李　麗，張　玲，蔣　月，王金莉，李芳兵

（錦州醫(yī)科大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧　錦州　121001）

柴胡提取物栓包合前后對家兔解熱作用的比較

李麗，張玲，蔣月，王金莉，李芳兵

（錦州醫(yī)科大學畜牧獸醫(yī)學院，遼寧錦州121001）

本試驗依據(jù)2015版獸藥典方法制備柴胡提取物的包合物及其栓劑，并對其進行質(zhì)量檢查。并通過酵母菌和牛奶所致的兩種發(fā)熱動物模型，觀察并比較柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓對家兔的解熱作用。家兔18只隨機分為酵母菌致熱組和牛奶致熱組，每個處理分成3個組，分別為空白對照組、柴胡提取物栓組、柴胡提取物包合物栓組，每組3只。結(jié)果表明，包合后的栓劑解熱作用更好且維持時間更久。研究證實，在兩種發(fā)熱模型的解熱方面，包合前后的藥物對酵母菌模型解熱作用均優(yōu)于對牛奶模型的解熱作用。證實包合技術(shù)可提高藥物穩(wěn)定性，延緩釋藥的釋放，提高藥物的生物利用度，在臨床上具有很高的應用價值，因此， -環(huán)糊精包合技術(shù)的研究，在新產(chǎn)品研發(fā)，以及藥劑處方的改進方面具有良好的應用前景。

柴胡提取物；包合技術(shù)；栓劑；解熱作用；家兔

1　材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1藥品柴胡提取物，β-環(huán)糊精（β-CD），半合成脂肪酸酯，牛奶，酵母菌，生理鹽水，液體石蠟，由錦州醫(yī)科大學畜牧獸醫(yī)學院藥學實驗室提供。

1.1.2試驗動物家兔，1.5～2.0 kg，雌雄兼用，由錦州醫(yī)科大學實驗動物中心提供。試驗前適應環(huán)境 3 d，自由飲水，直腸測基礎(chǔ)體溫，取基礎(chǔ)體溫39.0±0.5℃家兔用于試驗。

1.1.3器材燒杯（250 mL、500 mL、1 000 mL）、移液管（1 mL、5 mL、10 mL）、量瓶（10 mL、25 mL、50 mL）、移液槍、量筒、藥匙、洗耳球、玻璃棒、膠頭滴管、鐵架臺、體溫計、容量瓶、燒杯、吸管、鑷子、紫外分光光度計、注射器等，由錦州醫(yī)科大學畜牧獸醫(yī)學院藥學實驗室提供。

1.2試驗方法

1.2.1柴胡提取物的包合物制備及質(zhì)量檢查采用飽和水溶液法制備柴胡提取物β-CD包合物，即稱取β-CD適量，置于燒瓶中，加入相應量的純化水，加熱溶解，制成β-CD飽和溶液，加入柴胡提取物，攪拌后冷卻，過濾，干燥后得柴胡提取物β-CD包合物。

采用紫外可見分光光度法測定藥物的質(zhì)量濃度，考察藥物和包合物的溶解度及光穩(wěn)定性[3]。

1.2.2柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓的制備制備工藝：取柴胡提取物，加6倍量水浸泡20 h，水蒸汽蒸餾，收集揮發(fā)油，密閉保存。蒸餾后，取出藥液，加水煎煮0.5 h，合并藥液，濾過，減壓低溫濃縮干燥，得干浸膏。將干浸膏粉碎，過篩（六號篩），備用。取適量的半合成脂肪酸酯，加熱熔化，保溫50℃，加入干浸膏粉和揮發(fā)油等混合均勻，迅速注入涂有潤滑劑的栓模內(nèi)，冷卻20 min，刮去栓模外多余部分，啟模即得。包合后的柴胡提取物制備工藝同上[4]。

