韓如政 駱小年 韓雨哲 劉宗英 徐浩然 蔣湘輝

(1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院，遼陽111000；2.大連海洋大學(xué)，水產(chǎn)與生命學(xué)院，大連116023)

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北方須鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量

韓如政1駱小年1韓雨哲2*劉宗英1徐浩然1蔣湘輝1

(1.遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院，遼陽111000；2.大連海洋大學(xué)，水產(chǎn)與生命學(xué)院，大連116023)

為確定北方須鰍幼魚對飼料蛋白質(zhì)的需求量，進(jìn)行了為期60 d的生長試驗(yàn)。以魚粉、發(fā)酵豆粕和酪蛋白作為蛋白質(zhì)源，設(shè)計(jì)了蛋白質(zhì)水平分別為22.85%、31.09%、40.72%、47.21%和54.08%的5種等脂等能試驗(yàn)飼料。每種飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)平均體重為(0.77±0.02) g的北方須鰍幼魚40尾，以重復(fù)為單位養(yǎng)殖于水體為80 cm×50 cm×20 cm的水槽中。結(jié)果表明：飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%～40.72%時(shí)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高，增重率和特定生長率顯著升高(P<0.05)；再繼續(xù)升高飼料蛋白質(zhì)水平，增重率和特定生長率反而顯著降低(P<0.05)。在飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%～40.72%時(shí)，飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高呈升高趨勢；當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平為40.72%～54.08%時(shí)，飼料轉(zhuǎn)化率和存活率隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高呈下降趨勢。在飼料蛋白質(zhì)水平為40.72%時(shí)，試驗(yàn)魚獲得最高的增重率、特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率。飼料蛋白質(zhì)水平對北方須鰍幼魚的肥滿度、臟體比、肝體比以及全魚粗蛋白質(zhì)和水分含量均未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。飼料蛋白質(zhì)水平高于40.72%后，全魚粗脂肪含量顯著降低(P<0.05)，并且飼料蛋白質(zhì)水平為31.09%～54.08%時(shí)全魚粗脂肪含量隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高而下降。由增重率與飼料蛋白質(zhì)水平建立二次回歸方程，得出北方須鰍幼魚達(dá)到最大生長速度時(shí)的飼料蛋白質(zhì)需求量為41.57%。

北方須鰍幼魚；生長；蛋白質(zhì)；需求量

北方須鰍(Barbatulabarbatulanuda)又名北方條鰍、花泥鰍，屬鯉形目，鰍科，條鰍亞科，須鰍屬，是一種雜食性淡水魚類，在東北地區(qū)分布于黑龍江中上游、鴨綠江、遼河等水域中[1]。因其蛋白質(zhì)含量高且肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美等特點(diǎn)而深受群眾喜食，價(jià)格也高于其他品種的泥鰍1倍多，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前，北方須鰍的市場供應(yīng)只依靠天然捕撈，由于過量捕撈及棲息場所環(huán)境的惡化，其天然資源銳減，無法滿足市場需求，因而人工養(yǎng)殖北方須鰍尤為迫切。鑒于此，遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院對北方須鰍進(jìn)行了人工繁殖并獲得成功，為該魚進(jìn)行規(guī)?；斯ゐB(yǎng)殖奠定了基礎(chǔ)。

