研究較少，且未見(jiàn)沙棘半家系種群干果肉含油量的相關(guān)報(bào)道。

索氏提取法是世界范圍內(nèi)植物油脂提取應(yīng)用最廣泛的方法，也是油料提取的第一標(biāo)準(zhǔn)方法[12]，但索氏提取法所需原料較多，耗時(shí)[13]，不利于開(kāi)展大樣品、小材料的研究工作。微量提取法是通過(guò)萃取的原理基于少量樣品進(jìn)行的油脂提取方法[14]，在其他油料植物上已被廣泛采用[15]。試驗(yàn)采用微量提取法對(duì)沙棘半家系和果實(shí)不同成熟期干果肉含油量變化進(jìn)行了分析，旨在為沙棘育種、采收與加工利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

用于果肉含油量變化研究的沙棘（H. rhamnoides L. subsp. mongolica Rousi）果實(shí)來(lái)自瑞典農(nóng)業(yè)大學(xué)Balsgard北歐果樹(shù)和漿果種質(zhì)中心。其中，BHi727115半家系種群的F1代59個(gè)個(gè)體的果實(shí)于2011年果實(shí)成熟期采集，59個(gè)個(gè)體的母本同為BHi727115，父本不同（自由傳粉）。另2個(gè)品種BHi72715和BHi72782果實(shí)不同成熟期的沙棘果實(shí)分別于2011年8月的3、6、9、12、15、18、21、24、27、30日和9月的2、5、8日采收。采后立即放入-20 ℃冰箱里保存。

1.2 樣品制備

將在-20 ℃下冰凍的果實(shí)于冰上縱切，剝離種子，將果肉于液氮研磨，研磨后置于-50 ℃真空冷凍干燥器內(nèi)干燥10 d左右，凍干后將干粉置于真空干燥器內(nèi)保存。利用微量提取法提取油脂前，將樣品置于60 ℃烘箱內(nèi)烘至恒重。

1.3 微量提取法

稱取大約0.2 g樣品于1.5 mL的離心管內(nèi)，加入1 mL的氯仿∶甲醇（2∶1，V/V）溶液和200 μL的玻璃珠，在漩渦混合儀上混勻1 min，放置1 min，連續(xù)5次。于4 ℃冰箱放置2 h。7 000 r/min離心2 min，取上清液到新的離心管里，加入300 μL 1%的KCl溶液混勻。7 000 r/min離心1 min，把氯仿相（下層）轉(zhuǎn)移到已知重量的新的離心管中。真空干燥器中揮發(fā)溶劑，24 h稱重1次，直至重量相差小于0.1 mg，記錄數(shù)據(jù)并計(jì)算含油量。

1.4 半家系與品種果實(shí)不同成熟期果肉的含油量

利用微量提取法測(cè)定BHi727115半家系59個(gè)個(gè)體、BHi72715和BHi72782 2個(gè)品種果實(shí)各13個(gè)不同成熟期的干果肉含油量，每個(gè)樣品設(shè)5次重復(fù)。利用SPSS軟件分析半家系及2個(gè)品種果實(shí)不同成熟期果肉含油量的變化。

2 結(jié)果與分析

2.1 沙棘半家系干果肉含油量變化

試驗(yàn)測(cè)定的沙棘BHi727115半家系F1代59個(gè)個(gè)體干果肉含油量情況見(jiàn)圖1。從圖1可見(jiàn)，BHi727115半家系的59個(gè)個(gè)體干果肉含油量介于12.64%～26.94%，平均值為20.15%。其中編號(hào)為51的個(gè)體干果肉含油量最高，達(dá)到26.94%，編號(hào)為4的個(gè)體最低，為12.64%；群體含油量的變化呈正態(tài)分布（圖2）。P=0.662，>0.05，S=0.228，K=0.049，<1，說(shuō)明干果肉含油量為數(shù)量性狀，受多基因控制。這個(gè)結(jié)果與Yang等[16]的研究結(jié)果相近。

2.2 沙棘品種果實(shí)不同成熟期果肉含油量變化

試驗(yàn)測(cè)定的沙棘品種BHi72715和BHi72782果實(shí)各13個(gè)不同成熟期的干果肉含油量情況見(jiàn)圖3。從圖3可見(jiàn)，BHi72782果實(shí)不同成熟期干果肉含油量介于20.43%～25.72%，平均含油量為23.12%。自8月3日起有不斷增加的趨勢(shì)，于8月24日達(dá)到最高，之后趨于穩(wěn)定。表明該品種于8月24日左右已完全成熟，可于此后收獲以獲得高含油量的果實(shí)。這個(gè)結(jié)果與Kuznetsova等[17]的研究結(jié)果一致，表明沙棘結(jié)果80 d后果實(shí)成熟，果實(shí)含油量隨新陳代謝的變化呈現(xiàn)穩(wěn)定或下降的趨勢(shì)。

從圖3還可見(jiàn)，BHi72715果實(shí)不同成熟期干果肉含油量介于21.08%～25.09%，平均含油量為22.75%。在果實(shí)不同成熟期，BHi72715干果肉含油量變化不明顯，開(kāi)始含油量有逐漸下降的趨勢(shì)，于8月27日達(dá)最低值，之后有緩慢增加趨勢(shì)，但增加不明顯。

圖3表明，2個(gè)沙棘品種果實(shí)不同成熟期干果肉含油量變化趨勢(shì)不同，其中BHi72782品種果肉含油量有不斷增加的趨勢(shì)，BHi72715則基本穩(wěn)定。結(jié)合采果期果色變化，表明BHi72715成熟期較早，8月3日采收時(shí)果實(shí)較大、已充分發(fā)育，果色較淺黃，隨后果實(shí)增大不明顯，僅色澤不斷變化，到8月中下旬呈橙黃色；與之不同的是BHi72782成熟期較晚，8月3日采收時(shí)果實(shí)較小，未充分發(fā)育，果色為青黃色，隨后果實(shí)不斷變大，果色不斷變黃。

3 小結(jié)

沙棘油是一種健康型高級(jí)食用保健油，是天然的活性因子寶庫(kù)[18-21]，但價(jià)格昂貴，國(guó)際市場(chǎng)需求缺口大。沙棘種子和果肉的含油量均不高，其提高含油量的遺傳改良是沙棘選育的主攻目標(biāo)之一。BHi727115半家系種群干果肉含油量的研究表明，自由授粉的半家系不同個(gè)體之間干果肉含油量存在明顯差異，且含油量最高的編號(hào)為51的個(gè)體可以作為潛在優(yōu)良無(wú)性系，為高油型沙棘育種提供理想材料。BHi72782和BHi72715這2個(gè)不同品種果實(shí)不同成熟期的干果肉含油量研究結(jié)果表明，果實(shí)成熟后即為最佳采收期，等到冬季收獲則會(huì)降低干果肉的含油量，這可為果實(shí)的采摘與收獲時(shí)間提供參考。

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