譚好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院 甲乳外科,江蘇 揚(yáng)州,225001)

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Fibulin-2在診斷乳腺基底膜連續(xù)性的準(zhǔn)確性研究

譚好升,章佳新,符德元,祝玉祥

(江蘇省蘇北人民醫(yī)院 甲乳外科,江蘇 揚(yáng)州,225001)

目的 探討Fibulin-2在診斷乳腺基底膜連續(xù)性方面的準(zhǔn)確性。方法 150例乳腺癌患者的標(biāo)本經(jīng)Fibulin-2染色來判斷基底膜的連續(xù)性，并經(jīng)過病理科醫(yī)師進(jìn)行免疫組化診斷，比較兩種方法的診斷結(jié)果。結(jié)果 Fibulin-2在診斷乳腺癌及正常乳腺組織基底膜連續(xù)性方面的準(zhǔn)確度分別為89.3%、92.7%,敏感度為90.4%、98.5%,特異度分別為87.5%、81.3%。結(jié)論 Fibulin-2對乳腺基底膜連續(xù)性的判斷具有很高的準(zhǔn)確性。

乳腺; 基底膜; 連續(xù)性; Fibulin-2

乳腺肌上皮細(xì)胞層的缺失是乳腺癌發(fā)生浸潤的重要標(biāo)志，許多肌上皮細(xì)胞的標(biāo)志物被用來鑒別乳腺癌是否發(fā)生浸潤[1-3]。既往多采用免疫組織化學(xué)法檢測p63、Caponin 等肌上皮細(xì)胞標(biāo)記蛋白和基底膜組分蛋白Ⅳ型膠原蛋白來判斷基底膜是否完整，從而輔助診斷導(dǎo)管內(nèi)原位癌(DCIS)是否伴有微浸潤。由于標(biāo)記物的敏感性、特異性和肌上皮細(xì)胞的不連續(xù)性存在差異，導(dǎo)致該方法診斷DCIS是否伴間質(zhì)微浸潤仍存在大量的不足[4]。本實(shí)驗(yàn)通過檢測乳腺組織中Fibulin-2蛋白來判斷基底膜的完整性，評價其在診斷基底膜完整性中的價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年9月—2015年12月在江蘇省蘇北人民醫(yī)院手術(shù)治療、資料完整的乳腺癌150例，并收集相應(yīng)病例的癌旁毗鄰正常乳腺組織(癌旁組織指距癌灶大于2 cm的組織)。所有病例均經(jīng)病理證實(shí)基底膜是否完整?；颊吣挲g23～85歲，平均46.5歲?；颊叩呐R床病理資料見表1。

1.2 常規(guī)基底膜完整性檢測

所有病例均經(jīng)2名有經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師進(jìn)行基底膜完整性的檢測，包括常規(guī)石蠟切片、基底膜成分檢測(Ⅳ型膠原蛋白、層粘連蛋白)及肌上皮細(xì)胞層檢測(p63)。三者反復(fù)確認(rèn)基底膜的完整性。

1.3 Fibulin-2檢測

應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測Fibulin-2在乳腺組織中的表達(dá)，其完整性的判斷標(biāo)準(zhǔn)為導(dǎo)管周圍有連續(xù)的線狀染色條帶存在，否則為不完整。結(jié)果同樣經(jīng)2名有經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師進(jìn)行判斷。

表1 乳腺癌患者臨床病理資料

1.4 準(zhǔn)確性的計算

以常規(guī)檢測方法的結(jié)果作為比較標(biāo)準(zhǔn)，得出Fibulin-2在判斷基底膜完整性時的真陽性、假陽性、真陰性、假陰性數(shù)，然后計算出Fibulin-2在判斷乳腺癌及正常乳腺組織2組標(biāo)本基底膜完整性的準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。

2 結(jié) 果

作者對Fibulin-2及常規(guī)檢測方法的結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄并比較,Fibulin-2在判斷150例乳腺癌基底膜完整性的結(jié)果為：真陽性85例，假陽性7例，真陰性49例，假陰性9例，陽性預(yù)測值92.4%,陰性預(yù)測值84.5%,敏感度90.4%,特異度87.5%,準(zhǔn)確度89.3%。在150例正常乳腺組織的相應(yīng)結(jié)果為136例、6例、3例、5例、97.8%、86.7%、98.5%、81.3%、92.7%。見表2、圖1。