要對北方須鰍進(jìn)行人工養(yǎng)殖，就必須提供優(yōu)質(zhì)的人工配合飼料，但目前有關(guān)北方須鰍營養(yǎng)需求量的研究尚未見報(bào)道。北方須鰍是剛從野生轉(zhuǎn)為人工養(yǎng)殖的一個(gè)品種，因此，有關(guān)其各種營養(yǎng)素需求量的研究均有待進(jìn)行，其中最重要的便是蛋白質(zhì)需求量的研究。蛋白質(zhì)是決定魚類生長的關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)之一，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平達(dá)到需求量時(shí)，魚類可達(dá)到最高生長速度；當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平不足時(shí)，則魚類生長速度緩慢且飼料轉(zhuǎn)化率低；而當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平過高時(shí)，會增加魚類氮代謝負(fù)荷，使其生長速度和飼料蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率降低[2]。因此，確定北方須鰍的飼料蛋白質(zhì)需求量對其營養(yǎng)學(xué)研究和人工養(yǎng)殖均具有重要的理論和實(shí)用意義。本試驗(yàn)采用不同蛋白質(zhì)水平的等脂等能飼料飼喂北方須鰍幼魚，研究其獲得最大生長速度時(shí)的飼料蛋白質(zhì)需求量，為開發(fā)北方須鰍人工配合飼料提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉(超級蒸汽魚粉，秘魯)、發(fā)酵豆粕(青島根源生物集團(tuán))和酪蛋白(上海生工生物工程股份有限公司)為蛋白質(zhì)源，大豆油為主要脂肪源，配制蛋白質(zhì)水平分別為22.85%、31.09%、40.72%、47.21%和54.08%的5種等脂等能試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。各飼料原料均經(jīng)粉碎過80目篩，用小型絞肉機(jī)制粒后置于陰涼處陰干，然后破碎分篩，制成粒徑為0.3～1.2 mm破碎飼料(隨試驗(yàn)魚的生長而調(diào)整飼料粒徑)，分裝后置于陰涼干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼料提供Mineral premix provided the following per kg of diets：NaCl 3 000 mg，MgSO4·7H2O 5 782 mg，F(xiàn)eSO4·7H2O 1 000 mg，ZnSO4·7H2O 150 mg，MnSO4·4H2O 50.3 mg，CuSO4·5H2O 15 mg，CoCl2·6H2O 1.2 mg，KI 1.5 mg。

2)維生素預(yù)混料為每千克飼料提供Vitamin premix provided the following per kg of diets：VB120 mg，VB220 mg，VB630 mg，泛酸鈣 Ca-pantothenate 50 mg，煙酸 nicotinic acid 80 mg，VA 7 000 IU，VD32 000 IU，VE 50 mg，VK310 mg，葉酸 folic acid 6 mg，VB120.1 mg，生物素biotin 1 mg，肌醇 inositol 80 mg，VC 100 mg。

3)無氮浸出物=100-(水分+粗蛋白質(zhì)+粗脂肪+粗纖維+粗灰分) Nitrogen free extract=100-(moisture+crude protein+crude lipid+crude fiber+ash)。

1.2 試驗(yàn)魚及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用北方須鰍幼魚是遼寧省淡水水產(chǎn)研究院自行繁殖的幼魚，取回后先馴養(yǎng)2周，期間投喂各組試驗(yàn)飼料的混合料。試驗(yàn)開始時(shí)將馴養(yǎng)的北方須鰍幼魚禁食24 h后，選擇體質(zhì)健壯、規(guī)格一致的個(gè)體隨機(jī)分配到15個(gè)水槽中，水體體積為80 cm×50 cm×20 cm，每個(gè)水槽放養(yǎng)40尾，平均體重為(0.77±0.02) g。每種試驗(yàn)飼料投喂3個(gè)水槽(重復(fù))。每日投喂2次(10:00和18:00)，日投喂量接近魚體體重的3%，根據(jù)攝食情況做相應(yīng)調(diào)整。投喂時(shí)在1 h內(nèi)分多次投喂，以15 min內(nèi)食完為宜，殘餌吸出并晾干稱重。試驗(yàn)水槽24 h充氣，水源為晾曬48 h的深井水，日換水量為全量的2/3，并吸出糞便。飼養(yǎng)期為60 d，試驗(yàn)期間用加熱棒控制水溫，水溫為(20.0±1.0) ℃，溶解氧濃度大于6 mg/L，pH 7.2±0.5。

1.3 測定指標(biāo)

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，停食24 h，統(tǒng)計(jì)各水槽中剩余試驗(yàn)魚數(shù)量，并計(jì)算存活率；分別測定各水槽中北方須鰍的體重，并計(jì)算增重率、飼料轉(zhuǎn)化效率和特定生長率。計(jì)算公式如下：

增重率(%)=100×(終末體重-初始體重)/初始體重；

飼料轉(zhuǎn)化效率(%)=100×(終末體重-初始體重)/攝食量；

存活率(%)=100×試驗(yàn)結(jié)束時(shí)試驗(yàn)魚的數(shù)量/初始試驗(yàn)魚的數(shù)量；

特定生長率(%/d)=100×(ln終末體重-ln初始體重)/60。

同時(shí)，在每個(gè)水槽中隨機(jī)取6尾試驗(yàn)魚，測定體長、體重、內(nèi)臟團(tuán)重和肝臟重，根據(jù)公式計(jì)算肥滿度、臟體比和肝體比：

