謝文梅，蘇永騰，錢英，黃萃茹

（江蘇奧邁生物科技有限公司，江蘇南京211226）

2016年1—6月飼料及原料霉菌毒素分析報告

謝文梅，蘇永騰，錢英，黃萃茹

（江蘇奧邁生物科技有限公司，江蘇南京211226）

近期梅雨天氣，霉菌毒素污染問題日趨嚴(yán)重，對于廣大行業(yè)同仁來說，及時認(rèn)知霉菌毒素的存在狀況及危害是非常有意義的。江蘇奧邁實(shí)驗分析中心對2016年1—6月所測霉菌毒素的含量進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明：與2015年下半年相比，黃曲霉毒素B1污染趨勢變化不大，嘔吐毒素污染加重；玉米副產(chǎn)物的玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素含量超標(biāo)嚴(yán)重；小麥、次粉等副產(chǎn)物主要污染物為嘔吐毒素。

飼料；黃曲霉毒素B1；玉米赤霉烯酮；嘔吐毒素

霉菌毒素是動物及人類食品安全的重要威脅因素，是飼料質(zhì)量管理的著重關(guān)注點(diǎn)。全球氣候變暖，加上不完備的倉儲條件，加劇了霉菌毒素的污染程度，并導(dǎo)致各地區(qū)不同時段的霉菌毒素污染情況也都各不相同。霉菌毒素的污染對畜禽業(yè)和飼料工業(yè)發(fā)展的危害已是不容忽視的問題。因此，江蘇奧邁實(shí)驗分析中心對2016年1—6月飼料及原料樣本霉菌毒素檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，并形成報告，為同仁提供參考。

1 樣品概述

2016年1—6月，江蘇奧邁實(shí)驗分析中心共收到來自江蘇、江西、河南、安徽、浙江、四川、北京、山東、河北、上海等地區(qū)的樣品464份（表1），并對這464份樣品分別進(jìn)行了黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素的檢測。3種霉菌毒素的最高限量詳見表2。

表1 2016年1—6月檢測樣本數(shù)量份

表2 飼料中霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)（參考國標(biāo)）μg/kg

2 檢測方法

飼料霉菌毒素檢測一般有采樣、分樣、提取、純化、濃縮、進(jìn)行分析等步驟，霉菌毒素存在不均勻性與動態(tài)性，且霉菌毒素的存在基于“μg/kg”的水平上，所以取樣環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差最大，占總誤差的88%。江蘇奧邁實(shí)驗分析中心采用四分法取樣，先將樣品全部粉碎，過篩，混合均勻后，四等分，取對角兩份，再混合后，重復(fù)以上步驟，直到檢測用量即可。樣品采用ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行霉菌毒素檢測。不同的毒素檢測試劑盒檢測對應(yīng)的毒素。

為了得到最佳的檢測結(jié)果，江蘇奧邁實(shí)驗分析中心還對不同廠家的試劑盒進(jìn)行對比、篩選，并將試劑盒所測得結(jié)果與高效液相色譜法（HPLC）結(jié)果進(jìn)行比對，選出了最合適的試劑盒。ELISA試劑盒采用固相直接競爭性酶聯(lián)免疫原理。在包被有相應(yīng)毒素抗體的微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或經(jīng)提取溶液處理過的樣品以及酶標(biāo)物，標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的毒素與毒素偶聯(lián)物競爭抗體，洗去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，TMB底物顯色，加入終止液后用酶標(biāo)儀在450 nm波長下進(jìn)行檢測。本試劑盒各霉菌毒素的檢測限為：黃曲霉毒素B1（AFB1）：0.2 μg/kg，玉米赤霉烯酮（ZEN）：20 μg/kg，嘔吐毒素（DON）：200 μg/kg。

3 檢測結(jié)果

3.1 樣品總體情況

從送檢樣品來看，黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素這3種毒素污染都很嚴(yán)重。樣品霉菌毒素的總體檢測情況見表3和圖1。飼料及原料中的3種毒素陽性檢出率均高于90%，檢出率非常高，尤其是嘔吐毒素達(dá)到100%，玉米和小麥的黃曲霉毒素B1檢出率相對于其他原料來說較低，小麥的玉米赤霉烯酮檢出率較低，其余原料的多種毒素共存現(xiàn)象十分普遍。

