魏永義　王玉堃?。ㄉ綎|迅達(dá)康獸藥有限公司　山東 濟(jì)南　250306）

中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞傳染性支氣管炎的防治作用

魏永義王玉堃（山東迅達(dá)康獸藥有限公司山東 濟(jì)南250306）

為驗(yàn)證中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞感染傳染性支氣管炎的防治作用，分別進(jìn)行了2個(gè)試驗(yàn)；預(yù)防試驗(yàn)中預(yù)防組攻毒前給予中獸藥“優(yōu)凈”進(jìn)行保護(hù)，然后進(jìn)行攻毒，考察其對(duì)雞血清IFN-γ的作用；治療試驗(yàn)中，把患病雞分為3組，一組空白對(duì)照，一組藥物對(duì)照，一組用“優(yōu)凈”治療，考察治療效果；結(jié)果表明，優(yōu)凈有提高雞血清IFN-γ的作用，治療病雞并降低死亡率的作用；因此，中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞傳染性支氣管炎具有預(yù)防和治療作用。

雞傳染性支氣管炎防治“優(yōu)凈”中獸藥

雞傳染性支氣管炎(IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的一種急性、高度接觸性呼吸道傳染病[1]。傳染性支氣管炎病毒主要損傷雛雞的呼吸道、泌尿生殖系統(tǒng)和消化系統(tǒng)，引起不同程度的死亡，給養(yǎng)雞業(yè)帶來巨大的損失[2]。感染IBV-M41雞體中的大多數(shù)CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞均可分泌II型IFN(IFN-γ)，而IFN-γ通過誘發(fā)Th1細(xì)胞的免疫反應(yīng)，可以對(duì)雞體的細(xì)菌感染及病毒感染起到保護(hù)作用。因此，IFN-γ在人工感染雛雞血清中的變化反應(yīng)了雞體抗病毒的作用機(jī)制，可為研究機(jī)體對(duì)病毒感染的免疫反應(yīng)提供參考[3]。

中獸藥“優(yōu)凈”是由黃連、黃芪、板藍(lán)根、大青葉組成的中藥復(fù)方制劑。具有無毒副作用、無耐藥性、無殘留的獨(dú)特優(yōu)勢，有利于減少或杜絕抗病毒化學(xué)藥物的使用，提高動(dòng)物機(jī)體的抗病力和抵抗力[4-5]，促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展。明顯提升畜禽產(chǎn)品的品質(zhì)，保證食品質(zhì)量安全。本文通過對(duì)感染傳染性支氣管炎病毒的雞群進(jìn)行治療，進(jìn)一步確定該方劑治療病毒性疾病的效果。

1　試驗(yàn)材料

1.1試驗(yàn)藥物中獸藥“優(yōu)凈”由本課題組提供；雙黃連口服液，合肥中龍神力動(dòng)物藥業(yè)有限公司；青霉素、鏈霉素，由本課題組化驗(yàn)室提供。

1.2治療用試驗(yàn)雞濱州某養(yǎng)雞場的雛雞，10～15日齡發(fā)病，經(jīng)獸醫(yī)院獸醫(yī)診斷，確診為雞傳染性支氣管炎。

1.3病毒株傳染性支氣管炎病毒(IBV)標(biāo)準(zhǔn)毒株M41，由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所提供(臨床分離并鑒定的野毒株)。

1.4預(yù)防用試驗(yàn)雞供試雞為1d無IB抗體的健康海蘭褐雛雞，購自山東省農(nóng)科院家禽研究所試驗(yàn)場。

1.5SPF雞胚購自青島易邦生物工程有限公司。

1.6飼料雛雞全價(jià)配合飼料，由山東省農(nóng)業(yè)科院家禽研究所飼料添加劑廠提供。

1.7試驗(yàn)儀器及試劑主要儀器有離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)。雞IFN-γ試劑盒為美國R＆D公司產(chǎn)品

2　人工感染的預(yù)防試驗(yàn)

2.1分組及人工感染情況試驗(yàn)用雞購自非IB免疫1日齡雞群，雛雞飼養(yǎng)于已消毒的雞舍里，攻毒前，對(duì)雞群進(jìn)行編號(hào)，并隨機(jī)分為4組，每組60只。第1組：健康對(duì)照組，不攻毒、不給藥，隔離飼養(yǎng)。第2組：陽性對(duì)照組，攻毒后不喂任何藥物，隔離飼養(yǎng)。第3組：藥物對(duì)照組，于攻毒前5d，將雙黃連口服液加入水中進(jìn)行混飲給藥。第4組：“優(yōu)凈”預(yù)防組，于攻毒前5d，將中獸藥“優(yōu)凈”加入水中進(jìn)行混飲給藥。在試驗(yàn)期間，各組自由采食和飲水，但所用的飲用水、飼料、用具要嚴(yán)格分開，避免交叉污染。

