張淑梅,韋方劍,鄧建新,賀燕
(1.江蘇省連云港市贛榆區(qū)畜牧獸醫(yī)站,江蘇連云港 222100;2.連云港市畜產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心,江蘇連云港 222001)
禽流感新城疫二聯(lián)重組活疫苗在鵪鶉中的應(yīng)用試驗(yàn)與探討
張淑梅1,韋方劍1,鄧建新1,賀燕2
(1.江蘇省連云港市贛榆區(qū)畜牧獸醫(yī)站,江蘇連云港222100;2.連云港市畜產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心,江蘇連云港222001)
目前國內(nèi)還沒有規(guī)范的用于鵪鶉的禽流感免疫程序,傳統(tǒng)使用禽流感滅活疫苗免疫,而鵪鶉的個(gè)體小,注射免疫困難,導(dǎo)致了免疫密度低,免疫效果差,存在一定的疫情隱患。通過應(yīng)用禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rLH5-6株)在鵪鶉群中進(jìn)行注射、滴鼻、點(diǎn)眼、飲水等不同方式的應(yīng)用試驗(yàn),制訂科學(xué)的、規(guī)范的免疫程序,以實(shí)現(xiàn)鵪鶉高致病性禽流感、新城疫免疫科學(xué)、經(jīng)濟(jì)、高效目標(biāo)。
鵪鶉;禽流感rLH5;新城疫;免疫;應(yīng)用試驗(yàn)
目前,我國禽流感防控工作取得了重大進(jìn)展。禽流感H5N1亞型滅活苗、H5N1+H9二價(jià)滅活苗日趨完善,以其生物安全、免疫效果穩(wěn)定、免疫副反應(yīng)小的特點(diǎn)被社會接受,并廣泛應(yīng)用于禽流感防控工作,在此基礎(chǔ)上以免疫為主的綜合防控措施的全面實(shí)施,有效地控制了禽流感疫情,家禽禽流感疫情趨于平穩(wěn)。
隨著畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的不斷深入,我區(qū)養(yǎng)禽業(yè)有了較大的發(fā)展,規(guī)模養(yǎng)禽已成為當(dāng)今我區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展的突出的亮點(diǎn)。全區(qū)鵪鶉年飼養(yǎng)量從上世紀(jì)80年代中期的1000萬羽增至2014年的3000多萬羽。全區(qū)規(guī)模鵪鶉養(yǎng)殖大戶發(fā)展到800多戶,其中2000羽以上的鵪鶉養(yǎng)殖戶300多家,5000羽以上的鵪鶉養(yǎng)殖戶100多家,1萬羽以上的鵪鶉養(yǎng)殖戶70多家。但目前國內(nèi)還沒有規(guī)范的用于鵪鶉的禽流感免疫程序,傳統(tǒng)使用禽流感滅活疫苗免疫,因滅活疫苗僅能注射免疫,而鵪鶉的個(gè)體小,注射免疫困難,導(dǎo)致了免疫密度低,免疫效果差,存在一定的疫情隱患。
禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rLH5-6株)是哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司研制生產(chǎn)的一種新型疫苗,具有注射、滴鼻、點(diǎn)眼、飲水等免疫方式的多樣性,因此,通過對禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗在鵪鶉群中進(jìn)行注射、滴鼻、點(diǎn)眼、飲水等不同方式的應(yīng)用試驗(yàn),制訂科學(xué)的、規(guī)范的免疫程序及配套的免疫操作規(guī)范和消毒規(guī)范等,以實(shí)現(xiàn)鵪鶉高致病性禽流感、新城疫免疫科學(xué)、經(jīng)濟(jì)、高效目標(biāo),我們開展了禽流感、新城疫二聯(lián)活疫苗在鵪鶉中的應(yīng)用試驗(yàn)研究,現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下并作相關(guān)探討:
1.1試驗(yàn)在3個(gè)養(yǎng)殖場,每場分5組進(jìn)行
第1組:7日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗1羽份滴鼻,22日齡新城疫—禽流感重組二聯(lián)活疫苗2羽份飲水,50日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.5mL肌注。
第2組:7日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗1.5羽份滴鼻,22日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.5mL肌注。
第3組:7日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗1羽份飲水,22日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.5mL肌注。