從3種毒素的絕對值來看，黃曲霉毒素B1最高值為21.17 μg/kg，陽性樣品中值（表示陽性樣品中50%樣品毒素含量低于該數(shù)值，50%樣品高于該數(shù)值）為4.04 μg/kg，均低于最高限量，污染程度輕微；玉米赤霉烯酮最高值1 048.67 μg/kg，高于最高限量，中值較低，整體來說，污染程度中等，但局部地區(qū)或部分原料污染嚴(yán)重；嘔吐毒素最高值為11 028.93 μg/kg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超標(biāo)，樣品中值為987.06 μg/kg，中值接近最高限量，污染程度高，局部地區(qū)或部分原料污染十分嚴(yán)重。

表3 飼料及原料霉菌毒素檢測結(jié)果

圖1 飼料及原料霉菌毒素的陽性檢出率

3.2 玉米樣品檢測結(jié)果

由表4可知，玉米的黃曲霉毒素B1的檢出率為78.72%，且沒有樣品超標(biāo)，陽性樣品中值為4.43 μg/kg，污染不嚴(yán)重；玉米的玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的陽性檢出率都為100%，污染范圍廣，而陽性樣品中值分別為76.01、718.04 μg/kg，均在飼料標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)，污染程度不高；玉米的嘔吐毒素超標(biāo)率為28.72%，污染嚴(yán)重。

表4 玉米霉菌毒素檢測結(jié)果

3.3 玉米副產(chǎn)物樣品檢測結(jié)果

由表5可知，玉米副產(chǎn)物的3種毒素陽性檢出率都為100%，3種毒素共同存在，污染面廣；相對于其他原料，玉米副產(chǎn)物3種毒素陽性樣品中值都比較高，分別為9.26、205.37、2 060.02 μg/kg；嘔吐毒素超標(biāo)率高達(dá)81.94%，最高含量達(dá)6 044.74 μg/kg，污染十分嚴(yán)重；玉米赤霉烯酮超標(biāo)率低，超標(biāo)樣品來源于2份國產(chǎn)DDGS（谷物干酒精糟）和2份玉米蛋白粉，最高含量達(dá)1 048.67 μg/kg，來源于玉米蛋白粉。

3.4 小麥及其副產(chǎn)物樣品檢測結(jié)果

由表6可知，小麥及其副產(chǎn)物的黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的陽性檢出率分別為70.77%、84.62%，超標(biāo)率為0，該兩種毒素的陽性樣品中值和最高值也在最高限量之內(nèi)，污染不嚴(yán)重；小麥及其副產(chǎn)物的嘔吐毒素陽性檢出率為100%，超標(biāo)率達(dá)73.85%，陽性樣品中值2 113.34 μg/kg，高于最高限量，污染非常嚴(yán)重，最高值11 028.93 μg/kg，來源于1份次粉樣品。

表5 玉米副產(chǎn)物霉菌毒素檢測結(jié)果

表6 小麥及其副產(chǎn)物霉菌毒素檢測結(jié)果

3.5 餅粕類樣品檢測結(jié)果

由表7可知，餅粕類原料3種毒素污染均不嚴(yán)重；黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的陽性樣品中值分別為5.41、69.93、409.14 μg/kg，低于最高限量；3種毒素檢出率均為100%，污染面廣，但超標(biāo)率不高、污染程度低；玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素最高值都來源于米糠粕樣品。

表7 餅粕類霉菌毒素檢測結(jié)果

3.6 配合飼料樣品檢測結(jié)果

配合飼料共191份（表8），所有樣品均檢測出3種毒素，嘔吐毒素超標(biāo)率達(dá)42.93%，接近一半比例的配合飼料嘔吐毒素超標(biāo)；配合飼料的黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮毒素陽性樣品中值分別為3.73、105.89 μg/kg，處于一個低污染的狀態(tài)；嘔吐毒素陽性樣品中值為917.51 μg/kg，接近最高限量，污染嚴(yán)重。

表8 配合飼料霉菌毒素檢測結(jié)果

3.7 2016年上半年與2015年下半年樣品檢測結(jié)果對比

從2016年上半年的飼料及原料霉菌毒素的平均值（圖2、圖3、圖4）來看，與其他原料相比，玉米副產(chǎn)物的黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素污染均比較嚴(yán)重，但黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的平均值沒有超標(biāo)；小麥及其副產(chǎn)物的嘔吐毒素的平均值超過2 000 μg/kg，其余毒素污染不嚴(yán)重；餅粕類原料更容易受到黃曲霉毒素B1的污染，玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素污染不嚴(yán)重；玉米樣品黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的平均值均未超過國家最高限量，污染程度中等。

