李 夢 劉 杰 呂曉娜 李紅霞 楊瑤珺 王文祎

(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京，100102)

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中藥研究

ATR-FTIR技術(shù)在進口血竭摻偽鑒別中的應(yīng)用

李 夢 劉 杰 呂曉娜 李紅霞 楊瑤珺 王文祎

(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京，100102)

目的：利用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)(ATR-FTIR)對進口血竭中的摻偽物質(zhì)進行快速鑒別。方法：根據(jù)進口血竭與松香、達瑪樹脂、國產(chǎn)血竭對照藥材的紅外光譜對比圖來對進口血竭中的摻偽物質(zhì)進行快速鑒別。結(jié)果：27批進口加工血竭中有13批摻入了松香，3批摻入了達瑪樹脂，4批為國產(chǎn)血竭冒充，嚴重影響了進口血竭的質(zhì)量。結(jié)論：傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)操作快速簡便，適合中藥的快速鑒別。

進口血竭；傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)；摻偽物質(zhì)鑒別。

血竭，習(xí)稱“進口血竭”，為棕櫚科植物麒麟竭DaemonoropsdracoBl.果實中滲出的樹脂經(jīng)加工制成[1]。為貴重藥材，具有活血化瘀、消腫止痛、收斂止血、補血等功效。龍血竭，習(xí)稱“國產(chǎn)血竭”，為百合科植物劍葉龍血樹[2]Dracaenacochinensis(Lour)S.C.Chen含脂木材經(jīng)提取得到的樹脂，其功效與進口血竭相似。進口血竭價格昂貴，與國產(chǎn)血竭價格相差甚遠，均摻偽嚴重。本實驗應(yīng)用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)(ATR-FTIR)對27批進口血竭中的摻偽物質(zhì)進行鑒別，以實現(xiàn)進口血竭的快速鑒別，并與高效液相色譜法測出的結(jié)果相對比，以使ATR-FTIR鑒定得到的結(jié)果更具有說服力。

1 ATR-FTIR對進口血竭摻偽物質(zhì)鑒別

1.1 儀器及檢測條件 儀器：Thermo Nicolet紅外光譜儀，紅外光譜儀衰減全反射附件，DTGS檢測器，ATR附件檢測范圍：4000～650.0 cm-1，光譜分辨率4 cm-1，掃描信號累加16次。

1.2 樣品及制備 進口血竭樣本27批，編號為J1-J27。國產(chǎn)血竭樣本46批，編號為G1-G46。樣本采集自河北安國、安徽亳州、桂林、哈爾濱、河南等地。將收集好的樣品粉碎，過4號篩，置干燥器中。

圖1 進口血竭的紅外光譜圖

1.3 儀器穩(wěn)定性考察 以國產(chǎn)血竭G1為例。對樣品粉末連續(xù)掃描5次，對所得到的譜圖進行相似度比較，其相關(guān)系數(shù)為0.999 9，結(jié)果表明，儀器具有良好的穩(wěn)定性和精密度。

1.4 樣品重現(xiàn)性考察 以國產(chǎn)血竭G1為例。對樣品粉末重復(fù)掃描5次，對所得到的譜圖進行相似度比較，其相關(guān)系數(shù)為0.998 0～0.999 9，結(jié)果表明，樣品重現(xiàn)性良好，符合實驗要求。

1.5 ATR-FTIR測定 在采集數(shù)據(jù)前，按儀器測試要求將金剛石ATR附件水平放置于FTIR儀的樣品倉中。將上述樣品粉末置于金剛石與校正壓力裝置之間的凹槽內(nèi)，每次所用機械校正壓力保持不變，分別對各樣品進行ATR-FTIR測定。每個樣品測定前均對背景進行掃描。

1.6 數(shù)據(jù)分析 采用OMNIC操作軟件對樣品進行數(shù)據(jù)采集和圖譜預(yù)處理，預(yù)處理包括基線校正和平滑處理。

1.6.1 進口血竭的標準紅外光譜圖 以進口血竭對照藥材為例，掃描紅外光譜，得到進口血竭的標準光譜圖。見圖1。

1.6.2 進口血竭摻偽物質(zhì)鑒別 分別對27批次進口血竭與松香、達瑪樹脂、國產(chǎn)血竭對照藥材用傅里葉-衰減全反射紅外光譜儀進行掃描，得到其紅外光譜圖，通過對比紅外圖譜中的特征峰，可以鑒別進口血竭中是否摻入了松香、達瑪樹脂以及國產(chǎn)血竭。通過對比紅外光譜分析圖，可得到摻偽情況表。見表1。

表1 進口血竭摻偽情況表

2 高效液相色譜法對進口血竭摻偽物質(zhì)鑒別

2.1 儀器與試劑

2.1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀；色譜柱：Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；Sartorious BP110S分析天平(北京賽多利斯儀器有限公司)；KQ5200E超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；銅沖。

2.1.2 試劑 甲醇(Fisher公司，色譜純)；屈臣氏蒸餾水；乙腈(Fisher公司，色譜純)；龍血素A對照品(批號為111660-200402，中國食品藥品檢定研究院)；龍血素B對照品(批號為111558-201006，中國食品藥品檢定研究院)；冰醋酸(分析純)；血竭素高氯酸鹽對照品(批號為110811-201105，中國食品藥品檢定研究院)。