肥滿度(g/cm3)=100×體重/體長3；

臟體比(%)=100×內(nèi)臟團(tuán)重/體重；

肝體比(%)=100×肝臟重/體重。

每個(gè)水槽中再隨機(jī)取16尾試驗(yàn)魚，放于-20 ℃冰箱中保存，用于測定魚體成分。試驗(yàn)飼料和魚體中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和水分含量分別采用凱氏定氮法、索氏抽提法和105 ℃烘箱干燥法測定。試驗(yàn)飼料的粗灰分和粗纖維含量分別按照GB/T 6438—2007和GB/T 6434—94中方法測定，并根據(jù)試驗(yàn)飼料的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分和粗纖維含量計(jì)算無氮浸出物含量。試驗(yàn)飼料的總能值用氧彈測熱儀(HDC 6000自動量熱儀，湖南華德電子有限公司)測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 15.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，當(dāng)組間差異顯著(P<0.05)時(shí)，用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。根據(jù)飼料蛋白質(zhì)水平和試驗(yàn)魚增重率進(jìn)行二次曲線回歸分析，通過回歸方程計(jì)算出北方須鰍幼魚獲得最大生長速度時(shí)的飼料蛋白質(zhì)需求量[3]。

2 結(jié) 果

2.1 飼料蛋白質(zhì)水平對北方須鰍幼魚生長指標(biāo)的影響

經(jīng)過60 d的飼養(yǎng)，各組試驗(yàn)魚的生長指標(biāo)見表2。可以看出，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高，北方須鰍幼魚的生長速度(增重率和特定生長率)先出現(xiàn)顯著升高(P<0.05)，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平為40.72%時(shí)試驗(yàn)魚的生長速度達(dá)到最大，但再繼續(xù)升高飼料蛋白質(zhì)水平，試驗(yàn)魚的生長速度反而顯著下降(P<0.05)。在飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率上也得到了相似的趨勢，即在飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%～40.72%時(shí)，飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高而升高，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平為40.72%～54.08%時(shí)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高，北方須鰍幼魚的飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率均呈下降趨勢。在飼料蛋白質(zhì)水平為40.72%時(shí)，試驗(yàn)魚獲得最高的飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率，分別為74.07%和96.3%，其飼料轉(zhuǎn)化效率與飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%和31.09%時(shí)差異顯著(P<0.05)，其存活率與飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%時(shí)差異顯著(P<0.05)。

試驗(yàn)魚的增重率(y)與飼料蛋白質(zhì)水平(x)符合二次曲線模型，結(jié)果見圖1。由二次回歸方程得出北方須鰍幼魚獲得最大生長速度時(shí)的飼料蛋白質(zhì)需求量為41.57%。

2.2 飼料蛋白質(zhì)水平對北方須鰍幼魚肥滿度、臟體比、肝體比和魚體成分的影響

各組試驗(yàn)魚的肥滿度、臟體比、肝體比及魚體成分分析結(jié)果見表3。可以看出，試驗(yàn)魚的肥滿度、臟體比、肝體比以及全魚水分和粗蛋白質(zhì)含量各組之間均無顯著差異(P>0.05)。但是，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平在22.85%～40.72%時(shí)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高，試驗(yàn)魚的肥滿度和臟體比都有隨之增高的趨勢；當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平超過40.72%時(shí)，則都隨之有所下降。同時(shí)，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平在22.85%～40.72%時(shí)，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高，全魚粗蛋白質(zhì)含量有隨之增高的趨勢；當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平超過40.72%時(shí)，全魚粗蛋白質(zhì)含量保持平穩(wěn)。飼料蛋白質(zhì)水平高于40.72%后，全魚粗脂肪含量顯著降低(P<0.05)，并且飼料蛋白質(zhì)水平為31.09%～54.08%時(shí)全魚粗脂肪含量隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高而下降。

表2 飼料蛋白質(zhì)水平對北方須鰍幼魚生長指標(biāo)的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Values in the same row with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

