格日勒，亓偉，王劍，鄔佳豪，朱啟慧，岳煒燁，柳靜

（銀川能源學(xué)院石油化工學(xué)院，寧夏銀川750011）

銀川市售水果中原花青素含量比較

格日勒，亓偉*，王劍，鄔佳豪，朱啟慧，岳煒燁，柳靜

（銀川能源學(xué)院石油化工學(xué)院，寧夏銀川750011）

用回流法提取銀川市售水果中果肉的原花青素，并用正丁醇-鹽酸法對(duì)原花青素含量進(jìn)行測(cè)定。同時(shí)分析和比較了銀川市售的部分水果原花青素的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，銀川市售水果中原花青素含量為0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，為5.45%；火龍果原花青素含量最低，為0.03%。對(duì)原花青素含量與水果種屬及水果顏色的深淺進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果表明，同種屬水果顏色深的原花青素含量較顏色淺的含量高。

原花青素；正丁醇-鹽酸法；分光光度；水果

原花青素（oligomeric proantho cyanidins，OPC）是一種有著特殊分子結(jié)構(gòu)的生物類(lèi)黃酮，是目前國(guó)際上公認(rèn)的清除人體內(nèi)自由基最有效的天然抗氧化劑，主要由不同數(shù)量的兒茶素和表兒茶素的單體、二聚體、三聚體到十聚體組合而成。按聚合度大小，二至四聚體稱(chēng)為低聚體，五聚體以上稱(chēng)為高聚體[1]。OPC擁有較強(qiáng)的抗氧化能力、清除自由基能力和改善人體微循環(huán)的能力，在體內(nèi)，其氧化功效是維生素E的50倍，維生素C的20倍[2]。原花青素是純天然抗氧化劑和高效的自由基清除劑，市售的原花青素提取物大多從葡萄科植物葡萄的種子提取得來(lái)，為紅棕色粉末，氣微、味澀。

原花青素具有一定的藥理作用，如抗炎、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老、改善免疫力、改善骨的形成、抗糖尿病、降血脂、降血壓、促進(jìn)傷口愈合、組織修復(fù)活性、抗癌作用、改善視覺(jué)功能等，對(duì)近70種疾病具有直接或間接的預(yù)防作用[3]，被廣泛應(yīng)用于食品、飲料、化妝品及保健品等領(lǐng)域[4]。健康問(wèn)題已成為人們當(dāng)今普遍關(guān)注的首要問(wèn)題。隨著健康意識(shí)的增強(qiáng)，水果中各成分也越來(lái)越引起人們的關(guān)注，尤其是其中的原花青素含量。葡萄籽中含有約5%的多酚類(lèi)物質(zhì)，多酚的主要成分是3種單體多酚（占總多酚的10%左右）和大量聚合多酚，其中單體多酚包括兒茶素、表兒茶素、表兒茶素沒(méi)食子酸；聚合多酚主要是原花青素（占總多酚的75%～85%）[5]。目前測(cè)定原花青素含量的方法主要有紫外分光光度法、原子吸收法、電化學(xué)法、硫酸-香草醛法[6]、高效液相法、正丁醇-鹽酸法、毛細(xì)管電脈沖法、香草醛-鹽酸法[7]等。香草醛-硫酸法在硫酸加入時(shí)會(huì)產(chǎn)生很高的熱量，從而使原花青素氧化分解，造成測(cè)量結(jié)果偏低[8-10]。正丁醇-鹽酸法反應(yīng)的特征性顯色顯著，操作簡(jiǎn)便，測(cè)定重現(xiàn)性較好。該文選用正丁醇-鹽酸法測(cè)定銀川市售水果中的原花青素含量并通過(guò)改變熱水溫度以改善對(duì)兒茶素等單體不反應(yīng)，而且對(duì)原花青素的高聚體的反應(yīng)也不是很完全的問(wèn)題。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

紫葡萄、藍(lán)莓、青葡萄、檸檬、珍珠果、紫李子、山竹、橘子、棗子、香蕉、紅蘋(píng)果、黃李子、黃蘋(píng)果、毛桃、芒果、石榴、杏子、梨、油桃、火龍果：市售。

原花青素標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥95%，批號(hào)：MUST-12032802）：成都曼斯特生物科技有限公司；石油醚（沸程30～60℃）、無(wú)水乙醇、硫酸鐵銨（含量＞99%）、鹽酸（含量36%～38%）、正丁醇（含量≥99.5%）：天津市富宇精細(xì)化工有限公司。

正丁醇-鹽酸：取12.5 mL濃鹽酸于250 mL容量瓶中，用正丁醇定容。

20mg/mL硫酸鐵銨溶液：取2g硫酸鐵銨固體于100 mL容量瓶中，加2 mol/mL鹽酸定容至100 mL。

1.2儀器與設(shè)備

UV-1800紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)：日本島津公司；YP1201N電子天平：上海精密科學(xué)儀器有限公司；DZKE-4型電子恒溫水浴鍋：上海樹(shù)立儀器儀表有限公司；DHG-9023A鼓風(fēng)式烘干箱：天津市順諾儀器科技有限公司；80-2B臺(tái)式離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.3方法

1.3.1原料預(yù)處理

將各待測(cè)的水果洗凈，將可食用部分切成小塊放入蒸發(fā)皿蒸干并不停攪拌，待大部分水蒸干后，放在恒溫水浴鍋上99℃恒溫蒸干60 min，放入烘箱12 h，粉碎，備用。