從污染趨勢來看，從2015年下半年到2016年上半年，玉米副產(chǎn)物和餅粕類黃曲霉毒素B1平均值升高，污染加重，其余原料污染降低；玉米赤霉烯酮毒素飼料和原料都有下降趨勢，但筆者發(fā)現(xiàn)2016年5—6月玉米赤霉烯酮局部地區(qū)污染有加重趨勢，尤其是玉米副產(chǎn)物、餅粕和配合飼料；玉米副產(chǎn)物、小麥及其副產(chǎn)物的嘔吐毒素平均值明顯升高，玉米嘔吐毒素與2015年下半年持平，其余變化不大；飼料及原料的黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮毒素平均值含量下降，而嘔吐毒素平均值含量上升，表明嘔吐毒素污染有加重趨勢。

圖2 2015年下半年與2016年上半年飼料及原料黃曲霉毒素B1平均值對比

圖3 2015年下半年與2016年上半年飼料及原料玉米赤霉烯酮平均值對比

圖4 2015年下半年與2016年上半年飼料及原料嘔吐毒素平均值對比

4 概況與結(jié)論

我國東西地域遼闊，南北氣候差異明顯，取樣環(huán)節(jié)存在無法克服的誤差，僅464份樣品不足以代表全國飼料及原料霉菌毒素污染的真實(shí)情況，本文所有數(shù)據(jù)僅供大家參考。

飼料霉菌毒素檢測有其特殊性和復(fù)雜性，這跟毒素自身的結(jié)構(gòu)特性與存在特點(diǎn)相關(guān)。一般飼料企業(yè)大宗谷物原料或谷物副產(chǎn)品原料采購、入庫時批量大，而毒素含量分布很不均勻，主要在破口處、堆積不通風(fēng)處、雨淋處；其次，谷物原料來源復(fù)雜，來自眾多農(nóng)戶，品種與產(chǎn)地不明，導(dǎo)致霉菌毒素檢測無代表性；再次，霉菌毒素檢測時原始基質(zhì)干擾因素多，如蛋白質(zhì)、脂肪、色素、酚、酸、酯分子的干擾等。

霉菌毒素的檢測分為3個步驟，取樣、制樣和分析。且88%的誤差來源于取樣，制樣和分析的誤差僅占12%，所以取樣環(huán)節(jié)對檢測起著至關(guān)重要的作用，增加取樣量以及科學(xué)取樣方式可以提高檢測結(jié)果的可靠性。霉菌毒素的檢測初篩可以通過酶聯(lián)免疫法檢測，對陽性可疑樣品則用液相色譜法進(jìn)行確認(rèn)，可增加檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

從上述結(jié)果可以看出，2016年上半年飼料霉菌毒素污染十分普遍，黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮污染程度不高，嘔吐毒素的超標(biāo)率和檢出率都非常高，污染十分嚴(yán)重，與2015年下半年相比，嘔吐毒素仍然有加重趨勢，需要持續(xù)監(jiān)控。嘔吐毒素由禾谷鐮刀菌產(chǎn)生，農(nóng)作物的田間生長、飼料加工儲藏過程以及環(huán)境的不斷變化會引起霉菌的滋生，進(jìn)而代謝出大量的霉菌毒素。

所有樣品中，玉米副產(chǎn)物3種毒素污染相對嚴(yán)重；小麥及其副產(chǎn)物主要污染物為嘔吐毒素；餅粕類整體污染不嚴(yán)重；玉米及配合飼料樣品的嘔吐毒素污染嚴(yán)重。原料霉菌毒素污染，則會直接影響飼料樣品的毒素含量，故需加強(qiáng)對原料的監(jiān)控及檢測力度。

因此，定期對飼料、原料進(jìn)行霉菌毒素檢測很有必要，并可采取相應(yīng)措施，如在飼料中添加霉菌毒素吸附劑等，從而減少霉菌毒素造成的損失。

（編輯：郭玉翠）

S816

A

1002-1957(2016)04-0017-03

2016-07-05

謝文梅（1991-），女，江蘇南京人，碩士，研究方向為飼料資源開發(fā)與高效應(yīng)用.E-mail：673361925@qq.com