表2 Fibulin-2與常規(guī)檢測方法對比

圖1 Fibulin-2及常規(guī)檢測方法對基底膜連續(xù)性的判斷

3 討 論

原位癌的主要特點(diǎn)是腫瘤細(xì)胞局限在乳腺中小導(dǎo)管內(nèi)或小葉內(nèi)而沒有突破基底膜。一旦在原位癌周圍的間質(zhì)中見到單個或簇狀的癌細(xì)胞間質(zhì)浸潤就被稱為微浸潤，這種情況常常較難診斷，特別容易漏診和誤診[5]。國外文獻(xiàn)[6]報道在乳腺癌空芯針活檢中由于無法判斷基底膜的完整性，乳腺癌微浸潤的漏診、誤診率可達(dá)38%。這必然又對患者的后續(xù)治療方案產(chǎn)生非常大的影響。這種情況下病理科醫(yī)生往往進(jìn)行腺上皮和肌上皮的雙重染色，其中腺上皮染色可顯示癌細(xì)胞雜亂分布，而肌上皮染色可判斷癌細(xì)胞是否浸潤到了間質(zhì)[7]。因此肌上皮細(xì)胞層的完整性就成了判斷基底膜是否完整(亦即判斷有無浸潤)的一個重要方法。常用的肌上皮細(xì)胞層標(biāo)志物有p63、SMA等。在部分導(dǎo)管內(nèi)原位癌中p63、SMA表現(xiàn)出肌上皮細(xì)胞層的不連續(xù)性甚至部分缺失[8-9],這讓病理科醫(yī)師判斷基底膜是否完整遭遇了巨大挑戰(zhàn)。除了肌上皮細(xì)胞層外，基底膜成分，如Ⅳ型膠原蛋白、層黏連蛋白等，亦可用于判斷基底膜的完整性，但是大量文獻(xiàn)報道這些基底膜成分的表達(dá)有很大的不穩(wěn)定性，在判斷基底膜完整性時很不可靠[10]。

Fibulin-2是Kluge等[11]首先從小鼠成纖維細(xì)胞cDNA庫克隆出來的，主要表達(dá)于血管壁、基底膜等。研究[12-14]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ibulin-2可以與多種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，特別是基底膜成分蛋白相互作用，參與抑癌作用、損傷修復(fù)、細(xì)胞運(yùn)動、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等過程，在維持細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)定和抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤與轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用。本研究發(fā)現(xiàn)Fibulin-2表達(dá)于基底膜周圍，呈連續(xù)性表達(dá)，證明Fibulin-2與基底膜成分相互作用，因此其表達(dá)可用于判斷基底膜的存在。相比于p63等肌上皮細(xì)胞的不連續(xù)性表達(dá)，由于Fibulin-2直接表達(dá)于基底膜周圍，因此其可以作為直接標(biāo)志物來判斷基底膜的完整性，具有很高的可靠性。同時由于Ⅳ型膠原蛋白等基底膜成分往往表達(dá)不穩(wěn)定，在很多時候雖然其表達(dá)缺失但是仍然無法判斷基底膜是否完整，而Fibulin-2卻能夠在絕大多數(shù)基底膜周圍連續(xù)表達(dá)，具有很高的穩(wěn)定性，在判斷基底膜完整性方面具有天然優(yōu)勢。通過與p63、Ⅳ型膠原蛋白等傳統(tǒng)標(biāo)志物的比較，作者發(fā)現(xiàn)Fibulin-2在判斷基底膜完整性方面具有很高的敏感性和特異性，能夠準(zhǔn)確地鑒別出癌細(xì)胞是否有浸潤，特別是原位癌周圍的微小浸潤。因此,Fibulin-2可以作為肌上皮細(xì)胞層標(biāo)志物的有益補(bǔ)充，完全可以用來判斷基底膜是否完整，并可進(jìn)一步鑒別癌細(xì)胞是否有浸潤以協(xié)助臨床醫(yī)生制定患者的后續(xù)治療方案，具有極高的臨床應(yīng)用前景。

[1] Leonard G D,Swain S M. Ductal Carcinoma In Situ,Complexities and Challenges[J]. Journal of the National Cancer Institute,2004,96(12): 906-920.