1.2.3柴胡提取物栓包合前后對家兔解熱作用的比較

1.2.3.1牛奶發(fā)熱模型試驗兔稱取體重，測定正常體溫，用牛奶皮下注射，3 mL/kg，分點注射。

1.2.3.2酵母菌發(fā)熱模型試驗兔稱取體重，測定體溫，將酵母菌稀釋后耳緣靜脈注射1 mL/kg[5-7]。

記錄試驗兔體重和標號。分別測肛溫2次，以2次體溫的平均值作為正常溫度，牛奶致熱處理1～3組試驗兔，分別在試驗兔背部皮下分點注射牛奶，3 h后，分別測其發(fā)熱溫度；酵母菌致熱模型組于耳緣靜脈注射酵母菌1.5 h后，測溫度，進行相應的藥物處理，并分別于用藥后1、2、3、4和5 h各測體溫1次，記錄試驗結(jié)果。

1.2.3.3觀測指標觀察試驗兔正常體溫、造模成功兔的體溫和用藥后1～5 h體溫，試驗結(jié)果以體溫降幅均值和標準偏差表示（X±S）。

1.3統(tǒng)計學方法用SPASS13.0軟件單因素方差分析（one way ANOVA）進行差異的比較。P＜0.05，表示有顯著性意義。

2　結(jié)果與分析

2.1柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對牛奶模型的解熱作用試驗結(jié)果見表1。

表l結(jié)果顯示，在家兔牛奶模型試驗，與空白組相比，柴胡提取物栓、柴胡提取物包合物栓均有明顯的解熱作用（P＜0.05），與柴胡提取物包合物栓比較，柴胡提取物栓的解熱作用較弱，差異顯著（P＜0.05）。

2.2柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對酵母菌模型的解熱作用結(jié)果見表2。

表2結(jié)果顯示，在家兔酵母菌模型試驗中，與空白組相比柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓均有明顯的解熱作用（P＜0.05）；柴胡提取物包合物栓的解熱作用強于柴胡提取物栓，差異顯著（P＜0.05）。

2.3柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對兩種發(fā)熱模型的解熱作用結(jié)果見表3。

表l柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對牛奶致熱模型的解熱作用比較（n=3，X±S）Table1　Com parison of the antipyretic effect of Bupleurum extract suppository and Bup leurum extract inclusion com pound suppository induced thermalmodel for m ilk ℃

表2　柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對酵母菌致熱模型的解熱作用比較（n=3，X±S）Table2　Com parison of the antipyretic effect of Bupleurum extract suppository and Bup leurum extract inclusion suppository on yeast induced by thermalmodel ℃

表3　柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對兩種發(fā)熱模型的體溫平均降幅比較Table3　Comparison of the average tem perature drop of two kinds of heating models w ith the inclusion com pound suppository o f the extract o f the root of the root and the root of the root o f the root ℃

表3結(jié)果顯示，柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓在酵母菌致熱模型的解熱方面要優(yōu)于牛奶模型（P＜0.05）。

2.4柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對兩種發(fā)熱模型的解熱趨勢柴胡β-環(huán)糊精包合物栓在制備過程中可有效防止揮發(fā)油的揮發(fā)，提高制劑的穩(wěn)定性，并改善有效成分的溶解性，提高制劑的溶出速率和生物利用度，圖示結(jié)果表明，兩個模型中柴胡提取物包合物栓的解熱作用較柴胡提取物栓快而穩(wěn)定，家兔牛奶發(fā)熱模型中各組解熱趨勢見圖1。家兔酵母菌發(fā)熱模型中各組解熱趨勢見圖2。

3　討論

3.1柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓對發(fā)熱模型的解熱作用牛奶發(fā)熱模型的原理是，注射牛奶后牛奶刺激局部產(chǎn)生強烈的炎癥反應，此炎癥的形成主要與其誘導前列腺素（PG）生物合成及釋放有關(guān)，并激活巨噬細胞，引起發(fā)熱，癥狀與臨床“里熱癥”相似。酵母菌屬真菌類，致熱成分是全菌體及菌體內(nèi)所含的莢膜多糖和蛋白質(zhì)。酵母菌作用于機體可激活內(nèi)生性致熱原（EP）細胞產(chǎn)生和釋放EP，EP作用于丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，引起發(fā)熱介質(zhì)的釋放改變調(diào)定點。制造發(fā)熱模型多選擇大型動物，以保持恒定的體溫。但體型過大的動物操作起來困難，過小動物受外界環(huán)境影響太大，因此多選擇家兔。試驗時外界溫度最好在20℃左右。家兔的選擇，一方面選擇早晚溫度變化小的，棄去孕兔；另一方面應選擇體重、年齡適中的家兔，年齡老的不敏感[8-9]。本試驗選用家兔作為模型動物，注射牛奶和酵母菌后1 h，各注射組家兔體溫都升高，模型組高溫持續(xù)11.5 h，空白對照組體溫沒有升高，說明造模成功。在兩種發(fā)熱模型對比治療試驗中，柴胡提取物包合物栓的解熱作用均強于柴胡提取物栓，且柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓在酵母菌致熱模型的解熱方面要優(yōu)于牛奶模型。