1.3.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的制備

精確稱(chēng)取干燥至質(zhì)量恒定的原花青素標(biāo)準(zhǔn)品0.1009g，用無(wú)水乙醇溶解并定容于100 mL容量瓶中，制得質(zhì)量濃度為1.009 mg/mL的原花青素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液[11-12]。

分別移取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL、2.5mL、5.0 mL、10mL、15.0 mL、20.0 mL、25.0 mL溶液于100 mL容量瓶中加入無(wú)水乙醇定容。制得10.09μg/mL、25.23μg/mL、50.45μg/mL、100.90 μg/mL、151.35 μg/mL、201.80 μg/mL、252.25 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列使用液。

1.3.3原花青素含量的測(cè)定

用電子天平精確稱(chēng)取10 g粉碎備用的各種水果可食部分，放入提取瓶中，按1∶3（g∶mL）加入石油醚脫脂[13]，60℃回流脫脂30 min，倒去石油醚，烘干。再向其中加入150 mL體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇，回流提取70min，過(guò)濾[14]。取濾液2mL于25mL比色管中，加入18mL正丁醇-鹽酸溶液和3滴20mg/mL硫酸鐵銨溶液，混勻后塞好瓶塞，在（95±1）℃熱水中加熱40 min后立即取出沖冷4 min，放置至室溫[15-19]，用正丁醇定容至25 mL。在波長(zhǎng)550 nm處用正丁醇調(diào)零，測(cè)定吸光度值，并按如下公司計(jì)算原花青素含量[20]。

式中：c為查工作曲線樣品溶液OD550nm對(duì)應(yīng)的原花青素含量，μg/mL；V1為待測(cè)樣品溶液的取樣體積，mL；V2為樣品定容的體積，mL；d為稀釋倍數(shù)；M為樣品質(zhì)量，g。

2　結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別吸取不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列使用液2mL于25mL比色管中，按1.3.3方法操作，測(cè)定吸光度值A(chǔ)，確定線性范圍。以吸光度值（A）為縱坐標(biāo)，原花青素質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)作圖。標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。

圖1　原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of procyanidins

由圖1看出，標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為A=-0.00172+0.00237C，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 66，在原花青素質(zhì)量濃度為10.09～252.25 μg/mL時(shí)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.2不同果品的原花青素含量比較

經(jīng)過(guò)正丁醇-鹽酸法測(cè)定水果的可食部分中原花青素含量，結(jié)果如表1所示。

表1　不同種類(lèi)果品的原花青素含量的比較Table 1 Comparison of procyanidins content of different kinds of fruits

由表1結(jié)果可知，20種銀川市售水果中原花青素含量為0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，為5.45%；火龍果原花青素含量最低，為0.03%。在已測(cè)得的水果中原花青素的含量從多到少依次為紫葡萄、藍(lán)莓、青葡萄、檸檬、珍珠果、紫李子、山竹、橘子、黃李子、棗子、香蕉、紅蘋(píng)果、黃蘋(píng)果、毛桃、芒果、石榴、杏子、梨、油桃、火龍果。

從水果中原花青素的含量可以看出，水果顏色較深的原花青素含量較高，水果的顏色較淺的原花青素含量低。顏色順序?yàn)樯钭仙⒕G色、黃色、橙色、淡紫色、紅色、淡紅色、淡黃色、粉色、白色，顏色逐漸變淺。

3　結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，銀川市售水果中原花青素含量為0.03%～5.45%，其中紫葡萄原花青素含量最高，為5.45%；火龍果原花青素含量最低，為0.03%。從水果中原花青素的含量可以看出，水果顏色較深的原花青素含量較高，水果的顏色較淺的原花青素含量低，水果可食部分含花青素多少的顏色順序依次為深紫色、綠色、黃色、橙色、淡紫色、紅色、淡紅色、淡黃色、粉色、白色。

水果中原花青素含量高低與水果種屬、氣溫、光照、土壤性狀等因素是否有關(guān)，這些問(wèn)題值得思考。探索水果中原花素含量高低形成的機(jī)理和影響因素，對(duì)人類(lèi)培育的果品中原花青素含量高低有決定性的作用。

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Comparison of procyanidin content of commercial fruits in Yinchuan

GERILE,QI Wei*,WANG Jian,WU Jiahao,ZHU Qihui,YUE Weiye,LIU Jing
(College of Petrochemial Technology,Yinchuan Energy Institute,Yinchuan 750011,China)

Procyanidins were extracted by solvent refluxing extraction from commercial fruits of Yinchuan,and the content was determined by n-butyl alcohol hydrochloric acid spectrophotometric method.At the same time,the contents of procyanidins in the fruits were analyzed and compared.The experimental results showed that the content of procyanidinsis in the fruits were 0.03%-5.45%,in which the procyanidins content in purple grapes were the highest of 5.45%,and in pitaya was the lowest of 0.03%.The relationship between the procyanidins content,fruit species,and color were analyzed,and the results showed that the procyanidins content of fruit with deep color was higher than that of light color in same species.

procyanidins;n-butyl alcohol-hydrochloric acid method;spectrophotometry;fruit

TS201.4

0254-5071（2016）08-0152-03

10.11882/j.issn.0254-5071.2016.08.034

2015-10-19

銀川能源學(xué)院教育教學(xué)質(zhì)量工程基金項(xiàng)目（2012-KY-C-02）；銀川能源學(xué)院科研基金項(xiàng)目（2012-KY-P-01）

格日勒（1971-）女，高級(jí)工程師，碩士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物分離與分析。

亓偉（1963-）女，高級(jí)工程師，本科，研究方向?yàn)樗幤?、保健食品開(kāi)發(fā)。