馬惠珍　鄭輝　陳鋰　冷建杭★

杭州市健康人群血清胃蛋白酶原參考區(qū)間的研究

馬惠珍鄭輝陳鋰?yán)浣ê肌?/p>

目的 探討適合杭州市健康人群及所用測(cè)定方法的血清胃蛋白酶原（PG）Ⅰ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ比值的參考區(qū)間。方法 使用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫法檢測(cè)杭州市1782例健康個(gè)體血清中PGⅠ、PGⅡ水平，計(jì)算PGⅠ/PGⅡ比值，統(tǒng)計(jì)95%參考區(qū)間，比較不同性別和不同年齡段血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ比值的差異。結(jié)果 血清PG檢測(cè)結(jié)果呈偏態(tài)分布，95% 參考區(qū)間分別為：PGⅠ：23.32～112.29μg/L，PGⅡ：≤23.20μg/L，PGⅠ/PGⅡ：≥2.97。不同性別間PGⅠ/PGⅡ比值含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），＞40歲人群的血清PGⅠ、PGⅡ水平顯著高于＜40歲（P＜0.05）。結(jié)論 本資料探討了符合杭州市健康人群的PG參考區(qū)間，為臨床合理應(yīng)用篩查萎縮性胃炎和胃癌提供參考。

胃蛋白酶原 健康 參考區(qū)間 化學(xué)發(fā)光微粒子免疫法

胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）是由胃主細(xì)胞分泌的胃蛋白酶非活性前體，胃蛋白酶原經(jīng)胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶，分為胃蛋白酶原I（PGⅠ）、胃蛋白酶原II（PGⅡ）兩個(gè)亞群［1］。2009年衛(wèi)生部疾控局頒布《中國(guó)癌癥篩查及早診早治技術(shù)方案》中明確將PGⅠ、PGⅡ作為胃鏡前檢查和胃癌篩查的判斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，而參考區(qū)間的建立則是應(yīng)用此篩查指標(biāo)的首要條件［3-4］。由于各地區(qū)實(shí)驗(yàn)室條件的不同，得到的參考區(qū)間可能差異較大，因此，各地區(qū)建立符合本地人群特征的參考區(qū)間對(duì)臨床診療非常重要，本項(xiàng)研究旨在建立杭州市健康人群血清胃蛋白酶原PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ比率的參考區(qū)間，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 2015年1～9月至本院體檢人群，經(jīng)篩選無(wú)精神疾病、胃炎、胃潰瘍、胃惡性腫瘤且實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)顯示血糖、血脂、肝功能及腎功能指標(biāo)均在參考范圍內(nèi)的健康個(gè)體，共1782例，其中男751例，年齡18～82歲，平均年齡（46.26±10.90）歲；女1031例，年齡17～82歲，平均年齡（43.40±10.00）歲。

1.2儀器與主要試劑 使用雅培ARCHITECT i2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)PGⅠ、PGⅡ，試劑為ARCHITECT胃蛋白酶原I（CMIA）和ARCHITECT胃蛋白酶原II試劑（CMIA），試劑更換批號(hào)時(shí)使用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，每次實(shí)驗(yàn)均使用2個(gè)水平的質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

1.3實(shí)驗(yàn)方法 體檢者在標(biāo)本采集前3d避免過度勞累和過度的體育鍛煉，并于早晨空腹抽取靜脈血4ml，標(biāo)本收集于5ml的BD凝膠分離管中，室溫下放置，自然凝固，然后3000r/min離心10 min，分離血清。采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法檢測(cè)血清PGⅠ、PGⅡ水平，并計(jì)算PGⅠ/PGⅡ比率，所有標(biāo)本均在4h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件。采用Kolmogorov-Smimov 統(tǒng)計(jì)量檢驗(yàn)血清PG檢測(cè)數(shù)據(jù)的正態(tài)性分布，偏態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)表示。秩和檢驗(yàn)中兩組間差異分析采用Mann-Whitney U Test，多組間比較采用Kruskal-Wallis Test。采用CLSI和IFCC推薦使用的非參數(shù)統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算95%參考區(qū)間［5］。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1健康人群血清PG濃度的分布 1782例健康體檢人群血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ水平均呈偏態(tài)分布（P＜0.05），中位數(shù)分別為：47.20μg/L、7.40μg/ L和6.41μg/L。

2.2不同性別健康個(gè)體血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/ PGⅡ水平 見表1。

表1　不同性別健康個(gè)體血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ水平（μg/L）

2.3不同年齡組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ水平 見表2、3。

表2　各年齡組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ水平（μg/L）

表3　≤40和＞40歲兩年齡組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ水平（μg/L）

2.4參考范圍的建立 各年齡組PG數(shù)據(jù)的分布為偏態(tài)分布，95%參考區(qū)間不應(yīng)采用百分位數(shù)法，PGⅠ分別以第2.5、97.5 個(gè)百分點(diǎn)為上下限，PGⅡ以第95個(gè)百分點(diǎn)為上限，PGⅠ/PGⅡ以第5個(gè)百分位數(shù)表示其參考區(qū)間的下限，見表4。