3.2柴胡提取物包合物栓特點用飽和水溶液制備環(huán)糊精包合物具有操作簡單、易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。β-CD包合物可增加難溶性藥物的溶解度，提高藥物的穩(wěn)定性。本試驗研究表明柴胡提取物制成β-CD包合物后再做栓能顯著提高藥物的溶解度和穩(wěn)定性，且有延緩釋藥的作用，從而滿足獸醫(yī)臨床上的需要[10]。因此，研究應用β-CD環(huán)糊精包合技術(shù)，用于研制新產(chǎn)品，改進藥劑處方有著良好的前景。

圖1　柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓對家兔牛奶發(fā)熱模型的解熱作用Fig.1　The antipyretic effect of suppository and extract of Bupleurum Bup leurum extract inclusion suppository in rabbits model of m ilk fever

圖2　柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓對家兔酵母發(fā)熱模型的解熱作用Fig.2　The antipyretic effect of Bup leurum extract suppository and Bupleurum extract inclusion com pound suppository in rabbits yeast fever m odel

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Com parison of the Antipyretic Effect Between Extractof Radix Suppository and β-cyclodextrin Inclusion Suppository in Rabbits

Li Li,Zhang Ling,Jiang Yue,Wang Jinl i,Li Fangbing
(Jinzhou Medical University,LiaoningJinzhou121001）

According to 2015 edition of the Veterinary Pharmacopoeia,the Radix Bupleuri ext ract and Inclusion suppository are prepared in this test,and car ries on the qual ity inspection.By yeast and mi lk caused by two kinds of heat animal model,to observe and compare the ext racts f rom radix bupleuri suppository and radix bupleuri ext raction for suppository of rabbit antipyretic effect.Rabbit 16 were randomly divided into yeast to heat and hot milk group,each process is divided into three groups,respectively,blank control group,the ext racts f rom radix bupleuri group,radix bupleuri ext raction for suppository group,each group 3 only.Resul ts showed that after the inclusion of suppository antipyretic ef fect bet ter and longer time.Research conf irms that in terms of two models of heat antipyretic,before and af ter the inclusion of drug are antipyretic ef fect on yeast model model is bet ter than mi lk.Conf irmed inclusion technology can improve the ef fect of drug stabil ity and delay the drug release,great ly improving the bioavai labi lity of drug,in the clinical appl ication value is very big,therefore,research on application of beta CD cyclodext rin inclusion technique,used in the development of new products,improve drug prescription has a good prospect.

Ext ract of Radix;Inclusion technique;Suppository;Antipyretic ef fect;Rabbit柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或 狹 葉 柴 胡 Bupleurumscorzoneri fol ium Wil ld.的干燥根。其性味苦涼，有疏散退熱、疏肝解郁、升陽舉氣之功效，用于治療寒熱往來，胸滿脅痛等[1-2]。栓劑（Suppository）系指藥物與適宜基質(zhì)制成供腔道給藥的制劑[3]。本研究通過對柴胡提取物栓包合前后對家兔解熱作用的比較試驗，對包合的作用加以研究，以此了解柴胡包合后的栓劑的實用價值，以及包合技術(shù)的廣闊應用前景。

R285

B

1672-9692(2016)04-0044-05

2016-03-07

李麗（1967-），女，黑龍江哈爾濱人，教授，碩士，主要從事主要從事獸醫(yī)藥理毒理與新獸藥研發(fā)方面的研究。

遼寧省科技廳聯(lián)合基金項目（復方β-環(huán)糊精柴胡栓制備及在犬體內(nèi)藥代動力學研究，2013022045）。