圖1 飼料蛋白質(zhì)水平與北方須鰍幼魚增重率的關(guān)系

3 討 論

蛋白質(zhì)對魚類的生長、繁殖及健康都起著至關(guān)重要的作用。蛋白質(zhì)還是魚體組成的主要有機(jī)質(zhì)，占魚體干重的65%～75%。飼喂養(yǎng)殖魚類的過程就是一個(gè)蛋白質(zhì)生產(chǎn)和積累的過程。因此，魚類對飼料蛋白質(zhì)需求量的研究在魚類營養(yǎng)與飼料科學(xué)中占重要地位。目前，國內(nèi)外學(xué)者在魚類蛋白質(zhì)需求量的研究方面作了大量工作，研究得出草食性的草魚(Ctenopharyngodonidellus)幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量為41%～43%(占飼料干物質(zhì)百分比)[4]，雜食性的鯉魚(Cyprinuscarpio)幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量為43%～47%(占飼料干物質(zhì)百分比)[5]，肉食性的美洲鰻鱺(Anguillarostrata)幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量為47%(占飼料干物質(zhì)百分比)[6]。本試驗(yàn)得出北方須鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量為41.57%(占飼料百分比)，折算成占飼料干物質(zhì)百分比為46.3%，高于草食性草魚，略低于肉食性的美洲鰻鱺，而與雜食性的鯉魚相近。這表明北方須鰍是一種雜食且偏肉食性的魚類。魚類對飼料蛋白質(zhì)的需求量與魚的品種、規(guī)格及飼料蛋白質(zhì)源等有關(guān)。在其他的研究中發(fā)現(xiàn)，泥鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量占飼料百分比為39.52%[7]，占飼料干物質(zhì)百分比為45.5%[8]，略低于本研究得到的北方須鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)需求量(占飼料百分比為41.57%，占飼料干物質(zhì)百分比為46.3%)，表明北方須鰍雖然與泥鰍同為鰍科魚類，但北方須鰍比泥鰍更偏肉食性。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在飼料蛋白質(zhì)水平為22.85%～54.08%時(shí)，北方須鰍全魚粗蛋白質(zhì)含量為14.13%～14.98%、粗脂肪含量為5.63%～7.48%、水分含量為73.17%～74.56%。而葉文娟等[8]的研究報(bào)道，在飼料蛋白質(zhì)水平為22.82%～51.97%時(shí)，泥鰍全魚粗蛋白質(zhì)含量為14.05%～14.77%、粗脂肪含量為4.07%～4.74%、水分含量為76.50%～77.73%。對比可知，北方須鰍的全魚粗蛋白質(zhì)含量與泥鰍基本一致，但其粗脂肪含量較高，水分含量較低。

表3 飼料蛋白質(zhì)水平對北方須鰍幼魚肥滿度、臟體比、肝體比及魚體成分(濕重基礎(chǔ))的影響

在魚類營養(yǎng)研究中，確定營養(yǎng)需求量大都是根據(jù)劑量-反應(yīng)的數(shù)據(jù)資料而得到的。本試驗(yàn)得到的北方須鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)水平與增重率的關(guān)系符合典型的二次曲線模型，這一規(guī)律在其他魚類中也有類似的報(bào)道[6,9-13]。北方須鰍幼魚的飼料蛋白質(zhì)水平在其需求量以下時(shí)，增重率和特定生長率均隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高而顯著升高，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平高于需求量時(shí)，增重率和特定生長率則隨著飼料蛋白質(zhì)水平的升高而下降，即飼料蛋白質(zhì)水平超過需求量時(shí)會抑制北方須鰍幼魚的生長，這一結(jié)果與其他魚類上的研究結(jié)果[14-16]一致。飼料蛋白質(zhì)水平高于其需求量時(shí)，北方須鰍幼魚全魚粗蛋白質(zhì)含量不再隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高而升高，而飼料轉(zhuǎn)化效率則持續(xù)降低，進(jìn)而影響了魚體蛋白質(zhì)的沉積效率，從而造成了飼料蛋白質(zhì)的浪費(fèi)，這與前人的研究報(bào)道結(jié)果[8，17-18]類似。而飼料蛋白質(zhì)水平為31.09%～54.08%時(shí)，北方須鰍幼魚的全魚粗脂肪含量隨飼料蛋白質(zhì)水平的升高而降低，這與相關(guān)研究結(jié)果[19-22]一致。魚類飼料中的可消化糖類能改善飼料蛋白質(zhì)的利用，減少蛋白質(zhì)的分解供能，從而提高飼料蛋白質(zhì)的利用率。本試驗(yàn)中，蛋白質(zhì)水平為47.21%和54.08%的試驗(yàn)飼料的無氮浸出物含量(分別為16.42%和7.70%)較低是否也是造成這2組飼料蛋白質(zhì)浪費(fèi)的原因之一有待進(jìn)一步研究。此外，有關(guān)北方須鰍飼料的適宜糖類水平也有待進(jìn)一步研究測定，以便將糖類水平調(diào)控在適宜范圍內(nèi)，從而去除糖類可能對蛋白質(zhì)需求量產(chǎn)生的影響。本試驗(yàn)的結(jié)果還表明，在飼料蛋白質(zhì)水平達(dá)到需求量時(shí)，北方須鰍的生長速度達(dá)到最高，同時(shí)飼料轉(zhuǎn)化效率和存活率均表現(xiàn)出最佳水平，這為在實(shí)際生產(chǎn)中配制北方須鰍實(shí)用飼料提供了重要依據(jù)。