[2] 連臻強(qiáng),張江宇,王頎,等. 乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌及其微浸潤癌病理和生物學(xué)指標(biāo)表達(dá)差異的臨床意義[J]. 中華乳腺病雜志: 電子版,2011,05(4): 16-19.

[3] Yaziji H,Gown A M,Sneige N. Detection of Stromal Invasion in Breast Cancer: The Myoepithelial Markers[J]. Advances in Anatomic Pathology,2000,7(2): 100-9.

[4] 陳君平. 乳腺導(dǎo)管原位癌伴間質(zhì)內(nèi)微浸潤的免疫組織化學(xué)研究[D]. 安徽醫(yī)科大學(xué),2014.

[5] Modesto A,Gandy C,Mery E,et al. Breast ductal carcinoma in situ with microinvasion: pathological review and clinical implications[J]. Cancer Radiothérapie Journal De La Société Fran aise De Radiothérapie Oncologique,2014,18(2): 107-110.

[6] Wiratkapun C,Patanajareet P,Wibulpholprasert B,et al. Factors associated with upstaging of ductal carcinoma in situ diagnosed by core needle biopsy using imaging guidance[J]. Japanese Journal of Radiology,2011,29(8): 547-553.

[7] 程志姝,趙蒙. SMA/CK雙染技術(shù)在鑒別乳腺疾病中的應(yīng)用[J]. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志,2011(S1).

[8] Alfredo R S,Ramalhol N Z,Sergio B G,et al. Is p63 reliable in detecting microinvasion in ductal carcinoma in situ of the breast？[J]. Pathology & Oncology Research,2003,9(1): 20-23.

[9] Werling R W,Harry H,Hadi Y,et al. Immunohistochemical distinction of invasive from noninvasive breast lesions: a comparative study of p63 versus calponin and smooth muscle myosin heavy chain[J]. American Journal of Surgical Pathology,2003,27(1): 82-90.

[10] Nayar R,Breland C,Bedrossian U,et al. Immunoreactivity of ductal cells with putative myoepithelial markers: A potential pitfall in breast carcinoma[J]. Annals of Diagnostic Pathology,1999,3(3): 165-173.

[11] Kluge M,Mann K,Dziadek M,Timpl R. Characterization of a novel calcium-binding 90-kDa glycoprotein (BM-90) shared by basement membranes and serum[J]. Eur J Biochem,1990,193(3): 651-659.

[12] Baird B N,Schliekelman M J,Young-ho A,et al. Fibulin-2 is a driver of malignant progression in lung adenocarcinoma[J]. Plos One,2013,8(6): 1566-1566.

[13] Zhang H X,W U J,Dong H L,et al. Fibulin-2 deficiency attenuates angiotensin II-induced cardiac hypertrophy by reducing transforming growth factor-β signalling[J]. Clinical Science,2014,126(4): 275-288.

[14] Serra N,Rosales R,Masana L,et al. Simvastatin Increases Fibulin-2 Expression in Human Coronary Artery Smooth Muscle Cells via RhoA/Rho-Kinase Signaling Pathway Inhibition[J]. Plos One,2015,10(7): 121-126.

Accuracy of Fibulin-2 in diagnosis of continuity of breast basement membrane

TAN Haosheng,ZHANG Jiaxin,FU Deyuan,ZHU Yuxiang

(DepartmentofThyroidandBreastSurgery,SubeiPeople′sHospital,Yangzhou,Jiangsu,225001)

Objective To explore the accuracy of Fibulin-2 in the diagnosis of the continuity of the breast basement membrane. Methods The continuity of the basement membrane of 150 patients with breast cancer was determined by Fibulin-2 and the pathological immunohistochemical diagnosis respectively. Diagnosis results were compared between the two groups. Results The diagnostic accuracy of Fibulin-2 in breast cancer and adjacent normal breast tissue was 89.3% and 92.7% respectively. The sensitivity was 90.4% and 98.5%,and the specificity was 87.5% and 81.3% respectively. Conclusion Fibulin-2 has high accuracy in judging the continuity of the breast basement membrane.

breast; basement membrane; continuity; Fibulin-2

2016-03-16

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81172508)

符德元,E-mail: fdyjsyz@163.com

R 655.8

A

1672-2353(2016)21-052-03

10.7619/jcmp.201621016