2.2 進口血竭中血竭素含量的測定

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 按2015年版《中華人民共和國藥典》方法中的規(guī)定，填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，乙腈-0.05 mol/L磷酸二氫鈉按50∶50的比例為流動相；以440 nm作為檢測波長；柱溫控制在40 ℃。計算得到的理論板數(shù)按血竭素峰應(yīng)不低于4 000。

2.2.2 血竭素高氯酸鹽對照品溶液的制備 按2015年版《中華人民共和國藥典》方法中的規(guī)定，精密稱取進口血竭的血竭素高氯酸鹽對照品9 mg，放置于50 mL棕色量瓶中，加入3%的磷酸甲醇溶液使之溶解，并稀釋至刻度，待充分搖勻后再精密量取1 mL溶液置5 mL棕色量瓶中，加入甲醇試劑至刻度，搖勻，即得每1 mL中含血竭素26 μg的血竭素高氯酸鹽對照品。

2.2.3 供試品溶液的制備 按2015年版《中華人民共和國藥典》方法中的規(guī)定，取進口血竭樣品適量，研磨成細粉，精密稱取0.05～0.15 g，放置于具塞試管中，再加入精密量取的10 mL 3%磷酸甲醇溶液，密塞后振搖3 min，濾過，精密量取1 mL續(xù)濾液，放置于5 mL棕色量瓶中，加入甲醇試劑至刻度，搖勻，即得。分別精密吸取供試品溶液與對照品溶液各10 μL，將其注入到液相色譜儀，測定，即得。測得的樣品含量如表2所示。

表2 高效液相色譜法測得血竭素含量

3 討論

采用傅里葉-衰減全反射紅外光譜法，得到中紅外光譜圖。1 689.68 cm-1峰、784.53 cm-1峰、891.44 cm-1峰，為松香特征峰，以此來鑒別進口加工血竭；峰1 727.20 cm-1、1 692.36 cm-1、1 231.43 cm-1、783.9 cm-1、714.22 cm-1為達瑪樹脂特征峰，以此來鑒別進口加工血竭的輔料是否為達瑪樹脂；3362.21 cm-1峰為鑒別進口血竭、國產(chǎn)血竭的特征峰。

通過對比進口血竭、國產(chǎn)血竭、松香、達瑪樹脂的中紅外光譜圖，得出樣品J2、J4、J5、J8、J9、J13、J14、J15、J16、J17、J18、J19、J23、J24光譜圖中出現(xiàn)了松香的特征峰，分別為1 689.68 cm-1峰(強峰)、784.53 cm-1峰、891.44 cm-1峰，故此14批樣品中摻入了松香。

樣品J10、J26、J27加入的輔料為達瑪樹脂。因其紅外光譜圖中有達瑪樹脂特征峰1 727.20 cm-1、1 692.36 cm-1、1 231.43 cm-1、783.9 cm-1、714.22 cm-1，因此推斷此3批樣品為加入達瑪樹脂的進口加工血竭。

對比中紅外圖譜還發(fā)現(xiàn)樣品J6、J7、J21、J22，4批進口血竭經(jīng)掃描，得出國產(chǎn)血竭的中紅外光譜圖，該4批樣品實際為國產(chǎn)血竭，而且高效液相色譜法在J6、J7、J21、J22均未檢測出血竭素含量，即表明樣品并非進口加工血竭，傅里葉-衰減全反射紅外光譜法和高效液相色譜法測定的結(jié)果相互印證了結(jié)論的可靠性，能快速鑒定出進口血竭中摻入國產(chǎn)血竭的現(xiàn)象。

從以上結(jié)果可以看出市場上流通的進口血竭摻偽非常嚴重，嚴重影響了血竭質(zhì)量。同時也證明了傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)可以對進口血竭中的摻偽物質(zhì)進行快速鑒別，有一定實際應(yīng)用，值得在中藥領(lǐng)域推廣應(yīng)用。

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(2015-10-06收稿 責任編輯：洪志強)

ATR-FTIR Technique in Identification of Adulteration in Imported Draconis

Li Meng, Liu Jie, Lyu Xiaona, Li Hongxia, Yang Yaojun, Wang Wenyi

(SchoolofChinesePharmacy,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100102,China)

Objective:Fourier transform attenuated total reflection infrared spectroscopy (ATR-FTIR) was applied for a quick identification of adulteration in imported draconis. Methods:The FTIR figures of imported dracosin, darma resin and Chinese dracosin were contrasted to quickly identify the adulteration in all the materials. Results:Rosin was mixed in 13 batches in all the 27 batches of imported draconis, resin in 3 batches and Chinese draconis was substituted in 4 batches. These seriously affected the quality of the imported draconis. Conclusion:Fourier transform attenuated total reflection infrared spectroscopy is easy and convenient for operation and is suitable for quick identification of traditional Chinese medicine (TCM).

Imported draconis; Attenuated total reflection fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR); Adulteration identification

北京中醫(yī)藥大學(xué)“重點學(xué)科”開發(fā)課題(編號：2013-2DXKKF-21)

R282.5

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.10.051