表4　血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ百分位數(shù)及參考范圍

3　討論

PGⅠ由胃底腺分泌，PGⅡ由胃底腺、賁門腺、幽門腺和Brunner腺分泌。胃底腺黏膜萎縮過程中，分泌PGⅠ的主細(xì)胞減少，幽門腺細(xì)胞增多，從而造成PGⅠ/PGⅡ比率降低。因此，PGⅠ/PGⅡ比率降低可以作為胃底腺黏膜萎縮的指征，臨床上檢測(cè)PGⅠ、PGⅡ并結(jié)合PGⅠ/PGⅡ比率可用于篩查胃底腺黏膜萎縮性疾病，而在與胃底腺黏膜萎縮性疾病相關(guān)疾病中，該指標(biāo)與萎縮性胃炎和胃癌相關(guān)。有研究顯示，當(dāng)PGⅠ＜70μg/L 和 PGⅠ/PGⅡ比率＜3.0作為cut off值時(shí)，胃底腺黏膜萎縮性疾病的診斷率最高，特異性為80%［6］。血清PG的檢測(cè)不能作為胃癌的確診試驗(yàn)，但其檢測(cè)簡(jiǎn)便，適用于大面積普查，當(dāng)臨床篩查發(fā)現(xiàn)可疑病例時(shí)，可及時(shí)通過胃鏡及病理檢查確診，以達(dá)到早發(fā)現(xiàn)、早治療的效果，而參考區(qū)間的建立是應(yīng)用篩查指標(biāo)的首要條件。血清PG的檢測(cè)方法有：放射免疫分析法（RIA）、免疫比濁法、時(shí)間分辨熒光免疫分析法（TRFIA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和化學(xué)發(fā)光微粒子免疫法（CMIA）。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外均有研究報(bào)道各地健康人群血清PG的參考區(qū)間［7-9］，通過對(duì)比可見，國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室在采用不同的檢測(cè)方法建立的PG參考區(qū)間存在較大差異。各種PG檢測(cè)方法均有優(yōu)缺點(diǎn)，由于試劑及廢液存在放射性污染可能以及檢測(cè)變異較大，臨床已較少使用；TRFIA敏感性高，但其試劑成本較高，且需要昂貴的儀器，應(yīng)用受到一定的限制；ELISA法試劑成本低廉，不需要昂貴的儀器，但敏感性偏低且誤差大，只能定性或半定量檢測(cè)，不能動(dòng)態(tài)觀察PG的變化，但可作為基層醫(yī)院的一種選擇；乳膠增強(qiáng)免疫比濁法可以用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，有較高的敏感性和特異性，操作簡(jiǎn)便，既可滿足臨床少量樣本檢測(cè)也適合于大批量健康普查。CMIA法同樣具有較高的敏感性、特異性和自動(dòng)化操作的特點(diǎn)，適合于大樣本調(diào)查研究，該方法也是本資料中采用的檢測(cè)方法。

血清PG的臨床意義可稱為對(duì)胃黏膜的“血清學(xué)活檢”，但由于檢測(cè)方法的不同，地域生活方式、飲食習(xí)慣的差異均可導(dǎo)致人群PG水平分布的不同。因此，實(shí)驗(yàn)室有必要選擇合適的檢測(cè)方法建立符合本地區(qū)人群特點(diǎn)的PG參考區(qū)間，并在檢測(cè)報(bào)告中注明使用的檢測(cè)方法。本資料中杭州地區(qū)健康人群血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ均呈偏態(tài)分布，根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，按性別分組計(jì)算參考區(qū)間無(wú)臨床意義，按年齡分組比較發(fā)現(xiàn)，隨著年齡增大PGⅠ和PGⅡ水平逐漸增大，PGⅠ/PGⅡ比率逐漸降低，且年齡組間PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ的差異明顯，說明年齡與PG水平變化存在一定關(guān)系，可以按年齡對(duì)PG建立參考區(qū)間。

參考區(qū)間的基本概念是此范圍代表一個(gè)特定的人群，人群的參考區(qū)間的建立是應(yīng)用檢測(cè)指標(biāo)的首要條件，是臨床實(shí)驗(yàn)室做好服務(wù)和質(zhì)量保證的重要任務(wù)之一，隨著新項(xiàng)目、新方法學(xué)的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用，勢(shì)必將不斷更新各種項(xiàng)目的參考區(qū)間，通過本資料結(jié)果可以基本了解杭州地區(qū)17～82歲健康人群血清PG水平，也為臨床提供符合本地人群特征的血清PG參考區(qū)間。

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Objective To establish reference interval of serum PGⅠ，PGⅡ and PGⅠ/PGⅡ ratio among health people in Hangzhou. Methods 1782 cases serum from health people were tested of PGⅠ and PGⅡ by Chemiluminescent microparticle immunoassay，PGⅠ/PGⅡ ratio was counted. 95% reference interval was calculated. Difference in PGⅠ、PGⅡ and PGⅠ/PGⅡ among different sex and age groups. Results 95% reference interval of PG among health people were PGⅠ：23.32～112.29μg/L，PGⅡ：≤23.20μg/L，PGⅠ/PGⅡ：≥2.97，respectively. Significant difference of PGⅠ/PGⅡ ratio between male and female were not observed（P＞0.05）. Serum levels of both PGⅠ and PGⅡ of above 40 years old people were higher than at age of below 40（P＜0.05）. Conclusion The reference interval of serum PG of health people in Hangzhou, as we established, could be helpful for screening atrophic gastritis and gastric cancer in clinic.

Pepsinogen Health Reference interval Chemiluminescent microparticle immunoassay

310006 杭州市第一人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室