第4組:15日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.3mL肌注,35日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.5mL肌注。
第5組:7日齡新城疫Ⅳ系活疫苗1羽份滴鼻,22日齡禽流感、新城疫感重組二聯(lián)活疫苗2羽份飲水。
1.2試驗(yàn)用疫苗
禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rLH5-6株)由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn),其批準(zhǔn)文號為:獸藥生字(2012)080012194。重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn),其批準(zhǔn)文號為:獸藥生字(2014)080012228。雞新城疫活疫苗(La Sota株)由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn),其批準(zhǔn)文號為:獸藥生字(2011)080072007。
1.3檢測方法
采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)的方法監(jiān)測H5N1禽流感及新城疫免疫抗體。
在試驗(yàn)過程中同時(shí)檢測ND和禽流感H5N1二種抗體,分別選擇一免后的7、14、21、28、35d進(jìn)行抗體監(jiān)測,獲取ND和禽流感H5N1二種抗體消長規(guī)律。進(jìn)行二免的選擇二免后的10、20、30、45、60、80、100d進(jìn)行監(jiān)測,觀察抗體變化情況,獲取ND和禽流感H5N1二種抗體消長規(guī)律。進(jìn)行三次免疫的選擇三免后分別在10、20、35、50、70、90、110、125、140、150d進(jìn)行免疫抗體監(jiān)測,獲取ND和禽流感H5N1二種抗體消長規(guī)律。
1.4應(yīng)用試驗(yàn)時(shí)間
2015年2月27日~6月2日。
每組每次采樣監(jiān)測20羽,檢測的抗體滴度用log2表示。
3.1通過應(yīng)用試驗(yàn),禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rLH5-6)對鵪鶉的免疫效果不很理想,免疫抗體效價(jià)偏低,同時(shí)說明鵪鶉對禽流感病毒易感性不高。
3.2選擇合理的免疫方式和合理加大免疫劑量,可以縮短免疫保護(hù)空白期,提高免疫抗體滴度和免疫合格率,延長免疫抗體的半衰期,進(jìn)而可以實(shí)現(xiàn)延長免疫保護(hù)期的目的。
3.3在應(yīng)用禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗(rLH5-6株)對鵪鶉進(jìn)行免疫的過程中,選擇用禽流感滅活苗和新城疫弱毒苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫可以提高免疫效果。
3.4根據(jù)上述研究的結(jié)果,建議蛋用鵪鶉禽流感H5N1和新城疫的免疫,按照以下程序進(jìn)行:19日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗1羽份飲水,26日齡禽流感H5N1滅活疫苗0.3mL肌注,90日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗肌肉注射1羽。
肉用鵪鶉禽流感H5N1和新城疫的免疫,按照以下程序進(jìn)行:7日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗1羽份滴鼻,24日齡禽流感、新城疫重組二聯(lián)活疫苗2羽份飲水。
4.1關(guān)于首免日齡選擇問題的探討。農(nóng)業(yè)部推薦禽流感H5N1滅活疫苗首免日齡是7~14日齡。國內(nèi)禽流感H5N1滅活疫苗生產(chǎn)廠家推薦的免疫劑量是7~20日齡0.3mL/羽,21日齡以上是0.5mL/羽。在實(shí)際免疫過程中,雛鵪鶉注射滅活苗非常困難,推廣難度大。根據(jù)試驗(yàn)已得的結(jié)果,本課題組認(rèn)為肉用鵪鶉在7日齡、種鵪鶉和蛋鵪鶉在15~20日齡以后進(jìn)行首免疫是比較好的選擇。
4.2鵪鶉免疫抗滴度維持在多少范圍內(nèi)對鵪鶉的保護(hù)比較安全,這個(gè)問題需進(jìn)行攻毒試驗(yàn)才能得出結(jié)論。
4.3種鵪鶉的免疫抗體滴與同一檢測時(shí)間種蛋出雛的母源抗體之間的差距也是探討內(nèi)容之一。
第1組 免疫抗體檢測結(jié)果
第2組 免疫抗體檢測結(jié)果
第3組 免疫抗體檢測結(jié)果
第4組 免疫抗體檢測結(jié)果
第5組 免疫抗體檢測結(jié)果
10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.11.016