4 結(jié) 論

用魚粉、發(fā)酵豆粕和酪蛋白為蛋白質(zhì)源，經(jīng)過60 d飼養(yǎng)試驗(yàn)，由增重率與飼料蛋白質(zhì)水平建立二次回歸方程，得出北方須鰍幼魚達(dá)到最大生長速度時(shí)的飼料蛋白質(zhì)需求量為41.57%。

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*Corresponding author, lecturer, E-mail: hanyuzhe@dlou.edu.cn

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Dietary Protein Requirement ofBarbatulabarbatulanudaJuvenile

HAN Ruzheng1LUO Xiaonian1HAN Yuzhe2*LIU Zongying1XU Haoran1JIANG Xianghui1

(1.FreshwaterFisheriesResearchAcademyofLiaoningProvince,Liaoyang111000,China; 2.CollegeofFisheriesandLifeSciences,DalianOceanUniversity,Dalian116023,China)

A 60-day feeding trial was conducted to investigate the dietary protein requirement ofBarbatulabarbatulanudajuvenile. Fish meal, fermented soybean meal and casein were used as the protein sources to formulate 5 isolipidic and isocaloric experimental diets containing different protein levels of 22.85%, 31.09%, 40.72%, 47.21% and 54.08%, respectively. Triplicate tanks were assigned to each experimental diet, and 40 fish with initial body weight of (0.77±0.02) g were assigned to each tank (water body volume: 80 cm×50 cm×20 cm). The result showed as follows: when dietary protein levels were 22.85% to 40.72%, the weight gain rate (WGR) and special growth rate (SGR) were significantly increased with the dietary protein level increasing (P<0.05), but continued to increase the dietary protein level, the WGR and SGR were significantly decreased (P<0.05). When dietary protein levels were 22.85% to 40.72%, the feed efficiency (FE) and survival rate (SR) showed increase trends with the dietary protein level increasing; when dietary protein levels were 40.72% to 54.08%, the FE and SR showed decrease trends with the dietary protein level increasing. The WGR, SGR FE and SR ofBarbatulabarbatulanudajuvenile reached the maximum values when dietary protein level was 40.72%. Condition factor (CF), viscerosomatic index (VSI), hepatosomatic index (HSI) and the contents of whole body moisture and crude protein were not significantly affected by dietary protein level (P>0.05). The crude lipid content of whole body was significantly decreased when dietary protein level was over 40.72% (P<0.05), it was decreased with the dietary protein level increased from 31.09% to 54.08%. Base on the quadratic regression equation of WGR and dietary protein level, dietary protein requirement ofBarbatulabarbatulanudajuvenile to reach the maximum growth rate is 41.57%.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(12)：3905-3911]

Barbatulabarbatulanudajuvenile; growth; protein; requirement

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.12.023

2016-06-24

遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014020181)

韓如政(1959—)，男，遼寧遼陽人，研究員，本科，研究方向?yàn)轸~類營養(yǎng)與飼料學(xué)。E-mail： 1679731607@qq.com

*通信作者：韓雨哲，講師，碩士生導(dǎo)師，E-mail： hanyuzhe@dlou.edu.cn

S963

A

1006-267X(2016)12-3905-07