2.2IBV種毒復(fù)壯及感染液制備IBV種毒標(biāo)準(zhǔn)株M41 (EID5010-7.0/ml)使用前用雞胚復(fù)壯，種毒按1:1000稀釋，經(jīng)尿囊腔接種于10日齡SPF雞胚，每胚0.1ml。37℃培養(yǎng)38h，收集雞胚尿囊液，加入青霉素1000IU/ml、鏈霉素1mg/ml，以2000r/min離心15min，取上清液作為病毒感染液備用[6]。

2.3臨床試驗(yàn)雛雞飼養(yǎng)至14及19日齡時(shí)，分別給藥及攻毒，每只雞用傳染性支氣管炎病毒液滴鼻和點(diǎn)眼，余下劑量腿肌注射。接種病毒后常規(guī)隔離飼養(yǎng)，并進(jìn)行觀察及后續(xù)試驗(yàn)。每組選取10只分別在21、25、29日齡進(jìn)行采血，采血量為10ml/只，血液4℃過夜，2500r/min離心15min，分離血清。用IFN-γ試劑盒測定血清中IFN-γ的吸光度，并計(jì)算其濃度(pg/ml)，用SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析。

2.4試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)中陽性對(duì)照組在攻毒48h后絕大部分雞出現(xiàn)明顯的咳嗽，部分雞出現(xiàn)羅音、呼吸困難等癥狀，病雞精神沉郁，食欲減少，對(duì)死亡雞只進(jìn)行剖檢，出現(xiàn)雞傳染性支氣管炎典型病理變化，說明攻毒成功。試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1　“優(yōu)凈”對(duì)雞人工感染M41雛雞血清中IFN-γ的作用

2.5試驗(yàn)結(jié)論中獸藥“優(yōu)凈”能顯著提高雛雞血清中IFN-γ濃度，因此具有預(yù)防雞感染傳染性支氣管炎的作用。

3　中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞群感染支氣管炎的治療作用

3.1試驗(yàn)分組雞舍共3500只雛雞，19～21日齡開始發(fā)病，死亡107只，將剩余的3393只發(fā)病雞分為3組，第1組393只，不給任何藥物，作為空白對(duì)照組；第2組1500只，給予病毒靈，作為陽性藥對(duì)照組；第3組1500只，給予中獸藥“優(yōu)凈”。

3.2給藥方法第1組：不給藥，不做任何處理；第2組：雙黃連口服液，飲水給藥，連續(xù)7d；第3組：中獸藥“優(yōu)凈”，飲水給藥，連續(xù)7d。

3.3考察項(xiàng)目（1）觀察各組試驗(yàn)雞發(fā)病情況，臨床癥狀、死亡數(shù)量等。（2）每組選取10只分別在用藥后第1天，第5天，第7天進(jìn)行采血，采血量為10ml/只，血液4℃過夜，2500r/min離心15min，分離血清。用IFN-γ試劑盒測定血清中IFN-γ的吸光度，并計(jì)算其濃度(pg/ml)，用SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析。

3.4治療效果的判斷治愈率：試驗(yàn)期間，治療組病雞經(jīng)給藥后精神狀態(tài)、食欲恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)臨床癥狀者均判定為治愈，以此計(jì)算治愈率。治愈率=治療后剩余雞數(shù)量/該組試驗(yàn)雞總數(shù)×100%。

3.5試驗(yàn)結(jié)果中獸藥“優(yōu)凈”治療后的第3天，病雞的精神狀況有了明顯好轉(zhuǎn)，癥狀基本消失，病死雞數(shù)目有了大幅度降低，治療7d后雞舍中雞的死亡率接近正常死亡率，而陽性藥對(duì)照組仍有較高的病死率，試驗(yàn)結(jié)果見表2、3。

表2　中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞傳染性支氣管炎的治療效果

表3　“優(yōu)凈”對(duì)患病雛雞血清中IFN-γ的作用

3.6結(jié)論通過治療試驗(yàn)可得，中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞傳染性支氣管炎有明顯的治療效果；通過“優(yōu)凈”對(duì)患病雛雞血清中IFN-γ作用的試驗(yàn)可得，中獸藥“優(yōu)凈”能明顯提高雞血清中的IFN-γ水平，增加機(jī)體的免疫力，從而起到治療雞傳染性支氣管炎的作用。

4　總結(jié)

通過試驗(yàn)可得，中獸藥“優(yōu)凈”對(duì)雞傳染性支氣管炎有明顯的預(yù)防與治療作用，中獸藥“優(yōu)凈”主要由黃連、黃芪、板藍(lán)根、大青葉組成，具有清熱解毒，補(bǔ)氣固表，涼血利咽等功效，用于防治雞傳染性支氣管炎符合本方的藥理作用。同時(shí)，中藥的綠色、無公害、無殘留等特點(diǎn)，將其推廣為家禽用抗病毒制劑，能減少抗生素的使用，降低了動(dòng)物源性食品中抗生素殘留，符合食品安全的要求，更能促進(jìn)人們的身心健康。

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