李 鑫

遼寧省朝陽(yáng)市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000

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HPLC法測(cè)定康爾心膠囊中丹參酮ⅡA的含量

李 鑫

遼寧省朝陽(yáng)市藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所，遼寧 朝陽(yáng) 122000

目的：建立以高效液相色譜法測(cè)定康爾心膠囊中丹參酮ⅡA的含量方法。方法：色譜柱為Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流動(dòng)相為甲醇-水(75∶25)；流速為1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。結(jié)果：丹參酮ⅡA在0.1598～3.196μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9995)，加樣回收率為98.192%(RSD=0.46%)。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確可靠、專屬性好，可用于康爾心膠囊的質(zhì)量控制。

康爾心膠囊；高效液相色譜法；丹參

康爾心膠囊由三七、人參、麥冬、丹參、枸杞子、何首烏、山楂等7味中藥組成，具有益氣活血、滋陰補(bǔ)腎之功效，能夠增加冠脈血流量，降血脂，用于治療冠心病、心膠痛、胸悶氣短等癥，是臨床常用的中成藥。處方中的丹參具有活血化瘀、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰的療效，用于胸痹心痛、心煩不眠等癥，而丹參酮ⅡA是其主要活性成分。本品收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第二冊(cè)，但標(biāo)準(zhǔn)中只對(duì)性狀、理化鑒別及檢查項(xiàng)確定了檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，并未對(duì)其主成分丹參進(jìn)行質(zhì)量控制。為了控制康爾心膠囊的藥品質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜法對(duì)其處方中的丹參酮ⅡA進(jìn)行了定量分析[1-7]。報(bào)告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 島津LC-2010A型高效液相色譜儀(包括LC-2010型紫外檢測(cè)器， LC solution色譜工作站)；微孔濾膜(0.45μm)；BSA224S-CW型萬(wàn)分之一電子天平(賽多利斯科學(xué)有限公司)；BP211D型十萬(wàn)分之一電子天平(賽多利斯科學(xué)有限公司)；HQ3120型超聲儀(翡納米科技發(fā)展有限公司)。1.2 材料 康爾心膠囊(批號(hào)：141001、141004、151004，遼寧可濟(jì)藥業(yè)有限公司)，丹參酮ⅡA對(duì)照品(批號(hào)：110766-200619，中國(guó)藥品生物制品檢定所)，甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑為分析純。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性研究 色譜柱Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流動(dòng)相為甲醇-水(75∶25)；流速為1.0mL/min；柱溫為室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm；進(jìn)樣量為10μL；理論板數(shù)：按丹參酮ⅡA計(jì)算不低于2000。分離度大于1.5，峰形良好，陰性無(wú)干擾(見(jiàn)圖1)。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取0.01598g丹參酮ⅡA對(duì)照品，置50mL的棕色容量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，混勻，得對(duì)照品的儲(chǔ)備液。再精密吸取5mL對(duì)照品儲(chǔ)備液置10mL的棕色容量瓶中，用甲醇定容，混勻。

2.3 供試品溶液的制備 取研細(xì)的內(nèi)容物約1.0g，精密稱定，置帶塞錐形瓶中，精加50mL甲醇，稱定重重，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。

2.4 空白試驗(yàn) 按照處方制法制備無(wú)丹參的陰性對(duì)照樣品，按照“2.3供試品溶液的制備”的方法制備。

2.5 線性關(guān)系考察 分別吸取1、5、10、15、20μL對(duì)照品溶液注入LC-2010A型高效液相色譜儀，記錄高效液相色譜圖。橫坐標(biāo)(X)為對(duì)照品進(jìn)樣量為，縱坐標(biāo)(Y)為峰面積積分值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y=46.2+51815.8X，r=0.9995，結(jié)果表明丹參酮ⅡA在0.1598～3.196μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3項(xiàng)下的供試品溶液”，分別于0、2、4、8、12、48h時(shí)測(cè)定，記錄峰面積，RSD為0.78%。表明供試品溶液在48h內(nèi)是比較穩(wěn)定的。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 分別取5份樣品(批號(hào)為141001)，制備方法同供試品溶液，測(cè)定，RSD為0.81%，說(shuō)明該方法的重復(fù)性良好。

2.8 精密度試驗(yàn) 精密吸取10μL對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄對(duì)照品峰面積，RSD為0.63%，說(shuō)明儀器有良好的精密度。2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知丹參酮ⅡA含量的樣品(含量為6.1919mg/g)0.5g，分別精密加入丹參酮ⅡA對(duì)照品，按供試品溶液方法制備，依法測(cè)定含量并計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

2.10 樣品含量測(cè)定 分別取3批樣品，按上述方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品中丹參酮ⅡA的測(cè)定結(jié)果 (n=5)

3 討論

3.1 研究對(duì)康爾心膠囊中丹參的主要有效成分丹參酮ⅡA建立了含量測(cè)定方法，結(jié)果可靠，對(duì)改進(jìn)康爾心膠囊制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有一定意義。

3.2 為了保證樣品中丹參酮ⅡA被充分提取出來(lái)，分別采用回流0.5h、回流1h，回流2h和超聲30min的不同提取時(shí)間，50%甲醇，70%甲醇，甲醇不同提取溶劑進(jìn)行了考察，測(cè)定結(jié)果表明回甲醇作為提取溶劑，回流提取1h有效成分能被充分提取出來(lái)[8-9]。

3.3 將流動(dòng)相甲醇-水比例調(diào)整為(70∶30)、(75∶25)、(65∶35)分別進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果甲醇-水(75∶25)分離效果最好。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中國(guó)人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑(第一冊(cè))[S].1989.

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(編輯：程鵬飛)

2016-07-11

李鑫(1985-)，男，漢族，碩士，主管中藥師，研究方向?yàn)橹谐伤幖爸兴幉牡蔫b定及檢驗(yàn)。E-mail:lixin850801@126.com

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